重組牛生長激素緩釋制劑的活性檢測及動物體內(nèi)釋放規(guī)律研究.pdf

1、生長激素是由腦垂體前葉嗜酸性細胞合成和分泌的一種單一肽鏈的蛋白質(zhì)，能夠促進動物生長、增加產(chǎn)奶量、提高飼料轉(zhuǎn)化效率和瘦肉率。本實驗主要是立足于重組牛生長激素的活性檢測和體內(nèi)藥物動力學研究。 首先通過手術(shù)建立去垂體大鼠動物模型，45只Wistar雄鼠進行去垂體手術(shù)后，有35只大鼠成活，手術(shù)成活率77.8％。通過21天的稱重觀察，發(fā)現(xiàn)有15只大鼠手術(shù)后兩周內(nèi)日增重不超過1g，判定這些大鼠去垂體完全，手術(shù)成功率達到33.3％。

2、為了驗證重組牛生長激素的活性，作為對照組的去垂體大鼠注射PBS120μl/只，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組分別注射重組牛生長激素溶液50μg/只、100μg/只和200μg/只，連續(xù)注射20天。結(jié)果發(fā)現(xiàn)低、中、高3個劑量對去垂體大鼠都具有促生長的作用，而且大鼠增重的存在劑量依賴性。對照組大鼠采食量和飲水最少，試驗組大鼠采食量和飲水隨注射劑量的增大而增大。在最后一次注射后2小時采大鼠血液，檢測血樣中生長激素濃度發(fā)現(xiàn)，生長激素的濃度與注射的

3、劑量相對應，對照組血液中檢測不到生長激素，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組血液中的生長激素分別是3.68ng/ml、5.57ng/ml和6.12ng/ml。由此可以斷定重組牛生長激素具有促生長活性。 為驗證重組牛生長激素油混懸制劑體在動物的緩釋效果，試驗的第1天4個試驗組即試驗Ⅰ組，試驗Ⅱ組，試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組的去垂體大鼠分別皮下注射藥物含量為4.2％重組牛生長激素油混懸長效注射劑0.84mg/只、1.4mg/只、2.8mg/只和4

4、.2mg/只，對照組去垂體大鼠皮下注射PBS溶液120ul/只。每天上午稱重1次，連續(xù)稱重32天并觀察大鼠的增重。注射PBS的去垂體大鼠體重相對比較穩(wěn)定，32天累積增重5.87g，增重6.9％。藥物處理32天后試驗Ⅰ組，試驗Ⅱ組，試驗Ⅲ組和試驗Ⅳ組的累積增重分別為18.66％、 18.97％、20.61％和27.38％。注射31天后試驗組大鼠的體重仍有增加的趨勢。上述結(jié)果表明此種油混懸注射劑在體內(nèi)至少能緩釋31天，其有望發(fā)展成為新型長效

5、制劑。 隨后，將重組牛生長激素的緩釋劑型在昆明小鼠上做活性檢測實驗。分別以1.5mg/只、3mg/只和6mg/只低、中、高3個劑量在小鼠背部皮下注射重組牛生長激素的油混懸長效注射劑，通過稱重來觀察這種緩釋劑型的作用。30天的稱重發(fā)現(xiàn)，3個試驗組的累積增重均高于對照組，分別為34.14％、40.68％、42.52％和44.50％。這種方法雖然能驗證生長激素的活性，但不能進行定量的分析，而且也不容易確定油混懸長效注射劑的緩釋周期。研