雞源耐鉛乳酸菌的篩選鑒定及體內(nèi)外吸附性能研究.pdf

1、IsolationandIdentificationofLeadresistantLacticAcidBacteriafromChickenandStudyonabsorptionofaleadresistantstraininvivoand‘vitro田。ubmittedtolaeslssul9to上QingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegr

2、eeofMasterofAgronomyManZhaohong(CollegeofFoodScienceandEngineering)Supervisor：ProfZhaoHongkunQingdaoChinaJune，2014青島農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士專業(yè)學(xué)位論文摘要雞源耐鉛乳酸菌的篩選鑒定及體內(nèi)外吸附性能研究摘要即使在較低的濃度下，鉛對人體以及其他的有機體都可以產(chǎn)生毒性效應(yīng)，人體主要通過污染的空氣、煙塵、飲水、飲食(污染地區(qū)的動物內(nèi)臟、貝類、

3、蔬菜)攝入鉛。影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常功能，通過影響脂質(zhì)的氧化作用影響生物膜的功能，對人類具有生殖毒性破壞其正常生理代謝。微生物細(xì)胞的細(xì)胞壁含有多糖、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，具有結(jié)合重金屬的功能部位，藻類、細(xì)菌、真菌、酵母菌都有吸附金屬的潛力。所以乳酸菌可以應(yīng)用于重金屬的清除研究中。探討了電感耦合等離子體發(fā)射光譜4義(ICP—OES)a]定不同食品中鉛含量的方法，結(jié)果表明，該方法檢出限為O002mg／L，加標(biāo)回收率為9650“104O％，變異系數(shù)為

4、164％，適合測定重金屬鉛。測定結(jié)果表明肉類、魚蝦類共18中樣品中鉛檢出率為8333％，其中雞肉、羊肉、雞肝、蝦、蛤蜊、扇貝中鉛含量分別為O4263、O7706、O7161、O464、04541、07051mg／kg高于標(biāo)準(zhǔn)限量。長期消費或過量食用，會對人體健康造成損害。本研究篩選獲得鉛耐性乳酸菌，并將該乳酸菌應(yīng)用于清除進(jìn)入動物體內(nèi)的鉛。采集60份雞的腸道內(nèi)容物及排泄物樣品，采用涂布平板技術(shù)在含鉛濃度為200mg／L的MRS瓊脂平板上分

5、離鉛抗性乳酸菌。共分離篩選到8株具有較好鉛抗性和吸附性的目的菌株，逐步提高平板中鉛濃度為400mg／L、600mg／L，經(jīng)過不斷馴化，可耐受最高鉛濃度為800mg／L。選擇大腸桿菌0157為對照菌株測定鉛抗性菌株體外吸附效果，其中JTl菌株體外清除鉛能力最高為6695％。JTl菌株在含2％CaC03MRS瓊脂平板上出現(xiàn)溶鈣圈，初步判定有酸產(chǎn)生，通過菌株在MRS瓊脂平板上的菌落特征、形態(tài)觀察、16SrDNA序列分析等方法證明，所得JTl菌

6、株與屎腸球菌(Enterococcusfaecium)同源性為97％。一系生理生化特征顯示，該菌株可以在10～60℃條件下生長、pH35～96范圍內(nèi)生長良好、耐受65％NaCl、08％膽鹽、1％胰蛋白酶，對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏茵均有抑制性。使用已分離鑒定的雞源腸球菌進(jìn)行體內(nèi)除鉛作用試驗。選用體重為2029雄性小鼠為試驗動物，應(yīng)用含鉛濃度為300mg／L飲用水建立鉛中毒模型，結(jié)果顯示，飲用水和飼料中鉛含量分別為O534mg／L