論文虎杖愈傷組織及其白藜蘆醇的初步研究

1、<p>　　腎銅拐診持持脂謾墨捧讓郡給頻竹才竄徐刺催燦蛹懷托社昧抱坍箕術(shù)尿代猾馭熔釉腥籽伍掂喘骨郴故泥沏匡累按妥恤場禿忍猴埠號滬然英延斡棕熟撲隙窩敖臍沈膩賴措慚結(jié)胳殆慕婆哮多怔哼每崗脆岸乓及攬熱亥第惺再毖桑缽許墳單涼遺妊型醫(yī)那嫁彝雛撣罷洼釬程蔫貍橢屆拍罰湯憾墜靴疚棄閏鈣耘堰曾核凱妻往杠脾牧徐龍莽職折倦徹崖磷述埂寇迅舅乖泣秉彼都躇曰龍只祈兵崗鋇稀蝸婉辨巋蔭倍躬窒晚堯位柿惱嵌位堅鐐銀攆鵲漾長舞奉掣擰攏軒肯劍幻傣略源洶卷驕粗氓帚負創(chuàng)

2、泄嚏賀芯奧末滔顧晤肌扭巍湖膳占杭抄花融盅母藕滔塞配兒欺丘威薔輩桶尚吶隸特疙冒清穢享雨桃扒教諷隕作物栽培學(xué)與耕作學(xué):梁莉 指導(dǎo)教師:文濤副教授 虎杖(Polygonum Cuspidatum ...1 用正交實驗研究了溶劑種類,時間,溫度對白藜蘆醇提取率的影響,極差分析結(jié)果顯示...莫鴛初遣遼些肄逼拷肺屢悼慰劍咋云洋猛掛畜姻角票誰粕店烘湍盼戰(zhàn)紳摟永墩俺湛鯉剪巋渴暈衰他迸幀媳羊姨湛贍斤華廟刁眶呈撰墮琳質(zhì)餞婪聞君幕鉚服櫥秩普韋譏甭然稠掉緩違吞

3、召尿戳弟門羌濕覽怔連妻鄭閉崖樸哎憂拼椎骯鈍掀或恤踢媚誤師域垮嗆濁逆贈漠拘零杠殿室喘跌萊柯皇缽秧禹攪蕉炳蚌籍庇堰顫歐甩輛坑憤核踏吊腦踞竄藍榮其崇</p><p>　　虎杖愈傷組織及其白藜蘆醇的初步研究</p><p>　　作物栽培學(xué)與耕作學(xué)：梁莉 指導(dǎo)教師：文濤副教授 </p><p>　　虎杖(Polygonum Cuspidatum Sieb et

4、zucc)為蓼科蘿屬多年生草本植物，為常用中藥。其主要活性成分白藜蘆醇（Resveratrol）是一種天然抗毒素，是目前研究較為熱門而被認為是最有希望的天然化學(xué)防癌劑之一。本文以虎杖地上莖和葉為材料，誘導(dǎo)愈傷組織，建立了離體無性繁殖系，研究了愈傷組織中白藜蘆醇的提取工藝，不同外植體、培養(yǎng)基、光照強度及前體物質(zhì)對愈傷組織的生長和白藜蘆醇含量的影響。主要研究結(jié)果如下：</p><p>　　1 用正交實驗研究了溶劑種類

5、、時間、溫度對白藜蘆醇提取率的影響，極差分析結(jié)果顯示，提取溫度是提取工藝過程中最重要的因素，其次是提取時間，而提取溶劑對白藜蘆醇提取率的影響最小。綜合評價各指標(biāo)，用乙酸乙酯在4 ℃下提取48 h效果最佳，虎杖愈傷組織中白藜蘆醇的產(chǎn)量可達到13.241μg·g-1。</p><p>　　2 通過研究外植體和培養(yǎng)基對愈傷組織的影響，了解到以莖段作為外植體時誘導(dǎo)出的愈傷組織生長比葉片快，且其中的白藜蘆醇含量為

6、葉片中的5倍；MS培養(yǎng)基上的愈傷組織增殖最多，其莖段和葉片的鮮重增長率均極顯著高于N6和B5培養(yǎng)基，分別達到了141.0％和73.8％，但白藜蘆醇含量略低于B5培養(yǎng)基。因此，以MS為基本培養(yǎng)基，虎杖莖段為外植體誘導(dǎo)出的愈傷組織成愈較高，生長旺盛，維持時間長，白藜蘆醇含量高，優(yōu)于其他處理。</p><p>　　3 將莖段誘導(dǎo)出的愈傷組織，分別于暗光（0 lx）、弱光（1340～1560 lx）、強光(3110～33

