復(fù)方麻醉劑舒眠寧的研制、臨床效果、藥代動力學(xué)及其對免疫功能的影響.pdf

1、靜脈全身麻醉是指將一種或幾種藥物經(jīng)靜脈注入，通過血液循環(huán)作用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)而產(chǎn)生全身麻醉的方法，由于目前尚無任何一種靜脈全麻藥能夠單一滿足手術(shù)的需要，因此臨床上的靜脈全麻往往是將多種藥理性質(zhì)各不相同的藥物，先后或同時使用，以實現(xiàn)迅速完成誘導(dǎo)，麻醉過程平穩(wěn)，無污染，蘇醒快等目的，為外科手術(shù)創(chuàng)造良好的條件，確保動物的安全和術(shù)后順利康復(fù)。氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖是獸醫(yī)臨床麻醉常用的三種藥物，可用于小動物的麻醉前用藥、化學(xué)保定、誘導(dǎo)和維持麻醉，

2、但各藥單用時，往往副作用較大，難以使動物進入理想的麻醉狀態(tài)。本研究旨在通過合理配伍三種藥物，組成復(fù)方麻醉劑，經(jīng)正交試驗優(yōu)化其配比，獲得最佳處方，并研究其急性毒性、局部剌激性、穩(wěn)定性、藥物代謝動力學(xué)過程、臨床麻醉效果和藥物對免疫功能的影響，為臨床上合理應(yīng)用本藥提供數(shù)據(jù)和參考。試驗共分為以下六個部分：
　　 試驗I舒眠寧注射液處方的研究
　　 氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖是三種廣泛應(yīng)用于小動物臨床的麻醉藥，本試驗將三者配伍使用，

3、試圖獲得更好的麻醉效果，最低的副作用。在預(yù)實驗基礎(chǔ)上，以小白鼠為試驗動物，以氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖的含量為因素，每個因素設(shè)置三個水平，以注射復(fù)方藥物后小鼠翻正反射消失數(shù)為考察指標(biāo)，選用L9(34)正交表安排試驗，優(yōu)化復(fù)方麻醉劑的處方，并制定生產(chǎn)工藝。結(jié)果：復(fù)方中三種主要成份的含量為氯胺酮(8 g·100mL-1)、賽拉嗪(0.9g·1OOmL-1)和咪達唑侖(0.2g-lOOmL-1)，定名為舒眠寧注射液，處方工藝簡單，適合工廠化大批

4、量生產(chǎn)。
　　 試驗II舒眠寧注射液的安全性和穩(wěn)定性試驗
　　 為評價舒眠寧注射液的安全性，本試驗以小鼠為試驗動物，進行了急性毒性試驗，經(jīng)序貫法測定出其ED50和LD50分別為0.706 mL'kg-1體重和2.366 mL.kg-1體重，治療指數(shù)為3.35;在家兔進行了局部刺激性試驗，結(jié)果表明本藥無眼刺激性，對肌肉具有非常輕度刺激性，對靜脈具有輕度刺激性，可安全、方便地應(yīng)用于臨床；為確定本藥的有效期，以市售包裝的三批舒

5、眠寧注射液，進行長期試驗，結(jié)果表明在常溫、避光條件下放置兩年后，本品藥液澄清、無雜質(zhì)產(chǎn)生，主藥的標(biāo)示量變化不顯著，有效期可初步確定為2年。
　　 試驗III舒眠寧在犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)研究
　　 為研究舒眠寧主要成份（氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖）在犬體內(nèi)的藥代動力學(xué)過程。本試驗建立了一種可同步測定犬血漿內(nèi)氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖的RP-HPLC法。采用一步液-液萃取法處理血漿樣品。使用C18色譜柱，流動相為乙腈：甲醇-10

6、mmol．L-1庚烷磺酸鈉(44:10:46，v/v)，加冰醋酸調(diào)至pH3，流速0.7 mL- min-1，檢測波長210 nm，柱溫30℃。6只犬靜注舒眠寧后，采血，測定血藥濃度。氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖三種成份的藥時曲線均符合開放二室模型，主要藥代動力學(xué)參數(shù)分別為：氯胺酮Vc=1.231+0.147 L.kg-1，T1/2-4.2714-0.521 min,T1/2B=65.8774-15.701 min,AUC=147.331+2

