費氏中華根瘤菌RT19與耐鹽有關(guān)基因的克隆和功能研究.pdf

1、本論文利用Tn5-1063a轉(zhuǎn)座子對該菌株進行隨機突變，建立了一個容量達30,000個突變株的庫，從中篩選獲得在0.4mol/LNaCl的FY培養(yǎng)基上不能生長的鹽敏感突變株21株。利用Tn5-1063a能夠自連成質(zhì)粒和自我復(fù)制的功能，對突變株的基因組DNA進行酶切和自連，并對Tn5插入位置側(cè)翼序列進行測序。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，21株突變株是由于5個基因突變所致，它們是phaA2、phaD2、phaF2、phaG2和metH。其中，有8個突變株是因

2、phaA2突變所致，7個突變株是因phaD2突變所致，2個突變株是因phaF2突變所致，2個突變株是因phaG2突變所致。另外，2個突變株是因metH突變所致。將與phaA2有關(guān)的突變株分別命名為RTa-1至RTa-8，將與phaD2有關(guān)的突變株分別命名為RTd-1至RTd-7，將與phaF2有關(guān)的突變株分別命名為RTf-1和RTf-2，將與phaG2有關(guān)的突變株分別命名為RTg-1和RTg-2，而將與metH有關(guān)的突變株分別命名為RT