衣殼蛋白對煙草脈帶花葉病毒侵染和致病力的影響.pdf

1、煙草脈帶花葉病毒(Tobacco vein banding mosaic virus，TVBMV)屬于馬鈴薯Y病毒屬(Potyvirus)病毒，近幾年在我國煙草上的發(fā)生有上升和蔓延的趨勢，其衣殼蛋白(coat protein，CP)在病毒致病力和侵染中發(fā)揮著重要作用，主要參與蚜傳、包裝病毒粒子并調節(jié)RNA的復制、細胞間運動和系統(tǒng)侵染、癥狀表現等過程。本研究通過定點突變等方法獲得了TVBMV CP的12個突變體，利用農桿菌共浸潤的方法分析

2、了這些突變對病毒致病力的影響。與野生型的CP處理相比，92位的絲氨酸(Ser92)突變?yōu)锳la后，癥狀及綠色熒光并未發(fā)生變化，而突變?yōu)锳sp和His后，癥狀及綠色熒光明顯的減弱；122位的色氨酸(Trp122)突變成為Lys以及192位的精氨酸(Arg192)突變?yōu)镃ys后，癥狀及綠色熒光只在注射葉片出現，說明突變影響了病毒的長距離移動，當Trp122和Arg192分別突變?yōu)锳la和Glu后，癥狀及綠色熒光均消失，說明突變對于病毒是致死

3、的；225位的賴氨酸(Lyss225)突變成為Ala和Cys后，只在注射葉片中檢測到病毒粒子的存在，說明突變影響了病毒的長距離移動，在突變?yōu)镚lu后，無論注射葉片還是系統(tǒng)葉片，均未發(fā)現癥狀以及熒光的出現，說明這種突變對于病毒是致死的。利用Pole Bio-Informatique Lyonnais數據庫進行的二級結構預測表明，以上突變均可能導致CP構象的變化。這些結果表明，Ser92、Trp122、Arg192、Lys225這四個位點在