反義Lox-3基因轉化秈稻的遺傳體系研究.pdf

1、水稻是世界上最重要的糧食作物之一，全球接近一半的人口以其為主要的食物和能量來源，所以水稻的穩(wěn)定增產保障了世界的糧食安全。然而，稻谷在儲藏過程中由于陳化變質、蟲害和霉變等引起大量損失，因此，開展水稻耐儲藏特性的相關研究，培育耐儲藏水稻新品種，意義重大。
　　 本研究旨在通過農桿菌介導法，將反義lox-3基因導入秈型恢復系“航1號”中，期望從轉基因植株中篩選出脂肪氧化酶低表達的株系，實現(xiàn)提高水稻耐儲藏性的目的。圍繞此目的，本研究主要

2、得到以下結論：
　　 1．通過對比“航1號”愈傷組織在6種不同的培養(yǎng)基上的生長情況，分析經過不同時間的培養(yǎng)，愈傷組織的增重情況，確定了其最適培養(yǎng)基。
　　 2．利用農桿菌介導法，分別將載體pHG1PL，pHG4PL和pHG4P500L導入秈型恢復系“航1號”中，獲得124株轉基因植株，PCR結果表明，其中有96株檢測到標記基因bar,初步說明反義lox-3基因已經整合到秈型恢復系“航1號”的基因組中。
　　 3．

3、從96株PCR檢測為陽性的轉基因植株中隨機挑取5株進行Southern雜交和斑點雜交檢測，結果4株檢測到雜交信號，說明反義lox-3基因已經整合到秈型恢復系“航1號”的基因組中；而其中一株沒有檢測到雜交信號，說明反義lox-3基因沒有整合到其基因組中，PCR結果可能為假陽性。
　　 4．隨機選取7株轉基因植株，分別提取RNA，進行RT-PCR分析，結果表明7個樣品均在mRNA水平上得到了表達，進一步說明反義lox-3基因已經整合