虎杖中白藜蘆醇的分離及中試研究.pdf

1、白藜蘆醇具有重要的藥理活性，表現(xiàn)為抗菌、消炎、抗癌、抗血栓、抗高血脂、抗氧化等，是目前國(guó)際市場(chǎng)上藥品和保健品的重要原料產(chǎn)品，也是目前的研發(fā)熱點(diǎn)。虎杖中白藜蘆醇的含量是目前研究的植物中最高的。除白藜蘆醇和虎杖苷外，還含有大黃素等多種成分。而目前的傳統(tǒng)提取方法提取率較低，工業(yè)化生產(chǎn)成本高，因此生產(chǎn)工藝亟待改進(jìn)。
　　 本論文建立了TLC法及HPLC法分析白藜蘆醇。HPLC法條件為：150×4.6mmC18色譜柱，流速1ml/min，

2、流動(dòng)相流速比為：流動(dòng)相：乙腈—水(28：72)，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)305nm，柱溫：25℃，檢測(cè)靈敏度：0.2AUFS。并對(duì)不同產(chǎn)地的虎杖中白藜蘆醇含量進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果表明：陜西、甘肅、河北等地所產(chǎn)虎杖中白黎蘆醇含量低，而湖南和河南所產(chǎn)虎杖白藜蘆醇含量較高。
　　 小試確定白藜蘆醇分離工藝為：取虎杖藥材，粉碎過(guò)篩(30目)，加入相當(dāng)于原藥材量的0.4％虎杖專用復(fù)合酶酶液，調(diào)節(jié)為pH=4.5，攪拌均勻，于45℃酶解6h后，用甲醇回流提取

3、2次，合并濾液，減壓濃縮至原體積的十分之一，放冷，過(guò)濾，干燥，粗品熱懸于10倍量的55％甲醇，放冷，過(guò)濾，收集濾液，回收甲醇后乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，無(wú)水硫酸鈉脫水，濃縮蒸干，硅膠柱層析即得純度大于98％的白藜蘆醇，綜合收率大于75％。
　　 中試確定白藜蘆醇分離工藝為：取虎杖藥材加水及虎杖專用復(fù)合酶，調(diào)節(jié)pH=4.5，升溫至45—50℃酶解，酶解24h。加入甲醇回流提取2次，每次3h，收集提取液，濃縮至約100L，放冷，

4、析晶，離心，收集沉淀，加入55％甲醇，加熱2h后靜置放冷，離心，沉淀(純化大黃素原料)移出，用等量乙酸乙酯萃取，萃取液濃縮后，經(jīng)硅膠柱層析，石油醚—乙酸乙酯洗脫，合并白藜蘆醇組分，濃縮，70％甲醇溶解，活性炭脫色，濾除活性炭，結(jié)晶得含量為96.2％白藜蘆醇，重結(jié)晶可得含量為98.2％的白藜蘆醇。
　　 在中試分離白藜蘆醇的同時(shí)，取工藝中沉淀部分經(jīng)硅膠柱層析，石油醚—乙酸乙酯梯度洗脫，活性炭脫色，重結(jié)晶后可得含量大于98％的大黃素