費(fèi)氏中華根瘤菌WGF03中TsT和SiR基因的功能鑒定.pdf

1、分類號(hào)S1543UDC碩士學(xué)位論文費(fèi)氏中華根瘤菌WGF03中7sT和SiR基因的功能鑒定郭美樹(shù)論文答辯日期三盟羔生王旦盟學(xué)位授予日期墊!埠‘目趣日答辯委員會(huì)主席陸光洼嬰究旦費(fèi)氏中華根瘤菌WGF03中／sT和8iR基因的功能鑒定摘要硫是所有生物體必需的化學(xué)元素之一。它與氮相互作用，不僅能夠作為生物體大分子結(jié)構(gòu)組分，而且還能在新陳代謝中發(fā)揮特定作用。近年來(lái)的研究表明根瘤菌結(jié)瘤因子中的還原性末端，其硫化修飾決定了根瘤菌的宿主專一性。硫代硫酸硫

2、轉(zhuǎn)移酶由五r基因編碼，通過(guò)NCBI網(wǎng)站的Blast比對(duì)，與RhizobiumspNGR234在核苷酸水平上有95％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。為了鑒定這個(gè)基因的功能，我們通過(guò)pKl8mobsacB同源雙交換的方式，構(gòu)建TsT基因的缺失突變體TsTI。7kT基因缺失突變后，在以硫代硫酸鈉為唯一硫源的MM培養(yǎng)基中，突變菌株TsTI不能生長(zhǎng)，但是可以利用硫酸鹽、亞硫酸鹽、半胱氨酸和甲硫氨酸為唯一的硫源正常生長(zhǎng)。植株實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，乃丁

3、基因突變后，根瘤菌的結(jié)瘤時(shí)間推遲l天，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)瘤的能力下降，單株的結(jié)瘤數(shù)量也有所下降，同時(shí)在瘤重、植株干重和固氮酶活方面與野生型菌株SfrediiWGF03存在顯著差異。亞硫酸還原酶是硫代謝途徑中的一個(gè)酶，催化亞硫酸鹽還原為硫化物。該酶由SiR基因編碼，通過(guò)NCBI網(wǎng)站的Blast比對(duì)，發(fā)現(xiàn)該序列與RhizobiumspNGR234在核苷酸水平上有96％的一致性，在氨基酸水平上有98％的相似性。為了鑒定這個(gè)基因的功能，我們通過(guò)pKl8mo