有機(jī)磷農(nóng)藥快速檢測(cè)試紙的初步研究.pdf

1、目的：依據(jù)酶抑制原理建立有機(jī)磷（Organicphosphorus，OP）農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法，制備快速檢測(cè)試紙，建立用于普通民眾日常檢測(cè)水果、蔬菜中的微量農(nóng)藥殘留，以及為農(nóng)田、市場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)農(nóng)藥含量的方法。為今后進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和利用膽堿酯酶檢測(cè)OP農(nóng)藥殘留污染打下良好的基礎(chǔ)，提供理論依據(jù)。方法：采用硫酸銨沉淀法，普魯卡因胺（Procainamide）-ECH瓊脂糖4B親和層析純化膽堿酯酶。以殼聚糖膜為載體，采用戊二醛交聯(lián)法固定膽堿酯酶，

2、制備膽堿酯酶試紙。設(shè)計(jì)正交試驗(yàn)考察牛血清白蛋白（Bovineserumalbumin，BSA）百分含量，戊二醛（Glutaraldehyde，GA）濃度，BSA％與GA濃度二者間的交互作用及固定化所采用何種載體材料等因素對(duì)固定化的影響，確定固定化條件。對(duì)膽堿酯酶試紙進(jìn)行靈敏度和差異性分析。結(jié)果：各條件對(duì)固定化的影響大小依次為：固定化載體>戊二醛濃度>戊二醛xBSA>BSA濃度。在5.3×10-3-5.3μg/L幾范圍內(nèi)，膽堿酯酶抑制率與

3、敵敵畏質(zhì)量濃度的回歸方程為y=12.799Ln（x）+72.384（R=0.9724），最低檢出濃度為0.17μg/L。固定化酶在15天內(nèi)活力保持穩(wěn)定。結(jié)論：分離、純化膽堿酯酶采用條件：緩沖為含0.5％TritonX-100，20mmol/L（pH7.0）的磷酸緩沖，用40％硫酸銨沉淀。固定化采用條件：殼聚糖膜載體，0.01％戊二醛，2％牛血清白蛋白，0.05mol/L（pH6.0）磷酸緩沖液。通過(guò)對(duì)膽堿酯酶分離、純化及固定化條件的研究