Survivin、Bcl-2在幽門螺桿菌誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞增殖和凋亡中的表達(dá).pdf

1、目的:通過體外胃癌上皮細(xì)胞與幽門螺桿菌(H.pylori)共同孵育,研究H.pylori對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901(人低分化腺癌細(xì)胞株)增殖和凋亡的影響及其與抑凋亡基因Survivin、Bcl-2 mRNA表達(dá)的關(guān)系,以尋找H.pylori對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響機(jī)制。 方法:觀察不同濃度(1.6x10<'4>～1.6x10<'7>cfu/ml)H.pylori菌株ACTT49503與人胃癌細(xì)胞SGC-7901共同孵育12、2

2、4、48、72小時(shí),胃癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)、細(xì)胞增殖、凋亡及Survivin、Bc1-2 mRNA表達(dá)的改變。在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)學(xué),MTT分析H.pylori對(duì)細(xì)胞增殖的影響,EB/AO熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,RT-PCR檢測(cè)Survivin、Bc1-2 mRNA在H.pylori作用前后的表達(dá)情況。 結(jié)果:細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)SGC-7901細(xì)胞與低濃度H.pylori(1.6x10<'4>cfu/ml、1.6x10<'5>

3、cfu/ml)共孵育48h后,細(xì)胞形態(tài)較對(duì)照組無明顯差別。SGC-7901細(xì)胞與高濃度H.pylori(1.6x10<'6>cfu/ml、1.6x10<'7>cfu/ml)共孵育48h后,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡病變。MTT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)低濃度H.pylori共孵育組,細(xì)胞生存率較對(duì)照組顯著增加(P<0.01);而高濃度H.pylori共孵育組,細(xì)胞生存率較對(duì)照組顯著減少(P<0.05),且濃度越高,抑制越明顯。EB/AO染色測(cè)定細(xì)胞凋亡指數(shù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分

4、析表明:低濃度H.pylori共孵育組,細(xì)胞凋亡指數(shù)較對(duì)照組無明顯差異(P>0.05);而高濃度H.pylori共孵育組,細(xì)胞凋亡指數(shù)較對(duì)照組顯著增加(P<0.05),且H.pylori濃度越高,凋亡指數(shù)越高。RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)低濃度H.pylori組,Survivin、Bc1-2表達(dá)上調(diào);而高濃度H.pylori組,Survivin、Bc1-2表達(dá)下調(diào)。 結(jié)論:不同濃度H.pylori對(duì)胃癌細(xì)胞增殖和凋亡的不同影響,機(jī)理可能