中國林蛙抗菌肽的分離純化及cDNA克隆.pdf_第1頁
已閱讀1頁，還剩49頁未讀， 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明：本文檔由用戶提供并上傳，收益歸屬內容提供方，若內容存在侵權，請進行舉報或認領

文檔簡介

1、本研究通過反相高效液相法從中國林蛙皮膚分泌物中分離、純化得到3種多肽，經抑菌試驗分析表明，其中兩種多肽具有較強的抑菌活性。將其進行Tris-TricineSDS聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)，測定其分子量為7.0kDa左右，經PVDF轉膜后，利用Edaman降解法分別測定其N末端10個氨基酸序列。然后應用在線程序CODEHOP(Consensus-degeneratehybridoligonucleotideprimers)設計

2、簡并引物，同時提取蛙皮總RNA，采用RT-PCR及RACE法，首次克隆得到兩條中國林蛙抗菌肽基因cDNA序列，分別命名為CAMPs-1(GenBanK登錄號：DQ471289)和CAMPs-2(GenBanK登錄號：DQ471290)，CAMPs-1基因cDNA序列全長為285bp，其中包括183bp完整的開放閱讀框(openreadingframe，ORF)，推測編碼61個氨基酸的多肽(chensirin-1)，分子量(MW)為7.1

3、03kDa，同時含有102bp的3’非轉譯區(qū)(3'UTR)；CAMPs-2基因cDNA序列全長為279bp，其中包括177bp完整的開放閱讀框(openreadingframe，ORF)，推測編碼59個氨基酸的多肽(chensirin-2)，分子量(MW)為6.980kDa，同時含有102bp的3’非轉譯區(qū)(3'UTR)。生物信息學分析表明，CAMPs-1和CAMPs-2氨基酸序列(即chensirin-1,chensirin-2)N末

4、端均含有一個相對保守的由22個氨基酸組成的信號肽序列。通過chensirin-1和chensirin-2與已克隆的蛙屬抗菌肽序列的Blast比對及系統(tǒng)進化樹分析顯示，其與蛙屬抗菌肽的同源性較高，分別為63﹪～86﹪和57﹪～81﹪，說明chensirin-1和chensirin-2為蛙屬抗菌肽家族的兩個新成Z員。 綜上所述，利用3’RACE技術首次從中國林蛙皮膚中分離到中國林蛙抗菌肽基因CAMPs-1、CAMPs-2，并對其基因

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明，都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等，如果需要附件，請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙，網頁內容里面會有圖紙預覽，若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間，僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理，對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯，并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容，請與我們聯系，我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論