凋亡抑制基因的Bcl-2和Bcl-x1在菌核病和黃萎病抗性中的研究.pdf

1、棉花是世界上最重要的經(jīng)濟(jì)作物之一，是天然纖維的最主要來源，我國(guó)是世界棉花生產(chǎn)的主要國(guó)家之一，棉花生產(chǎn)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展，對(duì)于我國(guó)的經(jīng)濟(jì)社會(huì)的發(fā)展具有重要的意義。然而棉花黃萎病卻成為我國(guó)棉花發(fā)展的嚴(yán)重阻礙之一，在生產(chǎn)上一直沒有選育出能抗多菌系的棉花品種。油菜是我國(guó)最主要的油料作物，但菌核病的存在是發(fā)展油菜生產(chǎn)的主要限制因素之一。前人的研究結(jié)果證明抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl能夠促進(jìn)植物細(xì)胞對(duì)生物和非生物的抗性，但其作用機(jī)制不是很清楚。本

2、文通過克隆這2個(gè)基因并在擬南芥中異位表達(dá)，通過分別接種菌核病和黃萎病菌系，以其闡明抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl在促進(jìn)植物對(duì)菌核病和黃萎病抗性中的作用。
　　通過構(gòu)建抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl植物雙元表達(dá)載體，利用Floral dip法將其轉(zhuǎn)入擬南芥哥倫比亞生態(tài)型中。通過Kan抗性篩選，獲得可遺傳的轉(zhuǎn)基因陽性苗，并通過DNA、RT-PCR和GUS等多水平檢測(cè)，證明了抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl成功整合到擬南芥基因

3、組中。
　　為了證明抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl是否對(duì)菌核病和黃萎病具有抗性作用，利用轉(zhuǎn)基因擬南芥T1代陽性苗接種核盤菌和黃萎病菌VD8，觀察接種后的擬南芥發(fā)病特征。發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)Bcl-2和Bcl-xl的轉(zhuǎn)基因陽性苗對(duì)于核盤菌具有明顯的抗性。但轉(zhuǎn)基因陽性苗接種黃萎病后表現(xiàn)的癥狀與對(duì)照相比并無顯著區(qū)別，在不同發(fā)育時(shí)間段的發(fā)病程度也未見差異。研究表明抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xl可有效增加植物抗菌核病能力，但對(duì)黃萎病的防治效果不明