番茄Vel基因在棉花中的功能驗(yàn)證.pdf

1、黃萎病是棉花的主要病害，嚴(yán)重影響棉花的產(chǎn)量。目前缺乏非常有效的途徑控制棉花黃萎病的發(fā)生。利用基因工程提高棉花尤其是陸地棉對黃萎病菌的抗性是選育陸地棉抗病種質(zhì)的重要方法。Ve1基因是在番茄中發(fā)現(xiàn)的控制黃萎病的主效基因，將Ve1進(jìn)行科間轉(zhuǎn)化擬南芥仍然能保持其抗病功能。本研究將人工合成的Ve1基因轉(zhuǎn)化本氏煙和陸地棉對其抗性功能進(jìn)行驗(yàn)證。
　　 將合成的Ve1基因轉(zhuǎn)化本氏煙(N.benthamiana)后，選用其中兩個(gè)表達(dá)量較高的煙草純

2、系接種國內(nèi)的棉花落葉型黃萎病菌“V991”和非落葉型黃萎病菌“1cd3-2”，但未見對黃萎病菌的抗性有明顯提高。隨后對煙草純系接種了國外黃萎病菌1號生理小種“JR2”和2號生理小種“M050414”。1號生理小種對煙草的致病力較強(qiáng)，煙草葉片變黃干枯，生長受到抑制，同期接種2號生理小種的煙草卻只表現(xiàn)出部分葉片發(fā)黃的癥狀，生長受影響較小。但轉(zhuǎn)基因系和野生型對這兩種黃萎病菌的抗性差異不明顯。檢測接種后煙草中Ve1介導(dǎo)信號路徑相關(guān)基因的表達(dá)水平

3、未也發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因系與野生型之間具有明顯差異。推測在本氏煙中可能不存在Ve1基因介導(dǎo)的抗黃萎病信號路徑。
　　 Ve1超表達(dá)載體轉(zhuǎn)化陸地棉YZ1后得到兩個(gè)轉(zhuǎn)錄水平較高的轉(zhuǎn)基因純系。將其接種“V991”后，轉(zhuǎn)基因系在表型和病指兩方面都沒有表現(xiàn)出對黃萎病菌的抗性有所增強(qiáng)，且下游信號路徑相關(guān)基因也并未被激活。由此可見，Ve1基因?qū)μ岣呙藁▽S萎病菌的抗性的作用并不大。另外，接種實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)國外黃萎病菌1號生理小種“JR2”對棉花植株沒有致病力