水稻OsCIPK10基因的耐逆性功能分析.pdf

1、鈣是細胞中非常重要的第二信使,在植物的逆境應答中起著信號傳導的作用。類鈣調(diào)磷酸酶B亞基蛋白(CBL)是一類鈣解碼器蛋白,它與一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶CIPK蛋白能特異性互作,從而在信號轉(zhuǎn)導中發(fā)揮生物學功能。研究證明CBL/CIPK信號系統(tǒng)在植物逆境應答中具有重要作用,因此開展水稻CIPK基因的研究,不僅有助于了解植物逆境脅迫下CBL-CIPK信號網(wǎng)絡的機制,而且對水稻及其它作物的抗逆性遺傳改良也具有重要的指導作用。前期的研究發(fā)現(xiàn),水稻

2、OsCIPK10基因受鹽、低鉀、ABA、汞、低溫和接種白葉枯病菌等處理的誘導表達,表明該基因可能是植物逆境應答途徑中的一個上游調(diào)控因子。為了研究水稻OsCIPK10基因在逆境脅迫中的功能,本研究構建了OsCIPK10基因的過量表達和RNAi抑制表達載體,以農(nóng)桿菌介導法轉(zhuǎn)化到了水稻愈傷組織中,經(jīng)潮霉素篩選和植株再生,一共獲得了80個再生的水稻株系。通過PCR檢測再生植株基因組中的潮霉素抗性基因(Hpt),從中篩選到了47個過表達陽性株系,

3、26個RNAi陽性株系。對T1代轉(zhuǎn)基因株系的半定量RT-PCR分析表明,過量表達株系中OsCIPK10基因的表達量顯著增加,而部分RNAi株系中OsCIPK10基因的表達受到了一定程度的抑制。對T1代轉(zhuǎn)基因植株中3個過表達和2個RNAi株系在鹽、冷和PEG模擬干旱條件下的逆性分析,初步表明過量表達OsCIPK10基因增強了轉(zhuǎn)基因水稻的抗旱性,而抑制OsCIPK10基因的表達可能增強轉(zhuǎn)基因水稻的耐鹽性,可見OsCIPK10基因有可能參與了