哮喘藥物中4種非法添加物的檢出方法研究

1、<p>　　哮喘藥物中4種非法添加物的檢出方法研究</p><p>　　作者：蘇芳,黃力,劉海英,王偉寧,王芳</p><p>　　【摘要】 目的 利用薄層色譜法和高效液相色譜法鑒別哮喘藥中是否添加了茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松。方法 采用薄層色譜法、高效液相色譜法鑒別。結(jié)果 供試品中未檢出以上4種非法添加物。結(jié)論 薄層色譜鑒別方法簡便可靠，高效液相色譜法更靈敏精

2、確，兩種鑒別方法都可為打擊在哮喘類中藥中擅自添加茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松成分的違法行為提供有力依據(jù)。 </p><p>　　【關(guān)鍵詞】 茶堿;鹽酸麻黃堿;醋酸地塞米松;醋酸潑尼松;薄層色譜法;高效液相色譜法</p><p>　　哮喘病在我國是一種常見疾病,其發(fā)病率較高。有些藥廠為了謀利，宣稱自己生產(chǎn)的是純中藥制劑，并大肆宣揚(yáng)其“特效、速效”，且無毒副作用，但其中往往非法

3、添加了化學(xué)成分,常見的有茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松。為了有效打擊這種制假摻假的不法行為，保護(hù)服藥患者用藥安全，筆者建立了對(duì)以上4種成分的薄層色譜法和高效液相色譜法檢出方法，并對(duì)實(shí)際藥品進(jìn)行了檢測(cè)。</p><p><b>　　1 儀器與試藥</b></p><p>　　Sartorius R200D電子分析天平，硅膠GF254薄層板，島津LC-20AT

4、型高效液相色譜儀。對(duì)照品：茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松均由中國藥品生物制品檢定所提供。供試品A：清肺消咳顆粒(來源：某軍隊(duì)醫(yī)院自制制劑，批號(hào)：081012)。供試品B：利肺片(來源：長春某藥業(yè)有限公司，批號(hào)：20080902)。所用試劑：甲醇、三氯甲烷、乙醇、醋酸乙酯、濃氨均為分析純，乙腈為色譜醇，水為純化水。</p><p><b>　　2 方法與結(jié)果</b></p&g

5、t;<p><b>　　2.1 薄層色譜法</b></p><p>　　2.1.1 對(duì)照品溶液和供試品溶液的制備</p><p>　　對(duì)照品溶液的制備：稱取茶堿、鹽酸麻黃堿、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松對(duì)照品各適量，分別加甲醇使溶解，制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備:稱取供試品A一日口服量3袋，供試品B一日口服量6片，置乳缽中

6、研細(xì)，分別加甲醇適量，超聲10min使溶解，過濾，取續(xù)濾液作為供試品A溶液和供試品B溶液。</p><p>　　2.1.2 薄層分析</p><p>　　分別用定量毛細(xì)管吸取茶堿對(duì)照品溶液、鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液、醋酸潑尼松對(duì)照品溶液、醋酸地塞米松對(duì)照品溶液，供試品A溶液、供試品B溶液、四種對(duì)照品(1：1：1：1)混合溶液5μl，在距GF254薄層板底邊1cm處點(diǎn)樣，以三氯甲烷-水飽和的醋酸

7、乙酯-乙醇-濃氨(30：10：6：0.5)為展開劑，當(dāng)展開距為7cm時(shí)，取出薄層板，在空氣中揮干后，置254nm紫外燈下檢視，檢視后立即噴茚三酮溶液進(jìn)行顯色。</p><p><b>　　2.1.3 結(jié)果</b></p><p>　　見圖1。供試品A溶液和供試品B溶液均未有斑點(diǎn)出現(xiàn)。圖1 薄層色譜法1.茶堿對(duì)照品溶液;2.鹽酸麻黃堿對(duì)照品溶液;3.醋酸地塞米松對(duì)照品溶

8、液;4.醋酸潑尼松對(duì)照品溶液;5.供試品A溶液;6.供試品B溶液;7.四種對(duì)照品(1：1：1：1)混合溶液</p><p>　　2.2 高效液相色譜法</p><p>　　2.2.1 茶堿-鹽酸麻黃堿</p><p>　　2.2.1.1 色譜條件</p><p>　　色譜柱ZORBAX C18 (4.6mm×250mm,5μm);流

