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1、喹諾酮是一類(lèi)廣譜性的抗菌藥,具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、給藥方便等優(yōu)點(diǎn),被廣泛應(yīng)用于人和動(dòng)物的臨床治療中。長(zhǎng)期食用喹諾酮類(lèi)殘留超標(biāo)的畜禽產(chǎn)品造成人體間接長(zhǎng)時(shí)間吸收該類(lèi)藥物,危害人體健康,引發(fā)不良反應(yīng)。為了盡量減少獸藥在動(dòng)物食品中殘留對(duì)人體健康的危害,世界大多數(shù)國(guó)家已經(jīng)對(duì)動(dòng)物源食品中的獸藥最高殘留量(MRL)做出了具體規(guī)定。本論文以氧氟沙星、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、洛美沙星、諾氟沙星五種喹諾酮類(lèi)抗生素為分析物,開(kāi)展了高靈敏檢測(cè)方法和高效凈化方法的研究,具體
2、研究和取得的結(jié)果如下:
建立了以CdTe量子點(diǎn)作為背景熒光物質(zhì)的毛細(xì)管電泳—間接激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)食品中5種喹諾酮類(lèi)抗生素含量的新方法。討論了CdTe量子點(diǎn)濃度、硼酸鹽濃度、pH、SDS濃度和分離電壓對(duì)分析物峰高和遷移時(shí)間的影響。優(yōu)化的緩沖溶液pH為8.8、SDS濃度為20 mmol/L、CdTe濃度為7.2 mg/L、硼酸鹽濃度為10 mmol/L、分離電壓20 kv、緩沖溶液穩(wěn)定時(shí)間4-6 h。在此條件下,對(duì)氧氟沙星、恩諾沙
3、星、洛美沙星、環(huán)丙沙星和諾氟沙星在8 min內(nèi)得到分離,在牛奶和蜂蜜樣品中的檢出限為0.003-0.008 mg/kg;線性范圍均為0.01-10mg/kg;平均回收率在81.4%-94.6%之間。方法可滿足日本及歐盟最大殘留允許限量的要求,并用于動(dòng)物樣品中喹諾酮類(lèi)抗生素殘留的測(cè)定。
建立了沉淀聚合法制備氧氟沙星和恩諾沙星復(fù)合模板分子印跡聚合物微球的方法。優(yōu)化了功能單體與模板分子、兩種模板分子和功能單體與交聯(lián)劑的摩爾比、有機(jī)溶
4、劑的用量。最佳制備條件為n(氧氟沙星)∶n(恩諾沙星)=1∶1;n(氧氟沙星+恩諾沙星)∶n(甲基丙烯酸)=1∶4;n(甲基丙烯酸)∶n(乙二醇二甲基丙烯酸酯)=1∶5;220 mL的乙腈;0.2 mmol引發(fā)劑偶氮二異丁腈;聚合溫度60℃,聚合時(shí)間16h。所得的分子印跡聚合物對(duì)模板氧氟沙星和恩諾沙星的印跡評(píng)價(jià)指標(biāo)IPB為160.26%和154.7%。Sctachard分析表明,印跡聚合物具有兩類(lèi)不同性質(zhì)的親和性吸附位點(diǎn),氧氟沙星高親和
5、力結(jié)合位點(diǎn)的平衡常數(shù)為0.266mmol/L,最大表觀吸附量為44.094μmol/g;低親和力結(jié)合位點(diǎn)的平衡常數(shù)為0.827 mmol/L,最大表觀吸附量為85.047μmol/g。恩諾沙星高親和力結(jié)合位點(diǎn)的平衡常數(shù)為0.344 mmol/L,最大表觀吸附量為46.450μmol/g;低親和力結(jié)合位點(diǎn)的平衡常數(shù)為0.970 mmol/L,最大表觀吸附量為87.913μmol/g。印跡聚合物微球重復(fù)10次吸附性能無(wú)明顯下降。
6、以氧氟沙星和恩諾沙星復(fù)合模板分子印跡聚合物微球?yàn)楣滔噍腿≈奶盍现苽淞朔肿佑≯E固相萃取柱,用于牛奶中痕量喹諾酮類(lèi)抗生素殘留檢測(cè)的樣品凈化。以乙腈-水(98∶2,V/V)溶液為上樣溶劑,0.5 mL/min的流速流過(guò)分子印跡固相萃取柱,上樣量3 mL;用4mL乙腈-甲醇(80∶20,V/V)進(jìn)行淋洗;最后以5mL甲醇-乙酸-水(70∶10∶20)進(jìn)行洗脫。結(jié)果表明,5種喹諾酮類(lèi)抗生素的回收率均高于HLB柱。經(jīng)毛細(xì)管電泳檢測(cè),電泳圖結(jié)果表明
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