蛋內(nèi)注射瘦素對肉雞出雛后早期骨骼肌生長的影響.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)室以往的研究結(jié)果提示母雞可通過調(diào)節(jié)瘦素在蛋內(nèi)的沉積，程序化地影響后代出雛后的生長與代謝。本研究旨在探討蛋內(nèi)注射1eptin對出雛后肉雞早期骨骼肌生長的影響及其可能的作用途徑。
　　 1蛋內(nèi)注射瘦素對21日齡肉雞體重及血清、肌肉指標(biāo)的影響
　　 挑選蛋重相近的三黃肉雞種蛋，隨機(jī)分為三組：對照組（control group，CON）在蛋清內(nèi)注射100μL溶劑（phosphate buffered saline，PBS）

2、，leptin處理組分別注射0.5μg/100μLPBS（低劑量組，low leptin group，LL）和5.0μg/100μLPBS（高劑量組，high leptin group，HL）的重組小鼠leptin，出雛后飼養(yǎng)至21日齡時(shí)稱重并取腓腸肌和血清樣品。用放射免疫方法測定血清leptin水平，用生化分析法測定血糖濃度和腓腸肌中肌糖原含量，用BCA法檢測腓腸肌蛋白含量，用ATPase染色法分析腓腸肌肌纖維類型比例和肌纖維面積，并

3、分析了各指標(biāo)間的相關(guān)性。結(jié)果表明：高低劑量leptin均能顯著增加21日齡肉雞體重。高劑量leptin組平均日增重顯著增加，而低劑量leptin組血糖濃度顯著升高。Leptin的作用具有性別差異性。低劑量leptin能增加雄性肉雞體重、平均日增重、腓腸肌重和腓腸肌蛋白含量，同時(shí)顯著升高血糖濃度，對雌性肉雞卻沒有顯著性影響。高劑量leptin能增加雄性和雌性肉雞的體重和平均日增重，不同的是雄性伴隨肌纖維面積增大和血清leptin水平升高，

4、而雌性僅表現(xiàn)腓腸肌重增加。腓腸肌肌糖原及肌纖維類型比例沒有表現(xiàn)顯著性變化。相關(guān)性分析顯示，體重和平均日增重均與腓腸肌重正相關(guān)。體重、平均日增重和腓腸肌重與血糖濃度呈正相關(guān)，與腓腸肌蛋白含量呈負(fù)相關(guān)。雄性體重、平均日增重和腓腸肌重與血糖濃度呈正相關(guān)，而腓腸肌重與肌糖原含量呈負(fù)相關(guān)。雌性體重和平均日增重與腓腸肌朋糖原含量呈正相關(guān)。以上結(jié)果提示：蛋內(nèi)注射leptin促進(jìn)肉雞出生后早期骨骼肌生長，且存在劑量和性別上的依賴性。
　　 2蛋

5、內(nèi)注射瘦素對21日齡肉雞骨骼肌生長相關(guān)因子的影響
　　 為探討蛋內(nèi)注射leptin影響出雛后肉雞骨骼肌生長的機(jī)制，我們用RT-PCR方法檢測腓腸肌瘦素受體（leptin receptor，LEPR）、胰島素樣生長因子（insulin-like growthfactor，IGF）-1及其受體IGF-1R、生長激素受體（growth hormone receptor，GHR）、
　　 甲狀腺激素受體（thyroid horm

6、one receptor，TR）α及β、肌肉生長抑制素（myostatin，MSTN）和鈣蛋白酶3（calpain3，CAPN3）的mRNA表達(dá)，用Western-blot方法測定腓腸肌中LEPRb、IGF-1、MSTN前體（pre-MSTN）的蛋白含量，用熒光試劑盒檢測CAPNs的活性。結(jié)果表明：低劑量leptin顯著降低腓腸肌MSTN mRNA表達(dá)和CAPNs活性；高劑量leptin顯著增加LEPR和IGF-1 mRNA表達(dá)。Lep

7、tin對上述生長相關(guān)因子表達(dá)的影響同樣存在性別差異性。低劑量leptin能增加雄性MSTN和CAPN3 mRNA表達(dá)，降低CAPNs活性；對雌性卻沒有顯著性影響。高劑量leptin能增加雄性IGF-1和CAPN3的mRNA表達(dá)以及pre-MSTN的蛋白表達(dá)；而對雌性則增加IGF-1R和CAPN3的mRNA表達(dá)。Leptin處理對TRα及β、GHR mRNA及IGF-1蛋白等因子的表達(dá)沒有顯著影響。通過分析生長相關(guān)因子表達(dá)與生長表觀指標(biāo)間

8、的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)IGF-1 mRNA與體重、平均日增重和腓腸肌重呈正相關(guān)，與腓腸肌蛋白含量呈負(fù)相關(guān)；IGF-1蛋白與血清leptin濃度和腓腸肌蛋白含量呈正相關(guān)；preMSTN蛋白與血清leptin濃度呈正相關(guān)；而LEPRb蛋白與血清leptin濃度呈負(fù)相關(guān)；TRα mRNA與腓腸肌蛋白含量呈負(fù)相關(guān)。雄性IGF-1R mRNA與腓腸肌蛋白含量呈正相關(guān)；LEPR mRNA與體重和平均日增重正相關(guān)。雌性IGF-1 mRNA與體重呈正相關(guān)；IG