2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、  本研究以桿狀病毒模式種苜蓿丫紋夜蛾核多角體病毒(AcMNPV)的細(xì)菌人工染色體(AcBAC)為研究對象。AcBAC既能感染宿主,也可以象質(zhì)粒一樣在E.coli中復(fù)制,因此可簡單、快速獲得基因型均一的子代病毒。但AcBAC的多角體基因已被插入失活,為了使其具有口服感染性,本研究通過位點特異性重組,構(gòu)建了能夠產(chǎn)生多角體的重組病毒AcBACph作為本研究的實驗材料。AcBACph在體外(Hi-5細(xì)胞和Sf-9細(xì)胞)、體內(nèi)(四齡粉紋夜蛾幼蟲

2、)中進行連續(xù)傳代時產(chǎn)生了多種子代病毒突變株。利用BAC-AcMNPV-E.coli研究平臺和RFLP技術(shù)對體內(nèi)、體外的第1,5,10代子代病毒進行REN分析:AcBACph在Hi-5細(xì)胞中和四齡粉紋夜蛾幼蟲中連續(xù)傳代后,所產(chǎn)生的子代病毒共有的基因組區(qū)域、基因組的平均大小、完整基因型所占比例都很相似;它們的第l代子代病毒包含較多病毒突變株,基因組序列完整的病毒株僅占6%(Hi-5)和2%(Tn幼蟲),第5代的完整病毒株占52%(Hi-5)

3、和87%(Tn幼蟲),第10代的完整病毒株占82%(Hi-5)和83%(Tn幼蟲)。AcBACph在Sf-9細(xì)胞中連續(xù)傳代后,病毒基因組的變化模式卻有所不同,第一代、第五代、第十代完整病毒株所占比例分別是:3%、2%、3%。無論在體外還是體內(nèi)傳代時,PstI-Dl、PstI-D2、PstI-N均存在于子代病毒基因組中。某些突變株具有超摩爾帶,例如:PstI-D2、PstI-I,、PstI-J,并且這些超摩爾帶均具有復(fù)制原點。應(yīng)用TCID

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