納豆菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)培養(yǎng)條件的研究.pdf

1、本研究首先以不同納豆菌抗菌粗提液，對(duì)不同的指示菌做抑菌實(shí)驗(yàn)，選出最佳的指示菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌；利用不同納豆菌抗菌粗提液對(duì)這兩種菌做抑菌實(shí)驗(yàn)篩選出納豆菌產(chǎn)抗菌物質(zhì)較多的菌種；對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌進(jìn)行納豆菌液體發(fā)酵產(chǎn)抗菌物質(zhì)的培養(yǎng)條件的優(yōu)化；并對(duì)納豆菌抗菌粗提液的部分理化性質(zhì)、與抗生素及防腐劑的對(duì)照實(shí)驗(yàn)、最小抑菌稀釋倍數(shù)進(jìn)行研究；對(duì)抗菌物質(zhì)初步分離純化，確定抗菌物質(zhì)分子量范圍。 研究結(jié)果表明，抗菌粗提液對(duì)酵母菌和霉菌均

2、無抑菌效果，對(duì)致病菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑菌效果較好。通過單因素試驗(yàn)對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌抑菌圈直徑的測(cè)量為指標(biāo)確定了納豆菌液體發(fā)酵產(chǎn)生抗菌物質(zhì)的最佳條件。抑制金黃色葡萄球菌的納豆菌發(fā)酵條件：碳源為甘油2﹪，氮源為0.5﹪大豆分離蛋白，裝液量20ml/100ml，接種量0.5﹪，初始pH7.0，培養(yǎng)時(shí)間72h，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，培養(yǎng)溫度25℃；抑制大腸桿菌的納豆菌發(fā)酵條件：碳源為甘油3﹪，氮源為0.5﹪大豆分離蛋白，裝液

3、量20ml/100ml，接種量0.5﹪，初始pH7.0，培養(yǎng)時(shí)間60h，搖床轉(zhuǎn)速180r/min，培養(yǎng)溫度30℃。納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)具有良好的熱穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性。即在4℃下24h，60℃、80℃、100℃、121℃下20min，在pH值從4到12的范圍內(nèi)，抑菌效果也基本不變。金屬離子對(duì)抑菌效果有促進(jìn)作用的有Ca2+、Al3+、Mg2+和Fe2+，而Cu2+、Mn2+、Zn2+則抑制抗菌物質(zhì)的產(chǎn)生。經(jīng)實(shí)驗(yàn)證實(shí)納豆菌種具有良好的遺傳穩(wěn)定

4、性。納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)的抑菌效果優(yōu)于抗生素(慶大霉素)及防腐劑的抑菌效果。納豆菌抗菌粗提液在很小濃度下就有抑菌效果。當(dāng)指示菌為金黃色葡萄球菌時(shí)，納豆菌抗菌粗提液最小抑菌稀釋倍數(shù)為27；當(dāng)指示菌為大腸桿菌時(shí)，納豆菌抗菌粗提液最小抑菌稀釋倍數(shù)為26。 納豆菌抗菌粗提液經(jīng)0.45μm的微孔濾膜過濾后采用SephadexG-25葡聚糖凝膠柱對(duì)納豆菌產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)進(jìn)行分離，分離出的樣液做抑菌實(shí)驗(yàn)，并通過做標(biāo)準(zhǔn)曲線求得抗菌物質(zhì)分子量范圍為