嵌合型PCV1-2滅活疫苗對商品豬的免疫保護力研究和嵌合型PCV1-2活疫苗的中間試驗.pdf

1、豬圓環(huán)病毒2型(porcine circovirus2，PCV2)與豬群中發(fā)生的多種傳染病相關(guān)，它已被證明是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰弱綜合征(postweaning multisystemicwasting syndrome，PMWS)等疾病的重要病原體。PCV2同時也被證明與豬的其他一些疾病相關(guān)，例如，豬皮炎腎炎綜合癥，豬呼吸道疾病綜合癥，這些疾病現(xiàn)統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒病。
　　 該病的主要臨床癥狀是消瘦、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大、皮膚蒼

2、白及黃疸。
　　 本研究旨在用本實驗室構(gòu)建的嵌合型豬圓環(huán)病毒PCV1-2滅活病毒作為免疫原免疫PCV2低母源抗體商品豬，再對免疫豬進行PCV2攻毒，對免疫后攻毒的試驗豬的各項指標進行測定，以評價該候選疫苗用于預防PCV2感染的有效性。同時，以嵌合型豬圓環(huán)病毒PCV1-2滅活疫苗及其活疫苗進行中間試驗，以評價其在豬場條件下對商品豬的免疫保護效果。
　　 1.嵌合型PCV1-2滅活病毒對低母源抗體商品豬的免疫保護效力的研究;

3、
　　 應用本實驗室構(gòu)建的嵌合型豬圓環(huán)病毒PCV1-2滅活疫苗為免疫原對42日齡的母源抗體效價1∶10以下的商品豬進行免疫，在一免后14天進行第二次免疫，在第二次免疫后21天以PCV2野毒進行攻毒。
　　 試驗結(jié)果表明，在二免后21天，所有免疫組的試驗豬都表現(xiàn)出血清學的陽轉(zhuǎn)變化，并可以檢測到針對PCV2的較高效價的熒光抗體和中和抗體。在攻毒后21天剖檢，攻毒對照豬的淋巴結(jié)和肺臟的大體和顯微病變都比免疫組豬嚴重。同時，免疫

4、組豬支氣管淋巴結(jié)和血清中PCV2病毒的載量顯著低于攻毒對照組豬(P＜0.05)。綜上所述，嵌合型豬圓環(huán)病毒PCV1-2滅活疫苗可以有效地誘導免疫豬產(chǎn)生對PCV2感染的保護性免疫應答。
　　 2.嵌合型PCV1-2滅活疫苗的中間試驗;
　　 根據(jù)農(nóng)業(yè)部《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理辦法》要求，進行嵌合型PCV1-2滅活疫苗在江蘇省的中間試驗。對免疫組的10頭10日齡商品豬進行肌肉注射免疫，用間接免疫熒光試驗(indirect

5、 immunofluorescent assay，IFA)定期檢測豬血清中抗體產(chǎn)生的情況，同時檢測免疫豬的嵌合型PCV1-2病毒的排毒情況及其對試驗場所附近非靶動物的影響和致病性等。試驗結(jié)果表明，在免疫PCV1-2滅活疫苗后，試驗豬產(chǎn)生明顯的體液免疫應答，利用IFA方法檢測到試驗豬的血清中產(chǎn)生了較高效價的針對PCV2的熒光抗體。同時，PCV1-2滅活疫苗對試驗豬的增重無明顯影響，對非靶動物沒有任何致病性以及其他方面的影響。
　　

6、 3.嵌合型PCV1-2活疫苗的中間試驗;
　　 根根據(jù)農(nóng)業(yè)部《農(nóng)業(yè)轉(zhuǎn)基因生物安全評價管理辦法》要求，進行嵌合型PCV1-2活疫苗在江蘇省的中間試驗。對免疫組的10頭10日齡商品豬進行肌肉注射免疫，用間接免疫熒光試驗(indirect immunofluorescent assay，IFA)方法定期檢測豬血清中抗體產(chǎn)生的情況，同時檢測免疫豬的嵌合型PCV1-2病毒的排毒情況及其對試驗場所附近非靶動物的影響和致病性等。試驗結(jié)果表明