復(fù)方麻醉劑舒眠寧的研制、臨床效果、藥代動(dòng)力學(xué)及其對(duì)免疫功能的影響.pdf

1、靜脈全身麻醉是指將一種或幾種藥物經(jīng)靜脈注入，通過(guò)血液循環(huán)作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)而產(chǎn)生全身麻醉的方法，由于目前尚無(wú)任何一種靜脈全麻藥能夠單一滿足手術(shù)的需要，因此臨床上的靜脈全麻往往是將多種藥理性質(zhì)各不相同的藥物，先后或同時(shí)使用，以實(shí)現(xiàn)迅速完成誘導(dǎo)，麻醉過(guò)程平穩(wěn)，無(wú)污染，蘇醒快等目的，為外科手術(shù)創(chuàng)造良好的條件，確保動(dòng)物的安全和術(shù)后順利康復(fù)。氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖是獸醫(yī)臨床麻醉常用的三種藥物，可用于小動(dòng)物的麻醉前用藥、化學(xué)保定、誘導(dǎo)和維持麻醉，

2、但各藥單用時(shí)，往往副作用較大，難以使動(dòng)物進(jìn)入理想的麻醉狀態(tài)。本研究旨在通過(guò)合理配伍三種藥物，組成復(fù)方麻醉劑，經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)化其配比，獲得最佳處方，并研究其急性毒性、局部剌激性、穩(wěn)定性、藥物代謝動(dòng)力學(xué)過(guò)程、臨床麻醉效果和藥物對(duì)免疫功能的影響，為臨床上合理應(yīng)用本藥提供數(shù)據(jù)和參考。試驗(yàn)共分為以下六個(gè)部分：
　　 試驗(yàn)I舒眠寧注射液處方的研究
　　 氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖是三種廣泛應(yīng)用于小動(dòng)物臨床的麻醉藥，本試驗(yàn)將三者配伍使用，

3、試圖獲得更好的麻醉效果，最低的副作用。在預(yù)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)上，以小白鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，以氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖的含量為因素，每個(gè)因素設(shè)置三個(gè)水平，以注射復(fù)方藥物后小鼠翻正反射消失數(shù)為考察指標(biāo)，選用L9(34)正交表安排試驗(yàn)，優(yōu)化復(fù)方麻醉劑的處方，并制定生產(chǎn)工藝。結(jié)果：復(fù)方中三種主要成份的含量為氯胺酮(8 g·100mL-1)、賽拉嗪(0.9g·1OOmL-1)和咪達(dá)唑侖(0.2g-lOOmL-1)，定名為舒眠寧注射液，處方工藝簡(jiǎn)單，適合工廠化大批

4、量生產(chǎn)。
　　 試驗(yàn)II舒眠寧注射液的安全性和穩(wěn)定性試驗(yàn)
　　 為評(píng)價(jià)舒眠寧注射液的安全性，本試驗(yàn)以小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，進(jìn)行了急性毒性試驗(yàn)，經(jīng)序貫法測(cè)定出其ED50和LD50分別為0.706 mL'kg-1體重和2.366 mL.kg-1體重，治療指數(shù)為3.35;在家兔進(jìn)行了局部刺激性試驗(yàn)，結(jié)果表明本藥無(wú)眼刺激性，對(duì)肌肉具有非常輕度刺激性，對(duì)靜脈具有輕度刺激性，可安全、方便地應(yīng)用于臨床；為確定本藥的有效期，以市售包裝的三批舒

5、眠寧注射液，進(jìn)行長(zhǎng)期試驗(yàn)，結(jié)果表明在常溫、避光條件下放置兩年后，本品藥液澄清、無(wú)雜質(zhì)產(chǎn)生，主藥的標(biāo)示量變化不顯著，有效期可初步確定為2年。
　　 試驗(yàn)III舒眠寧在犬體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究
　　 為研究舒眠寧主要成份（氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖）在犬體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)過(guò)程。本試驗(yàn)建立了一種可同步測(cè)定犬血漿內(nèi)氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖的RP-HPLC法。采用一步液-液萃取法處理血漿樣品。使用C18色譜柱，流動(dòng)相為乙腈：甲醇-10

6、mmol．L-1庚烷磺酸鈉(44:10:46，v/v)，加冰醋酸調(diào)至pH3，流速0.7 mL- min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm，柱溫30℃。6只犬靜注舒眠寧后，采血，測(cè)定血藥濃度。氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖三種成份的藥時(shí)曲線均符合開(kāi)放二室模型，主要藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)分別為：氯胺酮Vc=1.231+0.147 L.kg-1，T1/2-4.2714-0.521 min,T1/2B=65.8774-15.701 min,AUC=147.331+2

