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1、廈門(mén)大學(xué)碩士學(xué)位論文中國(guó)水仙轉(zhuǎn)IPT基因的研究姓名:曾榮華申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專(zhuān)業(yè):細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師:沈明山陳亮2001.7.1StudiesonG;eneticTransformationofNarcissustazettaLvarchinens缸R(shí)oembyIPTGeneABSTRACTNarcissustazettahasgreatvalueasallimportantflowerplantinChinan坨autolatorys
2、enescenceinhibitionsystemconstructedbyfusingleafsenescencespecificpromoterwitll伊TgeneiSappliedtothetransformationofnarcissusinthisexperiment/PTexpressioninthetransgenicplantCandelayleafsenescencebyincreasingendogerouscyt
3、okininlevelAtthesametime,wehaveinthefirstestablishedgenetictransfonTtationsystemofnarcissusthroughtheguideofGUSreportergeneThemainresultsareasbelow:1TissuecultureprocedureinthenarcissusgenericUansformationWasdevelopedAno
4、fbulbsinitiatedregenerationofbulbilsdirectlywhenculturedinMsmediumsupplementedwith6BA(4mg/L)NAA(05mg/L)thecoefficientofregenerationis112:Attheotherhandabout742%offlowerpedunclesinducedcalliwhenculturedinMS6BA(1mg/L)NAA(5
5、mg/L),andthecallicarldifferentiategreatmanybulbilsinMS6一BA(4mg/L)NAA(05meJL),thecoefficientofdifierentiationis1292EstablishedemcienttransgenieteehnologyofnarcissusThechimericPCMV35SGUSandPSAOl2儼Tgenesweretrailsforrnedint
6、onarcissusmediatedbyAgrobacteriumtumefaciensAbout95%ofbulbsindicatedexpressionofGUSreportergeneailerCO—cultivating3dayswithagrobacteriumSOdid85%offlowerpedunclesOtherwisetherewere15%oftransformedbulbsandallofflowerpedunc
7、lesthatCOuldregeneratebulbils3Intervalscreeningwasadoptedtoscreentransformednarcissustissue293%oftransformedtissueObtainedtheresistancetoHygand20%oftheHygtissueindicatedexpressionofGUSgeneTransformedtissueregeneratedbulb
8、ilsinMS6BA(4mg/L)NAA(05mg/L),thecoefficientofregenerationis34TherehadexpressionofGUSgeneintransgenicplantleaf4PCRanalysisshowedthat14%oftheHygrtissuehadpositiveband;PCRSouthemindicatedthatitwasthefragmentofPSAGl2Southern
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