牛分枝桿菌和卡介苗對樹突狀細胞及CD4+T細胞分化的影響.pdf

1、結核病防控是一個世界性難題，據(jù)統(tǒng)計全球三分之一的人都感染了結核分枝桿菌（Mycobacterium tuberculosis，M.tb），其中大部分屬于隱性感染，只有少部分發(fā)病，但是每年有約870萬的新發(fā)病例。結核分枝桿菌能通過空氣傳播，并且能在環(huán)境中長久存活。結核分枝桿菌是一種胞內寄生菌，能夠感染樹突狀細胞和巨噬細胞等免疫遞呈細胞，并且能夠抑制免疫細胞對它的處理，在抗原遞呈細胞中存活，并且隨著抗原遞呈細胞的轉移而擴散，導致持續(xù)感染，但

2、其免疫抑制和持續(xù)感染的分子機制不完全清楚。
　　 牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis，M.bovis)與結核分枝桿菌基因同源性為99.95％，是牛結核病的主要病原菌。不僅能感染牛，同時能感染人和多種野生動物。野生動物成為帶菌者和散播者，使牛結核病的防控工作更加艱巨。牛分枝桿菌和結核分枝桿菌在體內引起相似的致病過程。
　　 卡介苗(BCG)是牛分枝桿菌經(jīng)過體外傳代230代得到的弱毒菌，廣泛用于預防結核病，兒

3、童接種后能有效的產(chǎn)生免疫保護效應。所以，研究強弱牛分枝桿菌菌株在機體內的免疫反應差異有助于闡明結核病的免疫抑制和持續(xù)感染的分子機制。
　　 樹突狀細胞（Dendritic cells，DCs）是體內專職的抗原遞呈細胞，是聯(lián)接先天免疫和獲得性免疫的橋梁，同時也是結核分枝桿菌宿主細胞。本研究以樹突狀細胞為模式細胞，研究牛分枝桿菌和BCG感染誘導的差異反應，及其對CD4+T分化的影響，以期為闡明結核病的免疫抑制和持續(xù)感染的分子機制提供

4、重要依據(jù)。取得如下研究結果:
　　 (1)牛分枝桿菌和BCG感染DCs后，BCG誘導產(chǎn)生了更高濃度的IL-12，TNF-α，RANTES和MCP-1;而牛分枝桿菌則誘導產(chǎn)生了更高濃度的IL-1β和IL-23。提示BCG感染誘導產(chǎn)生Th1型細胞因子和趨化因子，有利于產(chǎn)生更為有效的免疫保護反應;牛分枝桿菌則誘導更高水平的炎性細胞因子，反應過度時將發(fā)生炎性損傷反應。
　　 (2)滅活細菌與活細菌感染DCs后，活細菌誘導產(chǎn)生的細

5、胞因子與趨化因子都高于滅活細菌誘導產(chǎn)生的，說明活細菌感染對有效誘導DCs反應是必須的。
　　 (3) NF-κB抑制劑PDTC能夠抑制M.bovis和BCG感染DCs誘導的細胞因子表達，表明其受NF-κB轉錄因子的調控。
　　 (4)牛分枝桿菌和BCG感染DCs、無細胞培養(yǎng)液（含細胞因子）和感染后DCs細胞培養(yǎng)物（感染DCs+細胞因子）分別與幼稚型CD4+T細胞互作，檢測細胞因子以及流式細胞術檢測細胞的分化情況，結果表明

6、:BCG感染的DCs能誘導T細胞產(chǎn)生較多的IFN-γ，而牛分枝桿菌誘導更多的IL-10和IL-17;細胞流式細胞儀檢測表明，牛分枝桿菌誘導更多的CD25+Foxp3+雙陽性Treg細胞，而活細菌及滅活細菌都不能直接刺激CD4+T細胞的分化。以上結果提示:BCG傾向于誘導Th1型細胞的分化，而牛分枝桿菌傾向于誘導更多Th17和Treg型細胞的分化。Th1型細胞將產(chǎn)生免疫保護反應，而Th17和Treg型細胞則與炎性反應和免疫抑制有關。這些結