7、0.5ug.min-mL-1,CL(s)=0.0393+0.0055L.min-1-kg-1;賽拉嗪Vc=0.918+0.299L.kg-1,T1/2a=4.627+2.056min, Tl/2B55.773士8.62 min,AUC=20.8664-1.781 ug.min-mL-1, CL(s)=0.0336士0.00289 L,min-1kg-1;咪達(dá)唑侖Vc=0.339-a:0.055 L.kg-1，T1/2a=5.6754-1

8、.82min,T1/2B=39.152+6.546min,AUC=13.554+l.059μg.min.mLq,CL(s)=0.01314-0.000975 L-min-1-kg-1
　　 試驗(yàn)Ⅳ舒眠寧注射液對(duì)靈貍的麻醉效果研究
　　 9只靈猩不使用麻醉前用藥，經(jīng)靜脈注射舒眠寧0.06 mL-kg-1體重，觀察其麻醉誘導(dǎo)時(shí)間、維持麻醉時(shí)間、蘇醒時(shí)間，記錄心率、血氧飽和度、呼吸數(shù)、收縮壓、舒張壓和直腸溫度，評(píng)價(jià)鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜和

9、肌松效果。結(jié)果顯示：其誘導(dǎo)、維持麻醉、蘇醒時(shí)間分別為33.11士3.76 sec、234-5.83min、15-5min;麻醉后心率和血壓先升高后緩慢降低，但均在正常生理范圍內(nèi)；體溫緩慢下降，但變化幅度較??；呼吸數(shù)先降低后緩慢升高；麻醉過(guò)程平穩(wěn)，未見(jiàn)嘔吐、眼球震顫、大量流涎等副作用。
　　 試驗(yàn)V賽拉嗪對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和周期分布的影響
　　 本研究使用a2-AR激動(dòng)劑賽拉嗪、a2-AR頡頏劑育亨賓、a2A-AR頡頏劑

10、BRL44408、a2B-AR頡頏劑Imiloxan hydrochloride和a2c-AR頡頏劑JP1302，研究a2-AR激動(dòng)劑與其頡頏劑對(duì)ConA介導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期分布的影響。結(jié)果表明：終濃度為0.01-0.4μg-mL-1的賽拉嗪對(duì)ConA介導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響；當(dāng)賽拉嗪濃度在20-80utg.mL-1范圍內(nèi)時(shí)，對(duì)ConA介導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖產(chǎn)生明顯抑制，與單純ConA組比較差異極顯著(P<0.01)，

11、且呈劑量依賴性。育亨賓（20μg-mL-1，40μg-mL"-1）與40utg.mL-1賽拉嗪聯(lián)用時(shí)，可增強(qiáng)賽拉嗪對(duì)脾淋巴細(xì)胞的抑制作用；a2A-AR頡頏劑和a2B-AR.頡頏劑均不影響賽拉嗪的細(xì)胞增殖調(diào)節(jié)作用；而a2C-AR頡頏劑JP-1302在較低濃度(30，60ng.mL-1)，就能夠明顯增強(qiáng)40μg-mL-l的賽拉嗪對(duì)淋巴細(xì)胞的抑制作用，呈劑量依賴性。高濃度賽拉嗪(40μg-mL-l)可抑制細(xì)胞進(jìn)入S期，促進(jìn)晚期凋亡；JP130

12、2可顯著增強(qiáng)高濃度賽拉嗪的促凋亡作用和對(duì)淋巴細(xì)胞周期的阻滯作用。上述試驗(yàn)結(jié)果提示，賽拉嗪對(duì)脾淋巴細(xì)胞活性的抑制作用可能是由a2c-AR介導(dǎo)的。
　　 試驗(yàn)Ⅵ舒眠寧對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和周期分布的影響
　　 本研究使用舒眠寧注射液的三種主要成份（氯胺酮、賽拉嗪和咪達(dá)唑侖）單用或聯(lián)用，研究舒眠寧對(duì)ConA介導(dǎo)的小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期分布的影響。結(jié)果表明：體外試驗(yàn)中，終濃度為0.0625-12.5μg.mL-1范圍內(nèi)的氯

13、胺酮對(duì)ConA介導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響；當(dāng)氯胺酮濃度升高至25—100μg'mL-1時(shí)，可產(chǎn)生明顯抑制作用。終濃度為0.01～0.4ug-mL-1的賽拉嗪對(duì)ConA介導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖無(wú)明顯影響；當(dāng)賽拉嗪濃度達(dá)到20-80μg-mL-1后，則產(chǎn)生明顯抑制作用，呈劑量依賴性。試驗(yàn)濃度范圍(0.01-100μg．mL-1)內(nèi)的咪達(dá)唑侖與脾潲巴細(xì)胞作用48 h后，均可抑制ConA誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖。低濃度舒眠寧(0.01—0Aug.mL-1