水稻半胱氨酸蛋白酶OsCP2的功能研究.pdf_第1頁(yè)
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1、半胱氨酸蛋白酶是植物體中重要的蛋白水解酶，廣泛參與種子萌發(fā)、幼苗發(fā)育、脅迫響應(yīng)、組織分化和衰老等生理過(guò)程。目前對(duì)于半胱氨酸蛋白酶在水稻花藥發(fā)育過(guò)程中的作用及分子機(jī)制研究得并不清楚。通過(guò)對(duì)野生型和雄性不育突變體tapetum degeneration retardation(tdr)基因芯片的比較，找到了表達(dá)下調(diào)的半胱氨酸蛋白酶基因OsCP2。通過(guò)RT-PCR以及GUS染色法分析，發(fā)現(xiàn)OsCP2從花藥發(fā)育的空泡花粉時(shí)期到成熟花粉時(shí)期進(jìn)行表

2、達(dá)；原位雜交結(jié)果也證明OsCP2只特異表達(dá)于水稻花藥絨氈層以及小孢子之中。生化實(shí)驗(yàn)顯示OsCP2不能夠參與由H2O2誘導(dǎo)的PCD途徑但OsCP2重組蛋白對(duì)酪蛋白具有較低的活性。對(duì)OsCP2進(jìn)行過(guò)表達(dá)以及干擾，結(jié)果發(fā)現(xiàn)陽(yáng)性植株花藥與野生型相比均呈淡黃色甚至白色；碘染、半薄切片實(shí)驗(yàn)證實(shí)兩種轉(zhuǎn)基因花藥均育性下降并且表型異常。免疫共沉淀及凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)也證實(shí)OsCP2可能為受TDR直接調(diào)控的下游基因。
　　 以上結(jié)果說(shuō)明，作為一個(gè)半胱氨酸

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