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文檔簡(jiǎn)介
1、多酚氧化酶(Polyphenols Oxidase,簡(jiǎn)稱PPO)是一類以Cu2+為輔基的氧化還原酶,在組織發(fā)育過程中形成并貯存于葉綠體中。煙草中的PPO在調(diào)制過程中能催化氧化多酚類化合物為α-醌,發(fā)生棕色化反應(yīng),α-醌可聚合成黑色素,產(chǎn)生過深的顏色,不僅影響煙葉的外觀質(zhì)量,也使內(nèi)部化學(xué)成分消耗過度,降低了內(nèi)在質(zhì)量。合理控制煙草中PPO的活性,在調(diào)制過程中可減少掛灰煙、黑煙和雜色煙,增加桔黃色上中等煙比例,增加烤煙的天然特征香氣,降低刺激
2、性。 本研究以中煙100(中煙種子有限責(zé)任公司青島分公司提供)為試驗(yàn)材料,通過煙葉浸泡法、葉柄浸泡法和葉面噴施法3種不同的抑制劑施用方式處理成熟期的煙葉,進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn),測(cè)定PPO活性、總酚含量、綠原酸含量的變化以及對(duì)煙葉烘烤效果的影響。主要研究結(jié)果如下: 1.測(cè)定了煙草生長(zhǎng)各階段PPO活性的變化。試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)多酚氧化酶在煙草苗期活性最高,伸根期活性有所下降,到生理成熟期活性又上升至接近最高值,以后逐漸下降。該研究還同時(shí)發(fā)
3、現(xiàn):在工藝成熟期PPO活性已經(jīng)下降到最高活性的30%,因此在該時(shí)期采收煙葉,從PPO活性考慮應(yīng)該是比較合理的。 2.比較出了不同濃度的NaDiCa,EDTA,巰基乙醇,硫脲4種抑制劑對(duì)煙葉中多酚氧化酶活性抑制效果的強(qiáng)弱順序?yàn)镹aDiCa,EDTA,巰基乙醇,硫脲。測(cè)定了在抑制劑存在的條件下pH值與溫度對(duì)PPO活性的影響,結(jié)果表明,在抑制劑存在的條件下,PPO的最適pH值為7.0左右,最適溫度為40℃.通過比較篩選出了對(duì)PPO活性
4、有明顯抑制效果的3個(gè)抑制劑濃度(3mmol/L,4mmol/L,5mmol/L)。這幾種抑制劑對(duì)PPO的抑制作用都屬于可逆抑制,增加抑制劑濃度導(dǎo)致酶活力的下降是由于酶活力受到抑制,催化效率降低,而不是通過導(dǎo)致有效的酶量減少,而引起酶活力的下降。 3.對(duì)于NaDiCa,EDTA和硫脲通過葉面噴施法、抑制劑溶液浸泡葉片法和抑制劑溶液浸泡葉柄法3種不同的施用方式對(duì)煙葉中PPO活性的影響進(jìn)行了分別試驗(yàn),并進(jìn)行了處理后烤煙的相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定
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