秈稻浙恢7954遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化及其應(yīng)用.pdf

1、水稻是我國乃至世界最重要的糧食作物之一，總產(chǎn)量在世界糧食作物產(chǎn)量中排第三位，全世界近一半以上人口以稻米為主食，其產(chǎn)量的提高對于全球未來的糧食安全具有非常重要的戰(zhàn)略意義。然而，水稻極易受病蟲害影響。水稻稻瘟病、白葉枯病、螟蟲等是制約水稻產(chǎn)量提高和品質(zhì)改善的主要限制因素。利用生物技術(shù)來防治水稻病蟲害不僅降低了生產(chǎn)成本，而且能減少因農(nóng)藥對環(huán)境造成的污染，是水稻抗病蟲害育種的首選策略。
　　 浙恢7954是一個恢復(fù)力強(qiáng)、配合力高、綜合性

2、狀優(yōu)異的秈稻恢復(fù)系。本研究通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法，將抗病基因OsLSD1和OsBSR1和抗蟲基因Bt轉(zhuǎn)入浙恢7954，改良該品種的抗病性和抗蟲性。主要實驗結(jié)果如下:
　　 1.以浙恢7954的成熟胚作為外植體，比較了在遺傳轉(zhuǎn)化不同階段培養(yǎng)基成分對愈傷組織生長及植株再生的影響，進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化體系的優(yōu)化。結(jié)果表明，最優(yōu)的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為Y1、抗性選擇培養(yǎng)基為J3、分化培養(yǎng)基為D6。利用該體系共獲得GFP陽性轉(zhuǎn)基因植株的轉(zhuǎn)化效率達(dá)25.6％。

3、r>　　 2.利用一元Ac/Ds轉(zhuǎn)座子無選擇標(biāo)記系統(tǒng)，以及建立的浙恢7954高效遺傳轉(zhuǎn)化體系，將抗稻瘟病基因OsLSD1、OsBSR1和抗蟲基因Bt轉(zhuǎn)入浙恢7954，并對獲得的轉(zhuǎn)基因T0代植株進(jìn)行目的基因PCR檢測。結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因水稻中均有目的基因PCR呈陽性的植株，說明OsLSD1，OsBSR1和Bt基因已經(jīng)整合到浙恢7954的基因組中。
　　 3.對轉(zhuǎn)基因水稻浙恢7954-LSD1 T1代多個株系進(jìn)行PCR檢測。結(jié)果顯示