衣殼蛋白對(duì)煙草脈帶花葉病毒侵染和致病力的影響.pdf

1、煙草脈帶花葉病毒(Tobacco vein banding mosaic virus，TVBMV)屬于馬鈴薯Y病毒屬(Potyvirus)病毒，近幾年在我國(guó)煙草上的發(fā)生有上升和蔓延的趨勢(shì)，其衣殼蛋白(coat protein，CP)在病毒致病力和侵染中發(fā)揮著重要作用，主要參與蚜傳、包裝病毒粒子并調(diào)節(jié)RNA的復(fù)制、細(xì)胞間運(yùn)動(dòng)和系統(tǒng)侵染、癥狀表現(xiàn)等過(guò)程。本研究通過(guò)定點(diǎn)突變等方法獲得了TVBMV CP的12個(gè)突變體，利用農(nóng)桿菌共浸潤(rùn)的方法分析

2、了這些突變對(duì)病毒致病力的影響。與野生型的CP處理相比，92位的絲氨酸(Ser92)突變?yōu)锳la后，癥狀及綠色熒光并未發(fā)生變化，而突變?yōu)锳sp和His后，癥狀及綠色熒光明顯的減弱；122位的色氨酸(Trp122)突變成為L(zhǎng)ys以及192位的精氨酸(Arg192)突變?yōu)镃ys后，癥狀及綠色熒光只在注射葉片出現(xiàn)，說(shuō)明突變影響了病毒的長(zhǎng)距離移動(dòng)，當(dāng)Trp122和Arg192分別突變?yōu)锳la和Glu后，癥狀及綠色熒光均消失，說(shuō)明突變對(duì)于病毒是致死

3、的；225位的賴(lài)氨酸(Lyss225)突變成為Ala和Cys后，只在注射葉片中檢測(cè)到病毒粒子的存在，說(shuō)明突變影響了病毒的長(zhǎng)距離移動(dòng)，在突變?yōu)镚lu后，無(wú)論注射葉片還是系統(tǒng)葉片，均未發(fā)現(xiàn)癥狀以及熒光的出現(xiàn)，說(shuō)明這種突變對(duì)于病毒是致死的。利用Pole Bio-Informatique Lyonnais數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行的二級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)表明，以上突變均可能導(dǎo)致CP構(gòu)象的變化。這些結(jié)果表明，Ser92、Trp122、Arg192、Lys225這四個(gè)位點(diǎn)在