能量來源對產(chǎn)蛋雞肝臟脂肪代謝的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、試驗一不同能量來源和水平對產(chǎn)蛋雞脂肪肝的誘導(dǎo)作用
　　 摘要：本實驗研究了不同能量來源和水平對產(chǎn)蛋雞脂肪肝的誘導(dǎo)作用以及對脂肪肝的預(yù)測指標(biāo)進(jìn)行篩選。選取150只高產(chǎn)期（30周齡）羅曼粉殼蛋雞，隨機(jī)分成3組，每組10個重復(fù)，每個重復(fù)5只雞。分別飼喂三種日糧，其中對照組代謝能為2.65Mcal/kg;油脂組代謝能為3.06Mcal/kg;淀粉組代謝能為3.00Mcal/kg。結(jié)果顯示：高能日糧極顯著降低采食量和產(chǎn)蛋率(P＜0.01)

2、；淀粉組蛋重極顯著低于對照組和油脂組(P＜0.01)；飼喂油脂和淀粉可以極顯著提高產(chǎn)蛋雞肝臟脂肪含量(P＜0.01)。在第1天，第29天，第43天采血中，油脂組和淀粉組血漿ALT和AST極顯著高于對照組(P＜0.01)；油脂組血漿LDH較對照組有顯著提高(P＜0.05)，淀粉組血漿LDH有增加的趨勢；油脂和淀粉可以極顯著提高蛋雞肝臟粗脂肪含量，提高幅度分別為71.9％和82.9％，而對膽固醇和磷脂無顯著影響；油脂可以提高血漿中TG和TC

3、的含量(P＜0.01)，淀粉可以極顯著提高血漿中TC的含量(P＜0.01)，但是對血漿TG無影響。飼喂高能日糧以后，油脂組血漿MDA水平較對照組極顯著提高95.7％，淀粉組較對照組提高76.9％(P＜0.01)，而且淀粉可以顯著提高血液胰島素和雌二醇的含量(P＜0.05)。結(jié)果提示，ALT、AST和TC可以作為預(yù)測脂肪肝的有效指標(biāo)，而碳水化合物（淀粉）可以更有效的誘導(dǎo)脂肪在肝臟中的沉積，油脂對肝臟的損害程度大于碳水化合物。
　　

4、 試驗二不同能量來源和水平對產(chǎn)蛋雞肝臟MTP，SREBP-1C，ChREBP基因表達(dá)的影響
　　 摘要：采用分段克隆測序，并用生物信息學(xué)拼接的方法，首次克隆并測出雞MTP基因的全長CDS序列，據(jù)此設(shè)計了MTP的熒光定量PCR反應(yīng)引物。本實驗動物試驗同實驗一，采樣后采用定量PCR(SYBR)，以β-actin基因為內(nèi)參基因，研究不同能量來源和水平對產(chǎn)蛋雞肝臟MTP，SREBP-1C，ChREBP基因表達(dá)的影響。結(jié)果表明：淀粉可以極

5、顯著提高產(chǎn)蛋雞SREBP-1C表達(dá)量(P＜0.01)，較對照組提高258％，油脂則提高了產(chǎn)蛋雞SREBP-1C表達(dá)量(P＞0.05)；淀粉也顯著提高產(chǎn)蛋雞ChREBP表達(dá)量(P＜0.05)，油脂對產(chǎn)蛋雞ChREBP表達(dá)量無顯著影響(P＞0.05)。在獲得了MTP全長CDS序列后，本試驗從GenBank核酸數(shù)據(jù)庫中下載了不同物種（包括人類、豬、牛、魚、老鼠等）MTP基因的CDS序列，并進(jìn)行了序列分析。結(jié)果表明，本試驗測得的MTP基因與計算

6、機(jī)模擬的的雞MTP基因具有最高的相似程度，其同源性為99.7％，而與其他的動物如豬，狗，猴，短尾負(fù)鼠、新桿狀線蟲、海膽等MTP基因的同源性差。由此結(jié)果可以看出，克隆的MTP基因序列屬于禽的MTP，與其他動物的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。
　　 試驗三能量來源對產(chǎn)蛋雞肝臟脂肪代謝的影響及其機(jī)制研究
　　 摘要：本實驗研究了不同能量來源（油脂和淀粉）對產(chǎn)蛋雞肝臟脂肪代謝的影響及其機(jī)制研究。選用體重接近，體況良好的高產(chǎn)羅曼粉殼蛋雞（30周齡

7、）120只，隨機(jī)分為5組，8重復(fù)/組，3只/重復(fù)。受試雞單獨給料，限制飼養(yǎng)，日糧按照中國家禽飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)(2004)且日采食量按照120克日糧作為限飼標(biāo)準(zhǔn)，所有蛋雞按此標(biāo)準(zhǔn)限飼到90％。五種試驗日糧日采食量如下，基礎(chǔ)料（玉米-豆粕型）108克/天；油脂組提供63克/日；淀粉組94.4克/天；油脂組63克/日+Metformin0.55克/日；淀粉組94.4克/天+Metformin0.55克/日。結(jié)果顯示：淀粉可以顯著提高產(chǎn)蛋雞肝臟脂肪含量

