苦豆子堿對(duì)耐藥性大腸桿菌ESBLs活性和AcrAB-TolC表達(dá)量影響的研究.pdf

1、本研究選取了18株動(dòng)物源性大腸埃希氏菌作為受試菌，通過雙紙片擴(kuò)散法篩選出產(chǎn)超光譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）耐藥菌株。研究了中藥苦豆子堿對(duì)分離菌株的抗菌活性，結(jié)果苦豆子堿對(duì)分離菌株的最小抑菌濃度（MIC）為2.5-15 mg/mL。
　　 研究了苦豆子堿對(duì)產(chǎn)超光譜?-內(nèi)酰胺酶耐藥菌株酶的活性和作用于編碼超光譜β-內(nèi)酰胺酶蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)的影響。測(cè)定苦豆子堿作用前后ESBLs的活力水平和編碼SHV 型ESBLs基因的影響，結(jié)果表明苦豆

2、子堿對(duì)耐藥菌株ESBLs 活力具有抑制作用。對(duì)編碼SHV 型ESBLs基因序列進(jìn)行克隆、測(cè)序，未見基因序列變化，說明苦豆子堿對(duì)超光譜β-內(nèi)酰胺酶蛋白一級(jí)結(jié)構(gòu)無影響。
　　 篩選出了2 株耐環(huán)丙沙星（CIP）、頭孢噻肟（CTX）、阿米卡星（AN）、氨芐西林（AM）
　　 藥物的多重耐藥性大腸桿菌，對(duì)編碼外排泵系統(tǒng)中acrA、acrB、acrR、tolC基因進(jìn)行克隆、測(cè)序，同時(shí)應(yīng)用實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)苦豆子堿對(duì)多重耐藥菌株作用

3、前后acrA、acrB、acrR、tolC基因的表達(dá)量影響。數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)作用前后編碼大腸桿菌外排泵系統(tǒng)acrA、acrB、acrR、tolC基因堿基序列未發(fā)生變化，但苦豆子堿作用后外排泵系統(tǒng)中AcrA、AcrB mRNA 表達(dá)量下降，負(fù)調(diào)控蛋白AcrR mRNA 表達(dá)量上升。
　　 研究表明苦豆子堿對(duì)大腸桿菌的耐藥株和敏感株都有抑制作用；苦豆子堿能使細(xì)菌的ESBLs的活力下降，對(duì)編碼耐藥性大腸桿菌的超光譜β-內(nèi)酰胺酶基因序列無影