小麥DREB2轉(zhuǎn)錄因子自然等位變異的發(fā)掘.pdf

1、DREB2(dehydration resistance element binding protein)轉(zhuǎn)錄因子能夠特異性的與啟動(dòng)子中的DRE順式作用元件結(jié)合，參與調(diào)控水分脅迫應(yīng)答，在響應(yīng)干旱脅迫過程中起重要作用。近些年的研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)DREB2轉(zhuǎn)錄因子廣泛存在于擬南芥、水稻、大麥、小麥和玉米等各種植物中，參與調(diào)控干旱脅迫下多個(gè)功能基因的表達(dá)，從而提高植物抗旱性。
　　本研究主要是利用已經(jīng)克隆的TaDREB2基因(DQ353852

2、)，分析13份抗旱性不同的小麥品種在水分脅迫下開花期時(shí)TaDREB2基因的表達(dá)多樣性，篩選出該基因的自然等位變異，對于研究TaDREB2的逆境脅迫應(yīng)答機(jī)理和小麥抗旱品種遺傳改良具有重要指導(dǎo)意義。本研究還對不同小麥品種的TaDREB2進(jìn)行序列多樣性分析，為開發(fā)和定位該基因的SNP標(biāo)記奠定了基礎(chǔ)。
　　1、研究TaDREB2基因的表達(dá)模式。對旱選10號的幼苗進(jìn)行ABA、高鹽、干旱和低溫脅迫，用實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)對DREB2基因進(jìn)行

3、表達(dá)模式的分析。發(fā)現(xiàn)TaDREB2基因受干旱、低溫和高鹽的誘導(dǎo)，不受外源ABA脅迫誘導(dǎo)。
　　2、本研究以13個(gè)品種進(jìn)行TaDREB2基因表達(dá)多樣性分析。利用實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)研究在開花后10天進(jìn)行干旱脅迫，TaDREB2基因在這13個(gè)品種的旗葉和籽粒中的表達(dá)多樣性。結(jié)果表明其在同一品種不同組織之間的表達(dá)模式是一致的。在水分脅迫下，洛旱11號、洛旱8號、西農(nóng)928、晉麥47、鄭9023和周麥18這6個(gè)抗旱品種該基因的表達(dá)呈現(xiàn)上

4、調(diào)趨勢。其他品種的表達(dá)呈現(xiàn)下調(diào)趨勢。
　　3、以中國春缺體-四體為材料，采用基因特異性引物PCR進(jìn)行TaDREB2染色體定位。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，以缺3D/3B缺體-四體材料為模板的PCR反應(yīng)體系中無擴(kuò)增產(chǎn)物生成，而在中國春和其他缺體-四體材料的反應(yīng)體系中，均產(chǎn)生一條與目的片段大小一致的帶，說明TaDREB2基因定位在3D染色體上。
　　4、在21份不同小麥品種D基因組上不同基因型之間發(fā)現(xiàn)1個(gè)SNP位點(diǎn)，該位點(diǎn)位于編碼區(qū)內(nèi)，屬于非同義