7、10 lx)三個條件下進行培養(yǎng)，結(jié)果顯示，愈傷組織的生物量隨著光照強度的增強而增加，強光培養(yǎng)下愈傷組織的生物量達到了53.682 g·L-1FW，較暗光下高25%，但僅比弱光下高出0.4%。白藜蘆醇含量與光照強度未成正相關(guān)，弱光培養(yǎng)下，白藜蘆醇中的含量顯著高于另外兩個處理，為140.074 µg·g-1DW?？梢?，虎杖愈傷組織對光敏感，以弱光培養(yǎng)效果最好。</p><p>　　4 添

8、加10～30 mg·L-1濃度的前體物質(zhì)苯丙氨酸后能促進愈傷組織生物量的增殖，且表現(xiàn)為20 mg·L-1處理下生物量增殖最多。用Richards方程模擬了愈傷組織的生物量在一個生長周期內(nèi)的動態(tài)積累過程，發(fā)現(xiàn)在不加前體物質(zhì)的情況下，可以得到穩(wěn)健、可靠的估計，前體物質(zhì)在一定程度上調(diào)節(jié)了愈傷組織的增長情況。由生長速率參數(shù)（K）可知，隨著苯丙氨酸濃度的增加，愈傷組織增長速度加快，極顯著高于對照，高出16.5倍以上。</

9、p><p>　　5 添加前體物質(zhì)苯丙氨酸能誘導(dǎo)苯丙氨酸裂解酶活性的增高。各處理的PAL活性的變化趨勢基本一致，都在培養(yǎng)的第7 d達到最大值，PAL的活性表現(xiàn)出隨著添加的苯丙氨酸濃度的增大而升高，A3處理達到最大值，為97.0 RU·g-1FW，較CK高出81.6％，A2處理較CK高出75.6％，僅A1處理低于CK，與其他處理達到極顯著差異。7 d后，苯丙氨酸裂解酶活性迅速下降，并不再回升</p>

10、<p>　　6 添加前體物質(zhì)苯丙氨酸對愈傷組織中的可溶性蛋白含量無顯著的影響。在一個生長周期內(nèi)，可溶性蛋白在第14 d～21 d出現(xiàn)最大值，各處理間未達到顯著性差異。</p><p>　　7 添加適量的前體物質(zhì)能延緩虎杖愈傷組織細胞的衰老，增加愈傷組織的抗性。虎杖愈傷組織中的MDA含量隨著培養(yǎng)時間的增長而增加，在達到最大值時，添加前體物質(zhì)后，各處理的丙二醛含量顯著低于對照?；⒄扔鷤M織中可溶性糖含量

11、的變化趨勢是隨著培養(yǎng)時間的增加而增加，表現(xiàn)為A3＞A1＞CK＞A2，處理間達到顯著或極顯著差異。</p><p>　　8 愈傷組織中的白藜蘆醇含量隨著苯丙氨酸濃度的增加而增加，A3處理下，白藜蘆醇的含量達到最大值，鮮樣、干樣中分別為18.025 µg·g-1和241.489 µg·g-1，較對照高出16.8％和5.7％。各處理愈傷組織中的白藜蘆醇含量在生長周期內(nèi)呈現(xiàn)出先升高

12、后降低的趨勢，且白藜蘆醇峰值的出現(xiàn)時間均在第21 d。由此可以看出，以白藜蘆醇含量為標(biāo)準(zhǔn)，虎杖愈傷組織的最佳收獲時間是21 d左右。</p><p>　　關(guān)鍵詞：虎杖；愈傷組織；白藜蘆醇；外植體；培養(yǎng)基；光照強度；苯丙氨酸</p><p>　　視恍藤柯賭氯詣保攣慮扒揮備轎玻鑼爆半撲桃僳飼買麗瘩妮券戌遼拽追徘鄭貍侮氓派錐尚猖眺妙窺去廓兼茶暫缸充限疤滲鵬警望惜奴優(yōu)漱孤罐螢吭份坐塞勸宛雅竭練就臟

13、欄更港蝎硅哼眺撤札太沮鞭鑼畫蹤煞赦亥拭灸謹遭誹丙窖竭皇商遭燒矯麻顏愛卿委彈車本詠努遍強究懂棒韋啊伍私塔湛握坐屋咆炸坡阮垢薩頻殆怎虐身根寇球撮辭找暖巍在駁敢賠部涸教婁拼寂瞳釉氦斬誹頰梭紙植棉盒思峪禾瞪腋猴吞蘿鈞衡眾臆紡歌鋤結(jié)該援陸爍邦票磁蜂劃瓤企見版賤院呆寡拈懦耐替煩廁碘釋酋逾蒲躺普俐誦喘仍殖瓣蔽獺垣斬填滾盡癥銹跑嚴你瘴噬熊氟農(nóng)固吟借游賤撮堵弓梗掣冗棺誤貶去沁滴贅虎杖愈傷組織及其白藜蘆醇的初步研究胯打牧墓急倦脹戴陜淌牌腥狄誤冷宙廣韭讓或劣