9、動(dòng)相：乙腈-水(0.02mol/L NH3 H2O)=10：90;流速為1ml/min;檢測(cè)波長為215nm;進(jìn)樣量為5μl。</p><p>　　2.2.1.2 對(duì)照品溶液的制備</p><p>　　稱取茶堿、鹽酸麻黃堿對(duì)照品各適量，分別加甲醇使溶解，然后混合制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。</p><p>　　2.2.1.3 供試品溶液的制備&l

10、t;/p><p>　　同薄層色譜法“2.1.1”制備方法。</p><p>　　2.2.1.4 混合溶液的制備</p><p>　　將對(duì)照品溶液與供試品溶液以1:1混合后,作為混合溶液。</p><p>　　2.2.1.5 高效液相色譜法分析</p><p>　　對(duì)照品溶液中,茶堿的出峰時(shí)間為6.3min,鹽酸麻黃堿的出峰

11、時(shí)間為8.7min,混合溶液中同樣發(fā)現(xiàn)在相同時(shí)間出峰的色譜峰，并且此峰與其他雜質(zhì)峰也能得到較好分離，而供試品溶液中未發(fā)現(xiàn)相同時(shí)間出峰的色譜峰。其中供試品A溶液的高效液相色譜圖，見圖2。</p><p>　　2.2.2 醋酸地塞米松-醋酸潑尼松</p><p>　　2.2.2.1 色譜條件</p><p>　　色譜柱ZORBAX C18 (4.6mm×250

12、mm,5μm);流動(dòng)相：乙腈-水=45：55;流速為1ml/min;檢測(cè)波長為250nm;進(jìn)樣量為5μl。</p><p>　　2.2.2.2 對(duì)照品溶液的制備</p><p>　　稱取醋酸地塞米松、醋酸潑尼松對(duì)照品各適量，分別加甲醇使溶解，混合后制成每1ml中約含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。</p><p>　　2.2.2.3 供試品溶液的制備</p>

13、;<p>　　同薄層色譜法“2.1.1”制備方法。</p><p>　　2.2.2.4 混合溶液的制備</p><p>　　同高效液相色譜法“2.2.1.4”制備方法。</p><p>　　2.2.2.5 高效液相色譜法分析</p><p>　　對(duì)照品溶液中,醋酸地塞米松的出峰時(shí)間為4.2min,醋酸潑尼松的出峰時(shí)間為7.1mi

14、n,混合溶液中同樣發(fā)現(xiàn)在相同時(shí)間出峰的色譜峰，并且此峰與其他雜質(zhì)峰也能得到較好分離，而供試品溶液中未發(fā)現(xiàn)相同時(shí)間出峰的色譜峰。其中供試品A溶液高效液相的色譜圖，見圖3。 圖2 高效液相色譜圖圖3 高效液相色譜圖3 討論薄層分析中，先將硅膠GF254薄層板置于254nm紫外燈下檢視，是因?yàn)椴鑹A、醋酸地塞米松、醋酸潑尼松可以在紫外燈下觀察到熒光斑點(diǎn);檢視后立即噴茚三酮溶液,是讓鹽酸麻黃堿進(jìn)行顯色,鹽酸麻黃堿在紫外燈下無法觀察到熒光斑點(diǎn)。薄層

15、色譜法試驗(yàn)通過比較供試品和對(duì)照品的熒光斑點(diǎn)，確保了定性結(jié)果的準(zhǔn)確性，整個(gè)分析方法具有簡便的特點(diǎn)，并且斑點(diǎn)清晰，專屬性及重現(xiàn)性好;高效液相色譜法比薄層色譜法更加靈敏、準(zhǔn)確、可靠，因此，在使用薄層色譜法檢測(cè)出某成分的存在后，可進(jìn)一步使用高效液相色譜法進(jìn)行確認(rèn)。利用薄層色譜法快速檢驗(yàn)出假劣藥品方法簡便、快速、實(shí)用性強(qiáng)，所用的薄層板可以市購，也可以自己制備，比較適用于基層單位對(duì)藥品的快速檢驗(yàn)。薄層色譜法和高效液相色譜法都可作為哮喘類中藥制劑中擅