青貯源乳酸菌培養(yǎng)工藝及發(fā)酵效果的研究.pdf

1、本論文從青貯窖中篩選了2株乳酸菌,通過(guò)16SrDNA的方法對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,并利用青貯發(fā)酵罐全面評(píng)價(jià)這兩株乳酸菌對(duì)全株玉米青貯發(fā)酵進(jìn)程的影響,最后通過(guò)飼養(yǎng)試驗(yàn)研究其對(duì)奶牛生產(chǎn)性能的影響,旨在開發(fā)一種青貯飼料接種劑,為生產(chǎn)應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。具體包括以下三個(gè)部分:
　　 試驗(yàn)一響應(yīng)面法優(yōu)化青貯飼料乳酸菌的培養(yǎng)條件
　　 從青貯飼料中篩選得到2株乳酸菌,經(jīng)16SrDNA的方法對(duì)其進(jìn)行分子生物學(xué)鑒定,兩株乳酸菌分別為植物乳

2、桿菌(GLP01),該菌株與Gen Bank中的Lactobacillus plantarum strain KLDS(登錄號(hào):EU626013.1)相似度為98％；發(fā)酵乳桿菌(BLF01),與Gen Bank中的Lactobacillusfermentum strain44197(登錄號(hào):DQ779203.1)相似度為99％。通過(guò)單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)研究了培養(yǎng)基組成(碳源、氮源)和培養(yǎng)條件(溫度、接種量、起始pn等)對(duì)GLP01和BLF01

3、生長(zhǎng)繁殖的影響；采用二次響應(yīng)面分析方法對(duì)其培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化,得到生長(zhǎng)模型以及取得該模型最優(yōu)值時(shí)各因素的水平。試驗(yàn)結(jié)果表明,培養(yǎng)GLP01的最適碳源是果糖,最佳氮源是酵母粉,最佳培養(yǎng)條件是起始pn5.47、培養(yǎng)溫度35.3℃、接種量8.16％；培養(yǎng)BLF01的最適碳源是乳糖,最佳氮源是酵母粉,最佳培養(yǎng)條件是起始pn6.5、培養(yǎng)溫度35℃、接種量1％。
　　 試驗(yàn)二不同微生物接種劑對(duì)全株玉米青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響
　　 試驗(yàn)以蠟

4、熟期全株玉米為原料,設(shè)4個(gè)處理組,分別為:對(duì)照組(CK)、植物乳桿菌組(G)、發(fā)酵乳桿菌組(B)以及植物乳桿菌+布氏乳桿菌組(LG),其中CK組不添加接種劑、G組添加植物乳桿菌105 cfu／gFM,B組添加發(fā)酵乳桿菌也為105 cfu／g FM,LG組添加的植物乳桿菌和布氏乳桿菌均為105 cfu／gFM。青貯飼料發(fā)酵過(guò)程中,分別于第1、3、5、7、9、12、15、30、45、60、90天開罐取樣,進(jìn)行青貯品質(zhì)檢測(cè)、化學(xué)成分分析和微生

5、物檢測(cè)。結(jié)果顯示,本試驗(yàn)中所用的植物乳桿菌和發(fā)酵乳桿菌均能有效改變?nèi)暧衩浊噘A的發(fā)酵過(guò)程,即能夠主導(dǎo)全株玉米青貯發(fā)酵。添加植物乳桿菌能夠有效促進(jìn)全株玉米青貯中乳酸菌的生長(zhǎng)繁殖(P<0.05),同時(shí)抑制真菌的活動(dòng)(P<0.05),從而顯著降低青貯飼料的pH值(P<0.05),同時(shí)提高乳乙酸的生成比值,使得發(fā)酵進(jìn)程向同型發(fā)酵轉(zhuǎn)變。發(fā)酵乳桿菌也屬于典型的同型發(fā)酵乳酸菌,而且產(chǎn)酸能力顯著高于其他各組(P<0.05),其乳酸的生成量比其他組高出1

6、3.2％～46.36％:在發(fā)酵過(guò)程中,該組的pH值顯著低于其他組(P<0.05),為3.68。但是,正因?yàn)榘l(fā)酵乳桿菌的強(qiáng)產(chǎn)酸能力,抑制了大部分乳酸菌的生長(zhǎng),卻為可利用乳酸的酵母菌提供了有利環(huán)境。植物乳桿菌與布氏乳桿菌聯(lián)合應(yīng)用,能夠促進(jìn)乳酸菌的生長(zhǎng),顯著降低全株玉米青貯的pH值,同時(shí)抑制真菌的生長(zhǎng)繁殖活動(dòng)。但是,該組的乳乙酸生成比值是2.01,為各組中最小,屬于典型的異型發(fā)酵。
　　 試驗(yàn)三接種不同乳酸菌的全株玉米青貯對(duì)奶牛生產(chǎn)性

7、能的影響
　　 以全株玉米為青貯原料,設(shè)3個(gè)處理組,分別為對(duì)照組、植物乳桿菌組和布氏乳桿菌組,其中對(duì)照組不添加接種劑,其他兩個(gè)組添加的菌種量均為105 cfu／gFM。青貯方式為地上水泥青貯窖,兩個(gè)月后開封。同時(shí),選取21頭中國(guó)荷斯坦經(jīng)產(chǎn)奶牛,隨機(jī)分成3組,研究不同處理的全株玉米青貯對(duì)泌乳牛產(chǎn)奶量和乳成分的影響。結(jié)果表明:以4％標(biāo)準(zhǔn)乳計(jì),與對(duì)照組相比,植物乳桿菌組產(chǎn)奶量平均每日每頭增加2.21 kg,布氏乳桿菌組增加0.3 kg