Resveratrol抑制CD4+T細胞活化及機制研究.pdf

1、Resveratrol（白藜蘆醇）又稱芪三酚，化學名稱為3，5，4′-三羥基二苯乙烯，是蒽醌萜類化合物。其廣泛存在于葡萄科、百合科、豆科等多種植物中。白藜蘆醇具有廣泛的抗腫瘤、抗心血管疾病、抗炎、抗氧化、抗衰老、神經(jīng)系統(tǒng)保護等作用,它已成為科學家們高度重視的天然活性成分。本研究中首先我們探討了白藜蘆醇對于CD4+T淋巴細胞活化的作用影響。體外實驗中通過流式細胞術檢測及Brdu細胞增殖檢測均顯示白藜蘆醇能抑制小鼠脾臟CD4+T細胞的增殖，

2、且通過用ELISA對細胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-?)等的分泌檢測顯示白藜蘆醇同樣對細胞因子的分泌也具有明顯的抑制作用，進一步研究表明白藜蘆醇對 T細胞的凋亡無明顯影響。同時體內(nèi)實驗中我們檢測CIA小鼠血清中IgM及細胞因子(IL-2、IL-4、IL-5、IFN-?)等的分泌，并用Brdu細胞增殖檢測白藜蘆醇小鼠脾臟CD4+T細胞的增殖影響。結果我們發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠明顯抑制小鼠IgM抗體的產(chǎn)生，對細胞因子無論是IL-2

3、、IFN-?還是IL-4、IL-5的分泌均具有明顯的抑制作用，且白藜蘆醇能在體內(nèi)抑制CD4+T細胞的增殖。隨后為進一步研究其作用機制，通過western blot發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可提高小鼠脾臟T細胞中sirt1蛋白的表達量，同時發(fā)現(xiàn)當sirt1被下調(diào)后，白藜蘆醇對小鼠脾臟 T淋巴細胞無明顯的抑制作用。說明白藜蘆醇通過影響Sirt1表達調(diào)控T細胞活化。為了進一步驗證白藜蘆醇是否影響了sirt1的脫乙?；钚?，我們通過免疫共沉淀方法檢測了下游可

4、能參與其信號轉導的核轉錄因子C-Jun、NF?B及NFAT等的乙?；?，其結果顯示白藜蘆醇抑制了核轉錄因子C-Jun的乙酰化水平，但對于NF?B及NFAT等的乙酰化水平并無明顯影響，進一步通過免疫熒光染色和共聚焦顯微鏡的觀察發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇能夠抑制核轉錄因子C-Jun的核轉位。
　　為進一步探索白藜蘆醇對于類風濕性關節(jié)炎的潛在治療作用，我們用膠原蛋白免疫DBA1小鼠構建CIA動物模型，通過灌胃給予小鼠白藜蘆醇20mg/kg/day，