抗性不同的烤煙品種在脅迫條件下煙葉的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、煙草(Nicotiana tobacco L.)是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物之一,在國民經(jīng)濟(jì)中占有重要地位。煙草生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展受干旱脅迫的制約,同時受到煙草黑脛病(Phytophthora nicotianae Brcda de Haan)的侵害。到目前為止,干旱脅迫和黑脛病菌誘導(dǎo)煙草基因表達(dá),合成特異蛋白質(zhì)的分子機(jī)理還不清楚。本研究應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)研究方法和技術(shù),選用4種不同抗性的栽培煙草品種,分別采用極端干旱脅迫或黑脛病菌接種處理,進(jìn)行煙草

2、葉片差異蛋白質(zhì)組學(xué)的探索性研究。主要研究進(jìn)展如下:
   1、初步確定了煙草葉片總蛋白提取方法、IPG膠條的pH范圍、蛋白質(zhì)的上樣量等實驗條件。
   2、耐旱栽培煙草品種中煙14移栽45 d后,再經(jīng)過干旱脅迫12 d后,從蛋白質(zhì)組表達(dá)譜上鑒別出300多個蛋白質(zhì)點,篩選到52個差異蛋白質(zhì)點,其中14個表達(dá)上調(diào),18個表達(dá)下調(diào),15個是誘導(dǎo)新產(chǎn)生的,5個蛋白質(zhì)點消失表達(dá)。經(jīng)過質(zhì)譜分析和多種數(shù)據(jù)庫搜索方法鑒定成功42個(19

3、種)蛋白質(zhì)點,其中:31個(9種)是與物質(zhì)和能量代謝相關(guān)的蛋白;4個(4種)是抗氧化蛋白;3個(3種)是與翻譯功能相關(guān)的蛋白質(zhì);2個(2種)是與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蛋白;2個未知功能蛋白質(zhì)未分組。
   3、干旱敏感型栽培煙草品種中煙100移栽45 d后,再經(jīng)過干旱脅迫12 d后,從蛋白質(zhì)組表達(dá)譜上鑒別出330多個蛋白質(zhì)點,篩選到43個差異蛋白質(zhì)點,其中20個表達(dá)上調(diào),10個表達(dá)下調(diào),12個是誘導(dǎo)新產(chǎn)生的,1個蛋白質(zhì)點消失表達(dá)。經(jīng)過質(zhì)

4、譜分析和多種數(shù)據(jù)庫搜索方法鑒定成功34個(14種)差異蛋白質(zhì),其中:28個(8種)是與物質(zhì)和能量代謝相關(guān)的蛋白;4個(4種)是抗氧化蛋白;1個(1種)是與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蛋白;1個未分組蛋白。
   4、感黑脛病菌栽培煙草品種小黃金1025假植3周后,接種黑脛病菌孢子處理3 d后,從蛋白質(zhì)組表達(dá)譜上鑒別出260個左右蛋白質(zhì)點,篩選到38個差異蛋白質(zhì)點,其中14個表達(dá)上調(diào),16個表達(dá)下調(diào),6個是誘導(dǎo)新產(chǎn)生的,2個蛋白質(zhì)點消失。經(jīng)過質(zhì)

5、譜分析和多種數(shù)據(jù)庫搜索方法鑒定成功29個(15種)差異蛋白質(zhì),其中20個(9種)是與物質(zhì)和能量代謝相關(guān)的蛋白;1個(1種)是抗氧化蛋白:4個(3種)是與翻譯功能相關(guān)的蛋白質(zhì);1個(1種)是與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蛋白;3個(2種)未分組蛋白。
   5、抗黑脛病菌栽培煙草品種革新三號假植3周后,接種黑脛病菌孢子處理3 d后,從蛋白質(zhì)組表達(dá)譜上鑒別出400個左右蛋白質(zhì)點,篩選到39個差異蛋白質(zhì)點,其中14個表達(dá)上調(diào),20個表達(dá)下調(diào),3個是

6、誘導(dǎo)新產(chǎn)生的,2個蛋白質(zhì)點消失。經(jīng)過質(zhì)譜分析和多種數(shù)據(jù)庫搜索方法鑒定成功28個(19種)差異蛋白質(zhì),其中15個(8種)是與物質(zhì)和能量代謝相關(guān)的蛋白;8個(7種)是抗氧化蛋白;1個(1種)是與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)的蛋白;2個(2種)抗病防御蛋白;2個未知功能蛋白。
   通過分析上述實驗結(jié)果,可以明確鑒定出的蛋白質(zhì)絕大多數(shù)是參與物質(zhì)和能量代謝以及與抗性相關(guān),初步探討了干旱脅迫和黑脛病菌誘導(dǎo)煙草的抗性應(yīng)答機(jī)理。為進(jìn)一步篩選抗性相關(guān)特異蛋白質(zhì)

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