日本對(duì)蝦肝胰腺及血細(xì)胞的培養(yǎng).pdf

1、該文研究了日本對(duì)蝦肝胰腺和血細(xì)胞的培養(yǎng),并采用培養(yǎng)細(xì)胞的RNA/DNA值進(jìn)行細(xì)胞生長(zhǎng)狀況的評(píng)定.首先,在日本對(duì)蝦的肝胰腺和血細(xì)胞原代培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,利用RNA/DNA值進(jìn)行不同pH值培養(yǎng)基的比較,認(rèn)為對(duì)于肝胰腺細(xì)胞pH7.6為最適值,對(duì)于血細(xì)胞pH7.2為最適值,同時(shí)利用光鏡及電鏡做了一些形態(tài)和結(jié)構(gòu)上的觀察,在電鏡下觀察到的日本對(duì)蝦血細(xì)胞為無(wú)顆粒狀細(xì)胞.其次,摸索了肝胰腺細(xì)胞的培養(yǎng)條件,實(shí)驗(yàn)采用199培養(yǎng)基,并在其基礎(chǔ)上添加胎牛血清、Na

2、Cl、CaCl<,2>、MgCl<,2>、NaHCO<,3>、葡萄糖和其它無(wú)機(jī)離子,滲透壓用NaCl等調(diào)節(jié),分別在三種pH值、三種滲透壓和三種Zn<'2+>濃度下,原代培養(yǎng)日本對(duì)蝦肝胰腺細(xì)胞,并以RNA與DNA的比值為指標(biāo)評(píng)定其生長(zhǎng)狀況.結(jié)果為日本對(duì)蝦肝胰腺細(xì)胞在pH7.6、滲透壓為730mmol/Kg和Zn<'2+>濃度為80μg/L時(shí),生長(zhǎng)最好.然后,探討了金屬離子對(duì)培養(yǎng)日本對(duì)蝦肝胰腺細(xì)胞的影響,在培養(yǎng)基中加入Ca<'2+>、Mg<

3、'2+>、Ca<'2+>+Mg<'2+>和Zn<'2+>,以測(cè)定細(xì)胞的RNA/DNA值作為評(píng)價(jià)指標(biāo),結(jié)果表明,加入適量金屬離子可促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng),各組細(xì)胞的RNA/DNA值均高于對(duì)照組,培養(yǎng)基中混合加入Ca<'2+>和Mg<'2+>有助于細(xì)胞貼壁生長(zhǎng).最后,實(shí)驗(yàn)在199培養(yǎng)基中加入促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的亞油酸,對(duì)日本對(duì)蝦肝胰腺細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng),測(cè)定傳代細(xì)胞的總磷和無(wú)機(jī)磷含量,當(dāng)亞油酸的加入量為16×10<'-5>M時(shí),細(xì)胞的總磷和有機(jī)磷含量均為最高