凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei)血藍(lán)蛋白免疫作用的初步研究.pdf

1、本文研究了注射磷脂酰絲氨酸（PS）和病原菌對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響。主要內(nèi)容包括：
　?、僮⑸淞字＝z氨酸對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響；
　?、谧⑸涔S氏弧菌和金黃色葡萄球菌對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響。
　　主要研究結(jié)果如下：
　　1、注射PS對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響
　　結(jié)果表明：注射0.25,0.5,1μg PS對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋

2、白含量、p75和p77亞基、mRNA表達(dá)以及血細(xì)胞總數(shù)（THC）、血細(xì)胞酚氧化酶原（pro-PO）、血漿酚氧化酶（PO）、血藍(lán)蛋白酚氧化酶（Hd-PO）以及抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）,而對照組無顯著變化。血藍(lán)蛋白含量在6h內(nèi)略有下降，6~36h內(nèi)呈峰值變化，24h時(shí)達(dá)到最大值；血藍(lán)蛋白亞基p75、p77和基因表達(dá)在0~36h內(nèi)呈峰值變化，12h時(shí)達(dá)到最大值。THC和pro-PO活力在0~12h內(nèi)處于下降趨勢，并在12h處達(dá)到

3、最低值；PO活力在48h內(nèi)呈峰值變化，于12h處達(dá)到最高值；Hd-PO活性在36h內(nèi)呈峰值變化，12h時(shí)達(dá)到最大值?？咕腿芫盍Ψ謩e在36h和48h之內(nèi)呈峰值變化，并分別于12h和24h處達(dá)到最高值。由此說明，PS能夠激活凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白的酚氧化酶活性，引起一系列免疫指標(biāo)的變化，表現(xiàn)出明顯的時(shí)間劑量效應(yīng)，在短時(shí)間內(nèi)引起血藍(lán)蛋白含量下降，隨后機(jī)體啟動(dòng)血藍(lán)蛋白的合成機(jī)制，證實(shí)PS是凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白發(fā)揮酚氧化酶活性的激活因子，同時(shí)PS還

4、是對蝦體內(nèi)的一種免疫刺激物質(zhì)，為對蝦血藍(lán)蛋白免疫活性的研究奠定了理論基礎(chǔ)。
　　2、注射哈維氏弧菌和金黃色葡萄球菌對凡納濱對蝦血藍(lán)蛋白合成、酚氧化酶活性的影響
　　結(jié)果表明，哈維氏弧菌（Vibro harveyi）（×105cells/mL,×106cells/mL）和高濃度組（×106cells/mL）金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aureus）對血藍(lán)蛋白含量、p75和p77亞基、mRNA表達(dá)以及血漿PO、

5、Hd-PO以及抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）,而對照組則無顯著變化。在48h之內(nèi)：血藍(lán)蛋白含量呈波動(dòng)趨勢，12h降為最低值，24h達(dá)最大；血藍(lán)蛋白p75、p77亞基和mRNA表達(dá)呈峰值變化，其中p75、p77亞基表達(dá)于24h達(dá)峰值，mRNA表達(dá)于12h處達(dá)峰值。血漿PO和Hd-PO活力在24h處達(dá)最高值；抗菌和溶菌活力分別在12h和24h達(dá)最大值。
　　低濃度組金黃色葡萄球菌（×105cells/mL）對血藍(lán)蛋白合成、酚氧

6、化酶活性影響不顯著，對血漿抗菌和溶菌活力影響顯著（P<0.05）。其中，48h之內(nèi)抗菌活力在12h達(dá)到最大值，而溶菌活力在24h處達(dá)到最大值。所有處理組中血細(xì)胞抗菌肽penaedin1/2表達(dá)不顯著。
　　結(jié)果說明，對蝦在病原菌哈維氏弧菌入侵下啟動(dòng)了血藍(lán)蛋白的合成，誘導(dǎo)血藍(lán)蛋白基因的表達(dá)，新合成的血藍(lán)蛋白主要執(zhí)行酚氧化酶（Hd-PO）等免疫功能，參與免疫防御，進(jìn)一步提升血淋巴中pro-PO激活系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)作用；注射高濃度的金黃色