家蠶蛾吐出液蛋白質(zhì)分析及相關(guān)分泌器官功能研究.pdf

1、家蠶蛾吐出液是蠶蛾在羽化過程中分泌的一種液體，其中含有溶繭酶，作用是軟化和溶解繭層以便使蠶蛾從繭里出來。為了研究家蠶吐出液分泌器官的功能，將生理學(xué)實(shí)驗(yàn)和蛋白質(zhì)組學(xué)實(shí)驗(yàn)相結(jié)合，通過摘除下腭、涎腺，對(duì)摘除后的吐出液進(jìn)行酶活性的研究，通過MALDI-TOF-MS(基質(zhì)輔助激光解吸附離子化質(zhì)譜技術(shù))和LC-MS/MS(液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用)方法對(duì)吐出液的蛋白質(zhì)進(jìn)行了研究，對(duì)下腭、涎腺及中腸在吐出液分泌過程中的作用做了進(jìn)一步的探討，為溶繭酶的分泌機(jī)

2、制和吐出液蛋白質(zhì)的研究打下了基礎(chǔ)。
　　 1.家蠶蛹期下腭和涎腺的摘除對(duì)蠶蛹至蛾發(fā)育并沒有明顯影響，摘除下腭或涎腺后蠶蛹大多能發(fā)育成蛾，實(shí)驗(yàn)中蛹的死亡原因主要是由于摘除后流血過多或感染所致。
　　 2.通過測(cè)定摘除下腭的蛾吐出液、摘除涎腺的蛾吐出液、下腭晶體、嗉囊液的絲膠酶活性、蛋白酶活性、酯酶活性和纖溶酶活性，表明蠶蛾吐出液中的溶繭酶僅僅來自于下腭，中腸雖然也能分泌溶繭酶，但不會(huì)參與溶繭過程，而是在分泌到體外的過程中全

3、部失活。造成嗉囊液溶繭酶失活的具體機(jī)制還不是很清楚，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明它是由于涎腺的抑制作用所致。中腸分泌的溶液具有溶劑的作用，它為下腭晶體提供適宜的pH環(huán)境。涎腺的在脫繭過程中具有重要作用，它能有效地調(diào)控溶繭酶的活性。中腸分泌的溶液中除了溶繭酶外還含有其他的具有纖溶酶活性的酶類。
　　 3.對(duì)SDS-PAGE(十二烷基磺酸鈉—聚丙烯酰胺凝膠電泳)差異點(diǎn)的MALDI-TOF-MS進(jìn)行鑒定，摘除下腭的創(chuàng)傷對(duì)照組所具有的一條差異條帶鑒定