AMPK活性變化對產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞膽固醇合成的影響研究.pdf

1、為了初步探索AMPK是否參與產(chǎn)蛋雞肝臟膽固醇代謝的調(diào)節(jié)，本研究通過體外懸浮培養(yǎng)產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞，研究AMPK活性變化對肝細(xì)胞膽固醇合成、HMGR活性以及VLDLy合成和轉(zhuǎn)運(yùn)的影響，從而明確AMPK與產(chǎn)蛋雞肝臟膽固醇合成和轉(zhuǎn)運(yùn)的關(guān)系。研究包括兩個試驗(yàn)。 試驗(yàn)一、產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞的分離和最佳灌注時間的確定本 試驗(yàn)在選用半原位二步膠原酶灌注法的基礎(chǔ)上做了簡化，簡化之處就是剝離產(chǎn)蛋雞肝門靜脈，直接從肝門入口處用注射器灌注。最佳灌注時間的

2、確定采用單因子設(shè)計(jì)，設(shè)三個處理，分別灌注40 min、30min和20min.測定肝細(xì)胞產(chǎn)量和細(xì)胞成活率。結(jié)果表明：簡化產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞灌注法可以得到理想的分離效果，灌注30min不僅可以得到充足的單個細(xì)胞，而且成活率滿足實(shí)驗(yàn)要求。 試驗(yàn)二、AMPK活性變化對產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞膽固醇合成的影響 研究采用單因子設(shè)計(jì)，研究AMPK活性變化對高產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞的膽固醇合成以及合成酶活性的影響。結(jié)果表明：在產(chǎn)蛋雞肝細(xì)胞懸浮液中添加AICAR和