12954.費氏中華根瘤菌wgf03胞外多糖分泌相關(guān)基因exor和exod的研究

1、分類號蘭叢幺主UDC碩士學(xué)位論文費氏中華根瘤菌WGF03胞外多糖分泌相關(guān)基因exoR和exoD的研究粟月萍學(xué)科專業(yè)理學(xué)微生物學(xué)指導(dǎo)教師廑鷹塞嬰塞旦論文答辯日期2Q曼圣生量旦22旦學(xué)位授予日期2Q里圣生魚旦2量旦答辯委員會主席魚曼塑塾拯費氏中華根瘤菌WGF03胞外多糖分泌相關(guān)基因exoR和exoD的研究摘要費氏華根瘤菌WGF03(SinorhizobiumfrediiWGF03)是一種分泌胞外多糖(exopolysaceharides，E

2、PS)的革蘭氏陰性細菌，它能與豆科植物的根部或莖部發(fā)生共生作用，將環(huán)境中的氣態(tài)氮還原成氨，有數(shù)據(jù)報道胞外多糖是根瘤菌入侵豆科植物的信號分子之一。本研究從&觸d／iWGF03的基因組測序圖譜中，篩選exoR、exoD兩基因通過同源雙交換分別構(gòu)建AexoR、AexoD缺失突變體，結(jié)果顯示兩個突變體在YMA培養(yǎng)基平板上胞外多糖的產(chǎn)量明顯減少。將其接種于大豆幼苗，產(chǎn)生的根瘤比野生型的數(shù)量多，個體小，形狀不一，剖面多數(shù)為白色或淡黃色粉狀。乙炔還原

3、法測定突變體固氮作用比野生型菌株要弱，野生型菌株WGF03、AexoR、AexoD的固氮酶活分別為2361nmolg1h～、824nmolg1hJ和714nmolg1h～。結(jié)瘤時間測定：在第13天～16天突變體菌株結(jié)瘤的植株多于野生型菌株并在第13天左右達到50％的植株結(jié)瘤，22天左右所有的植株完成結(jié)瘤，而其他階段與野生型菌株基本一致。鈉鹽的耐受性研究結(jié)果顯示低濃度的鹽對突變體AexoR、AexoD和野生菌WGF03的生長有促進作用。突