7、0.5ug.min-mL-1,CL(s)=0.0393+0.0055L.min-1-kg-1;賽拉嗪Vc=0.918+0.299L.kg-1,T1/2a=4.627+2.056min, Tl/2B55.773士8.62 min,AUC=20.8664-1.781 ug.min-mL-1, CL(s)=0.0336士0.00289 L,min-1kg-1;咪達唑侖Vc=0.339-a:0.055 L.kg-1，T1/2a=5.6754-1

8、.82min,T1/2B=39.152+6.546min,AUC=13.554+l.059μg.min.mLq,CL(s)=0.01314-0.000975 L-min-1-kg-1
　　 試驗Ⅳ舒眠寧注射液對靈貍的麻醉效果研究
　　 9只靈猩不使用麻醉前用藥，經(jīng)靜脈注射舒眠寧0.06 mL-kg-1體重，觀察其麻醉誘導(dǎo)時間、維持麻醉時間、蘇醒時間，記錄心率、血氧飽和度、呼吸數(shù)、收縮壓、舒張壓和直腸溫度，評價鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜和

9、肌松效果。結(jié)果顯示：其誘導(dǎo)、維持麻醉、蘇醒時間分別為33.11士3.76 sec、234-5.83min、15-5min;麻醉后心率和血壓先升高后緩慢降低，但均在正常生理范圍內(nèi)；體溫緩慢下降，但變化幅度較??；呼吸數(shù)先降低后緩慢升高；麻醉過程平穩(wěn)，未見嘔吐、眼球震顫、大量流涎等副作用。
　　 試驗V賽拉嗪對小鼠脾淋巴細胞增殖和周期分布的影響
　　 本研究使用a2-AR激動劑賽拉嗪、a2-AR頡頏劑育亨賓、a2A-AR頡頏劑

10、BRL44408、a2B-AR頡頏劑Imiloxan hydrochloride和a2c-AR頡頏劑JP1302，研究a2-AR激動劑與其頡頏劑對ConA介導(dǎo)的小鼠脾淋巴細胞增殖和細胞周期分布的影響。結(jié)果表明：終濃度為0.01-0.4μg-mL-1的賽拉嗪對ConA介導(dǎo)的脾淋巴細胞增殖無明顯影響；當(dāng)賽拉嗪濃度在20-80utg.mL-1范圍內(nèi)時，對ConA介導(dǎo)的脾淋巴細胞增殖產(chǎn)生明顯抑制，與單純ConA組比較差異極顯著(P<0.01)，

11、且呈劑量依賴性。育亨賓（20μg-mL-1，40μg-mL"-1）與40utg.mL-1賽拉嗪聯(lián)用時，可增強賽拉嗪對脾淋巴細胞的抑制作用；a2A-AR頡頏劑和a2B-AR.頡頏劑均不影響賽拉嗪的細胞增殖調(diào)節(jié)作用；而a2C-AR頡頏劑JP-1302在較低濃度(30，60ng.mL-1)，就能夠明顯增強40μg-mL-l的賽拉嗪對淋巴細胞的抑制作用，呈劑量依賴性。高濃度賽拉嗪(40μg-mL-l)可抑制細胞進入S期，促進晚期凋亡；JP130

12、2可顯著增強高濃度賽拉嗪的促凋亡作用和對淋巴細胞周期的阻滯作用。上述試驗結(jié)果提示，賽拉嗪對脾淋巴細胞活性的抑制作用可能是由a2c-AR介導(dǎo)的。
　　 試驗Ⅵ舒眠寧對小鼠脾淋巴細胞增殖和周期分布的影響
　　 本研究使用舒眠寧注射液的三種主要成份（氯胺酮、賽拉嗪和咪達唑侖）單用或聯(lián)用，研究舒眠寧對ConA介導(dǎo)的小鼠脾淋巴細胞增殖和細胞周期分布的影響。結(jié)果表明：體外試驗中，終濃度為0.0625-12.5μg.mL-1范圍內(nèi)的氯

13、胺酮對ConA介導(dǎo)的脾淋巴細胞增殖無明顯影響；當(dāng)氯胺酮濃度升高至25—100μg'mL-1時，可產(chǎn)生明顯抑制作用。終濃度為0.01～0.4ug-mL-1的賽拉嗪對ConA介導(dǎo)的脾淋巴細胞增殖無明顯影響；當(dāng)賽拉嗪濃度達到20-80μg-mL-1后，則產(chǎn)生明顯抑制作用，呈劑量依賴性。試驗濃度范圍(0.01-100μg．mL-1)內(nèi)的咪達唑侖與脾潲巴細胞作用48 h后，均可抑制ConA誘導(dǎo)的細胞增殖。低濃度舒眠寧(0.01—0Aug.mL-1