SHR和2K1C兩型高血壓大鼠血管重構及與ERK1-2信號通路關系對比研究.pdf

1、目的：探討SHR和2K1C兩型高血壓模型血管重構形式是否相同。檢測MAPK家族成員ERK1/2、上游調解激酶MEK1/2以及下游底物CPLA2在兩型高血壓模型中主動脈和腎臟血管平滑肌細胞中的表達特點，對比研究ERK1/2信號通路在兩型高血壓模型血管平滑肌細胞增殖/凋亡中的作用及調節(jié)途徑，進一步明確高血壓血管平滑肌細胞變化的分子機制。
　　方法：5周齡的雄性Wistarkyoto大鼠（WKY）36只，隨機分為兩腎一夾型高血壓組（簡稱

2、2K1C組，18只）和假手術正常血壓對照組（簡稱SHAM組，12只）以及空白對照組(簡稱CON組,6只)。2K1C組大鼠用直徑0.25mm的銀夾部分夾閉左腎動脈，關閉切口。SHAM組僅分離出左腎動脈，不做其它處理，作為假手術對照組；空白對照組不做任何處理。術后各組大鼠分別觀察至8周齡、16周齡和24周齡。SHR大鼠不做特殊處理，分別于8周齡（簡稱SHR8組，6只），16周齡（簡稱SHR16組，6只）和24周齡（簡稱SHR24組，6只）處

3、死，迅速提取腎臟和胸主動脈，一半置于4％中性多聚甲醛溶液固定，行HE和免疫組化染色。另一半置于-80℃冰箱中凍存用于Western-blotting檢測。目鏡測微尺測量兩型高血壓大鼠各周齡主動脈和腎臟細小動脈血管中膜厚度/血管內徑比值，免疫組織化學和Westernblot方法對比研究兩型高血壓大鼠主動脈、腎臟細小動脈平滑肌細胞中p-ERK1/2、p-MEK1/2及CPLA2的表達。
　　結果：1、血壓變化：2K1C組大鼠造模一周后

4、血壓明顯升高(P<0.01)，隨后穩(wěn)定保持在較高水平（192.58±12.92mmHg）。SHR從8周齡組開始血壓升高，隨著周齡增加SHR組血壓逐漸升高，18周齡后，SHR組血壓明顯高于2K1C組(P<0.05)。2、SHR和2K1C各周齡組主動脈、腎臟細小動脈中膜厚度/管腔內徑比值均明顯高于同周齡假手術組（P<0.01或P<0.05），相同周齡SHR和2K1C比較，SHR各周齡組小葉間動脈血管中膜厚度/管腔內徑比值明顯高于2K1C組（

5、P<0.01），SHR各周齡組腎小球損傷率均明顯高于同周齡2K1C組（P<0.01）。3、p-ERK1/2檢測情況：SHR和2K1C主動脈、腎臟細小動脈平滑肌細胞p-ERK1/2表達均明顯高于同周齡假手術組。相同周齡SHR和2K1C比較，2K1C16周齡組主動脈和8、16、24周齡組小葉間動脈平滑肌細胞p-ERK1/2明顯高于相應SHR組（P<0.05或P<0.01）。4、p-MEK1/2檢測情況：SHR和2K1C主動脈、腎臟細小動脈平

6、滑肌細胞p-MEK1/2表達均明顯高于同周齡假手術組。相同周齡SHR和2K1C比較，2K1C16和24周齡組主動脈、2K1C24周齡組葉間、弓形動脈平滑肌細胞p-MEK1/2表達均明顯高于相應SHR組（P<0.05）。SHR16周齡組小葉間動脈平滑肌細胞p-MEK1/2表達明顯高于相應2K1C組（P<0.05）。5、CPLA2檢測情況：SHR和2K1C主動脈、腎臟細小動脈平滑肌細胞CPLA2表達均明顯高于同周齡假手術組（P<0.05或P

7、<0.01）。相同周齡SHR和2K1C比較，2K1C8和16周齡組葉間動脈CPLA2表達明顯高于相應SHR組（P<0.05），SHR8、16、24周齡組小葉間動脈CPLA2表達明顯高于相應2K1C組（P<0.05或P<0.01）。
　　結論：1、SHR和2K1C兩型高血壓大鼠血壓變化趨勢不同。SHR高血壓大鼠血壓長期穩(wěn)定并隨周齡增長而逐漸增高，2K1C未隨周齡增長而逐漸增高。2、SHR和2K1C兩型高血壓大鼠主動脈和腎臟細、小動脈