環(huán)境雌激素17β-E2對櫛孔扇貝內(nèi)分泌干擾的作用機制.pdf

1、環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(Endocrine disrupting chemicals,EDCs)是指能夠影響生物體正常內(nèi)分泌行為的外源性化學物質(zhì)。這些物質(zhì)通過影響生物體體內(nèi)激素的合成、貯存、分泌和轉(zhuǎn)運,使內(nèi)分泌系統(tǒng)失調(diào),進而阻礙或干擾繁殖、生長發(fā)育等正常生物功能。目前,有關(guān)EDCs影響或干擾生物內(nèi)分泌的研究主要集中在脊椎動物。無脊椎動物占動物種類數(shù)的95％以上,其研究主要是集中在有機錫污染導致螺類雄性化方面,而關(guān)于環(huán)境雌激素對無脊椎動物內(nèi)分泌

2、影響的研究則相對缺乏。近年,各國相繼發(fā)現(xiàn)沿海雙殼類生物性腺組織發(fā)生性畸變(雄性雌性化),這對無脊椎動物的繁殖、種群穩(wěn)定和生態(tài)功能產(chǎn)生了潛在的危害。因此,揭示雙殼類發(fā)生性畸變的毒理機制是一個重要的環(huán)境科學問題,對加強環(huán)境EDCs的風險管理具有重要意義。
　　本研究以我國沿海廣泛分布并具有重要經(jīng)濟價值的櫛孔扇貝(Chlamys farreri)為研究對象,首先利用LC-MS/MS分析了櫛孔扇貝繁殖周期的內(nèi)源激素水平變化,發(fā)現(xiàn)隨著性腺發(fā)

3、育精巢組織中睪酮(testosterone,T)由低到高達到一個峰值后降低,而雌二醇(17β-estradiol,E2)的濃度水平隨著性腺發(fā)育逐漸升高,但在成熟期之前急劇下降,并沒有表現(xiàn)出和性腺發(fā)育相同的趨勢;而雌酮(estrone,E1)濃度水平明顯低于E2和T,并且在整個繁殖周期沒有發(fā)生明顯變化;卵巢組織中E2水平明顯高于精巢,并在成熟期達到最高值,排卵后迅速下降,并與性腺發(fā)育周期變化相一致。而 T的濃度水平呈現(xiàn)兩個峰值。另外,E1

4、的濃度水平較精巢略高。這些結(jié)果表明內(nèi)源性激素與配子發(fā)育具有相關(guān)性。在此基礎(chǔ)上,對繁殖相關(guān)基因:Vtg、ER、CaM-1和CaM-2mRNA的表達水平進行定量,發(fā)現(xiàn)Vtg和CaMs mRNA表達水平隨性腺發(fā)育呈上升趨勢,而ER mRNA表達水平則始終保持較低水平,說明雌激素的作用并不是通過ER受體途徑,而是可能存在其它的作用途徑。
　　為了進一步探討雌激素的作用機制,我們利用二代高通量測序技術(shù)(454)測定了暴露于E2條件下櫛孔扇貝