嗜鹽菌的分離鑒定及其應(yīng)用研究.pdf

1、中度嗜鹽菌有廣泛的耐鹽性，用途較廣。近年來，中度嗜鹽菌在環(huán)境生物治理、生產(chǎn)相容性溶質(zhì)以及嗜鹽菌與耐鹽植物協(xié)同修復(fù)鹽堿土壤的研究日益受到關(guān)注。
　　 本文從不同鹽堿土壤中分離、純化了8種微生物；針對(duì)嗜鹽菌伸長鹽單胞菌(Halmonaselogata)，研究了其降解偶氮染料活性蘭BRF的優(yōu)化條件、考察了影響其分泌四氫嘧啶(Ectoine)的因素；利用得到的4種微生物制成復(fù)合菌肥，初步試驗(yàn)了微生物復(fù)合菌肥與堿蓬協(xié)同修復(fù)鹽堿土壤的效果，

2、主要研究成果如下：
　　 (1)微生物的分離純化及鑒定。從青島王哥莊、青島鹽場(chǎng)、東營榆林和新疆鹽土分離得到8種微生物，經(jīng)SEM分析，4種為細(xì)菌，2種為放線菌，2種為真菌。其中，細(xì)菌N1、N2、N3在小于10％NaCl培養(yǎng)基中均可以生長，為耐鹽的革蘭氏陰性球菌；細(xì)菌N4耐鹽范圍較廣，可以在0～32％含鹽量的培養(yǎng)基上生長，最適生長含鹽量為5～20％，為嗜鹽菌，通過形態(tài)特征、生理生化及16s rDNA序列分析鑒定為伸長鹽單胞菌(H.e

3、logata)。
　　 (2)伸長鹽單胞菌(H.elogata)對(duì)偶氮染料活性蘭BRF的降解作用研究。比較了不同含鹽量條件下的降解率，在30℃、5％含鹽量生長條件下采用單因素實(shí)驗(yàn)考察了該菌接菌量、染料初始濃度、初始pH等因素對(duì)72 h降解率的影響，采用正交試驗(yàn)L9(33)獲得適宜的降解條件。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，在含鹽量為3～25％條件下該菌株對(duì)活性蘭BRF的降解率隨著含鹽量的升高先升后降，5％含鹽量下的降解效果最佳；在30℃、5％含鹽

4、量下適宜降解條件為：染料濃度100 mg·L-1，pH=7，接菌量5％，72h的降解率為88.62％。紫外-可見光譜結(jié)果顯示降解產(chǎn)物的光譜與活性蘭BRF的明顯不同，可見光區(qū)的吸收峰消失；降解產(chǎn)物的正己烷萃取液無紫外吸收，二氯甲烷萃取液在紫外光區(qū)出現(xiàn)兩個(gè)紫外吸收峰，結(jié)合質(zhì)譜結(jié)果，得到降解產(chǎn)物為苯甲基二胺，2，6-二氨基苯酚等極性化合物。
　　 (3)伸長鹽單胞菌(H.elogata)合成四氫嘧啶的影響因素研究。當(dāng)存在外界滲透壓沖擊

5、時(shí)，伸長鹽單胞菌(H.elogata)能夠自身合成胞內(nèi)相容性溶質(zhì)四氫嘧啶應(yīng)對(duì)其變化。考察了含鹽量、谷氨酸單鈉濃度、氮源濃度等因素對(duì)四氫嘧啶合成量的影響，結(jié)果表明：含鹽量的影響最大，且含鹽量、谷氨酸單鈉濃度、氮源濃度三個(gè)因素之間的相互作用較強(qiáng)；在含鹽量為5％，氮源含量為0.5％，谷氨酸單鈉為6％時(shí)，實(shí)驗(yàn)得到四氫嘧啶的最大合成量為0.447 g·L-1。
　　 (4)復(fù)合菌肥與堿蓬協(xié)同修復(fù)鹽堿土壤的初步研究。復(fù)合菌肥由四種細(xì)菌與草炭