轉(zhuǎn)基因后代豬pGH基因差異表達(dá)的研究.pdf

1、為探討生長(zhǎng)激素在轉(zhuǎn)基因豬后代體內(nèi)的表達(dá)量及其與生長(zhǎng)性能的相關(guān)性，同時(shí)為節(jié)糧型高瘦肉率轉(zhuǎn)基因豬品種的培育奠定科學(xué)基礎(chǔ)，本研究針對(duì)用精子介導(dǎo)納米基因裁體法制備的F0代母豬與非轉(zhuǎn)基因公豬配種所產(chǎn)的16頭F1代仔豬，經(jīng)PCR擴(kuò)增、克隆測(cè)序后確定轉(zhuǎn)基因陽(yáng)性率。分別提取耳組織和血液中總RNA，RT-PCR，進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR。根據(jù)RT-PCR中確定的試驗(yàn)所需內(nèi)參基因，結(jié)合30日齡、90日齡、150日齡樣品和內(nèi)參樣品所得的擴(kuò)增曲線和熔解曲線圖譜，

2、分析16個(gè)樣品不同生長(zhǎng)階段的總熒光強(qiáng)度，峰值特異性及組織差異性，確定豬生長(zhǎng)激素基因在轉(zhuǎn)基因豬和非轉(zhuǎn)基因豬體內(nèi)的表達(dá)量差異。測(cè)量統(tǒng)計(jì)16頭后代豬的30日齡、90日齡、150日齡體重，通過(guò)獨(dú)立樣本T檢驗(yàn)和個(gè)體日增重的分析，經(jīng)校正后與第一階段所得pGH基因在豬體內(nèi)的不同表達(dá)水平進(jìn)行關(guān)聯(lián)。結(jié)論如下:
　　 1.F1代仔豬中有7頭為轉(zhuǎn)基因豬，9頭為非轉(zhuǎn)基因豬。
　　 2.同期耳組織中的pGH表達(dá)量低于血液中pGH表達(dá)量.
　

3、　 3.F1代豬的pGH基因平均表達(dá)量在兩組待測(cè)豬群中呈現(xiàn)明顯不同。30日齡時(shí)轉(zhuǎn)基因組pGH表達(dá)量低于非轉(zhuǎn)基因組;90日齡時(shí)，雖然轉(zhuǎn)基因組高于非轉(zhuǎn)基因組pGH表達(dá)量，但差異不明顯;150日齡時(shí)，轉(zhuǎn)基因組pGH表達(dá)量明顯高于非轉(zhuǎn)基因組。
　　 4.F1代轉(zhuǎn)基因豬的平均日增重在30日齡之內(nèi)低于非轉(zhuǎn)基因豬17.8372g，90日齡時(shí)，已超過(guò)非轉(zhuǎn)基因豬，90日齡到150日齡之間，持續(xù)優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)速度.
　　 5.熒光定量PCR所得