鵪鶉蛋清溶菌酶的分離純化及其性質(zhì)研究.pdf

1、為了更進(jìn)一步了解蛋清溶菌酶的性質(zhì)，本試驗利用CM Sepharose FF陽離子交換柱層析和Sephadex G-75凝膠層析對鵪鶉蛋清溶菌酶進(jìn)行分離純化，結(jié)果表明，分離純化效果比較理想，峰之間區(qū)分非常明顯，純化過程中陽離子交換柱層析純化效果最為明顯，純度提高了25.9倍，去除了大部分雜蛋白，最終溶菌酶經(jīng)純化比活達(dá)到14821.5U/mg，純度提高了29.0倍，活力回收率為38％。 采用聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS-聚丙烯酰胺凝膠

2、電泳及溫度、pH值、常見金屬離子對鵪鶉蛋清溶菌酶進(jìn)行鑒定和性質(zhì)研究，電泳結(jié)果顯示均見單一務(wù)帶，表明該溶菌酶已達(dá)到電泳純，其分子量約為16000Da。該酶在10℃～20℃其活性較低，30℃活性最高，40℃～60℃活性下降，這表明該酶最適溫度為30℃左右。在pH6～7近中性環(huán)境中，鵪鶉蛋清溶菌酶活性最強，在偏酸性(pH<6.0)和偏堿性(pH>7.5)的環(huán)境中，鵪鶉蛋清溶菌酶的活性降低。Zn2+、Cu2+對該酶有激活作用，Mn2+和Ag+對

3、該酶有抑制作用，Ba2+、Ca2+、Fe3+、Na+等對該酶活性沒有顯著影響。 對鵪鶉蛋清溶菌酶進(jìn)行體外抗菌活性的研究，研究其抑菌譜、最小抑菌濃度，同時應(yīng)用透射電鏡研究其抑菌機制，結(jié)果表明，鵪鶉蛋清溶菌酶對革蘭氏陽性菌有抑菌的作用，如金黃色葡萄球菌，枯草桿菌抑菌效果顯著，對部分革蘭氏陰性菌有抑菌作用，如嗜水氣單胞菌、鰻弧菌也有不同程度的抑制，對大腸桿菌，耶爾森菌抑菌作用不明顯。對金黃色葡萄球菌、枯草桿菌，嗜水氣單胞菌，鰻弧菌最小