8、(P＜0.05)，極顯著提高肝臟膽固醇水平(P＜0.01)，對磷脂無顯著影響(P＞0.05)；油脂可以提高產(chǎn)蛋雞肝臟粗脂肪含量，但是差異不顯著(P＞0.05)，油脂都能顯著或極顯著提高產(chǎn)蛋雞肝臟膽固醇和磷脂含量(P＜0.05或P＜0.01)。油脂可以極顯著提高ALT的含量(P＜0.01)，對AST、TG和TC均無顯著影響(P＞0.05）；而淀粉組血漿AST濃度較對照組顯著提高了55％(P＜0.05)，淀粉對AST、TG和TC均無顯著影響

9、(P＞0.05)，添加Metformin可以加重產(chǎn)蛋雞肝臟的轉(zhuǎn)氨酶釋放，但是，卻極顯著降低了血脂TG的含量(P＜0.01)，對TC則無顯著影響(P＞0.05)。
　　 高油脂的日糧可以極顯著降低小腸微絨毛高度(P＜0.01)，可以顯著增加隱窩深度(P＜0.05)，油脂可以提高消化道食糜中脂肪酶活性(P＜0.01)；而淀粉對小腸微絨毛和隱窩均無顯著影響(P＞0.05)，當(dāng)?shù)矸壑屑尤隡etformin則極顯著降低了小腸微絨毛高度，同

10、樣，淀粉可以極顯著提高食糜中淀粉酶的活性(P＜0.01)，淀粉對油脂酶活性沒有影響。在油脂和淀粉組中添加Metformin對消化酶無顯著影響(P＞0.05)。淀粉和油脂均降低了血漿中VLDL和ApoB-100水平，但是差異沒有達(dá)到顯著水平(P＞0.05)，其中較對照組相比，淀粉組VLDL降低了9％，油脂組VLDL降低了12％，兩個組中VLDL和ApoB-100顯示出一致的趨勢；添加Metformin以后，VLDL和ApoB-100的濃度

11、均出現(xiàn)了顯著的降低(P＜0.05)。
　　 淀粉可以極顯著提高M(jìn)TP、SREBP-1C和ChREBP基因表達(dá)量(P＜0.01)，與對照組相比，淀粉組MTP基因mRNA表達(dá)量提高了52.8％，SREBP-1C基因mRNA表達(dá)量提高了265％，ChREBP基因mRNA表達(dá)量提高了76.4％。油脂有提高M(jìn)TP、SREBP-1C和ChREBP基因mRNA表達(dá)量的趨勢，但是差異不顯著(P＞0.05)。添加Metformin以后，SREBP

12、-1C和ChREBP基因mRNA表達(dá)量出現(xiàn)顯著或極顯著降低(P＜0.05或P＜0.01)，而MTP基因mRNA表達(dá)量則無顯著變化(P＞0.05)。淀粉可以極顯著提高肝臟ACC活性(P＜0.01)，而油脂則顯著降低了ACC活性(P＜0.05)，添加Metformin的淀粉組和油脂組，ACC活性較對照組相比無顯著差異(P＞0，05)；淀粉可以極顯著提高FAS活性，油脂對FAS合成酶無顯著影響，添加Metformin的淀粉組和油脂組對FAS活

13、性無顯著影響(P＞0.05)；油脂可極顯著提高CPT-1活性(P＜0.01)，淀粉組也能提高CPT-1活性(P＜0.05)，而加入Metformin以后發(fā)現(xiàn)，CPT-1活性均極顯著提高。淀粉和油脂對LPC和G-6-P活性無顯著影響(P＞0.05)，Metformin組結(jié)果可以看出，添加Metformin可以降低LPC的活性，但是差異沒有達(dá)到顯著水平(P＞0.05)。添加Metformin的油脂組和淀粉組G-6-P活性較未添加Metfor

14、min的淀粉組和油脂組G-6-P活性有降低的趨勢，但是差異也不顯著(P＞0.05)。
　　 結(jié)果顯示：淀粉可以通過調(diào)節(jié)生脂基因的表達(dá)和激活脂肪酸相關(guān)合成酶活性大量合成脂肪，而油脂則對內(nèi)源脂肪酸的合成沒有影響，油脂可能會直接進(jìn)入肝細(xì)胞保存起來，從而也會導(dǎo)致肝臟脂肪含量的增加，由于外源脂肪進(jìn)入肝臟以后更用以進(jìn)入線粒體氧化，本實驗可以看出，油脂比淀粉更能促進(jìn)脂肪的氧化，從而造成氧化損傷的加劇。本試驗顯示，淀粉和油脂無法加快脂肪的釋放，