中藥復(fù)方治療緩慢性心律失常的機(jī)制與藥效研究詳解

1、中藥復(fù)方治療緩慢性心律失常的機(jī)制與藥效研究,研究背景 技術(shù)路線 研究成果 創(chuàng)新點(diǎn) 社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益,匯報(bào)提綱,研究背景,我國目前已進(jìn)入老齡化社會(huì)。緩慢性心律失常作為心臟傳導(dǎo)系統(tǒng)退行性改變，隨著老齡化的進(jìn)展，成為老年人群中的常見病、多發(fā)病。占心臟性猝死總數(shù)的17%--20%。緩慢性心律失常的治療在心血管藥物藥物研發(fā)中是一個(gè)遲后的領(lǐng)域。目前尚無治療緩慢性心律失常長期應(yīng)用的口服西藥。心臟起搏治療因其有創(chuàng)及高額費(fèi)用使很多患者難以接受。

2、中藥,技術(shù)路線,,檢索文獻(xiàn)778篇建立數(shù)據(jù)庫,關(guān)聯(lián)規(guī)則,,,,,,數(shù)據(jù)挖掘,中藥-證型聚類分析,中藥-證型聚類分析結(jié)果三維示意圖,數(shù)據(jù)挖掘,脈象-中藥關(guān)聯(lián),數(shù)據(jù)挖掘,舌苔-中藥關(guān)聯(lián),數(shù)據(jù)挖掘,證型-中藥關(guān)聯(lián),數(shù)據(jù)挖掘,數(shù)據(jù)挖掘,證型頻數(shù)分布,癥狀頻數(shù)分布,中藥頻數(shù)分布,舌苔頻數(shù)分布,數(shù)據(jù)挖掘,脈象頻數(shù)分布,數(shù)據(jù)挖掘,頻數(shù)最高排列癥狀：心悸脈象：遲脈證型：心腎陽虛方劑：麻黃附子細(xì)辛湯中藥：附子,研究依據(jù),,麻黃附子細(xì)辛湯,

3、參仙升脈口服液,藥效機(jī)制,,,,實(shí)驗(yàn)研究,與空白組相比,模型組大鼠心率降低(P<0.01)；與模型組相比,參仙升脈組大鼠心率明顯升高(P<0.01)。,藥效研究,與空白對照組相比，模型組大鼠心率降低（p＜0.01），左室射血分?jǐn)?shù)明顯增加（p＜0.01）；與模型組比較，參仙升脈組心率升高（p＜0.01），射血分?jǐn)?shù)沒有明顯變化，心輸出量增加。,藥效研究,實(shí)驗(yàn)研究,,臨床研究,藥效研究,總體健康,情感職能,臨床研究,藥效

4、研究,大鼠Na+-K+-ATP酶的活性,與空白對照組相比，模型組大鼠Na+-K+-ATP酶的活性明顯降低（p＜0.01）；與模型組相比，參仙升脈組大鼠Na+-K+-ATP酶的活性明顯升高（p＜0.05）。,機(jī)制研究,大鼠cAMP/cGMP變化,與空白對照組相比，模型組大鼠cAMP含量降低（p＜0.01），cGMP含量升高（p＜0.01，cAMP/cGMP比值降低（p＜0.01）；與模型組相比，參仙升脈組大鼠cAMP含量升高（p＜0.

5、05），cGMP含量降低（p＜0.01），cAMP/cGMP比值升高（p＜0.01）。,機(jī)制研究,大鼠心肌組織中Cx45蛋白的表達(dá),與空白組相比,模型組縫隙連接蛋白Cx45表達(dá)降低(P<0.01);與模型組相比,參仙升脈組縫隙連接蛋白Cx45表達(dá)升高(P<0.01)?,機(jī)制研究,免疫組化照片,大鼠心肌組織中Cx45蛋白的表達(dá),機(jī)制研究,大鼠左室功能變化,與空白對照組相比，模型組大鼠心率降低（p＜0.01），左室射血分?jǐn)?shù)明顯

6、增加（p＜0.01）；與模型組比較，參仙升脈組心率升高（p＜0.01），射血分?jǐn)?shù)沒有明顯變化，心輸出量增加。,機(jī)制研究,急性單離大鼠心肌細(xì)胞[Ca2+]i變化。注：**，與給藥前相比，t-檢驗(yàn)P<0.01。,麻黃堿、β-細(xì)辛醚和去甲烏藥堿對細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響表所示，F(xiàn)luo-3/AM熒光探針法表明，2μM麻黃堿使單離大鼠心肌細(xì)胞[Ca2+]i升高，達(dá)給藥前濃度的122.99±6.93%，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。而2μM

7、β細(xì)辛醚和2μM去甲烏藥堿則使[Ca2+]i下降約17%和11%，與給藥前相比有顯著差異性。β-細(xì)辛醚使心肌細(xì)胞[Ca2+]i降低作用與其在皮質(zhì)神經(jīng)元的作用基本相同。,機(jī)制研究,鈣離子濃度,麻黃堿、β-細(xì)辛醚和去甲烏藥堿對細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的影響細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的升高來源有細(xì)胞內(nèi)鈣釋放和外鈣內(nèi)流兩途徑。當(dāng)細(xì)胞外液鈣濃度降為零時(shí)，細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高與外鈣內(nèi)流無關(guān)。因此，2 μM 麻黃堿使[Ca2+]i升高的鈣離子來源可通過細(xì)胞外液鈣離子

8、濃度為零確定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見下表，在細(xì)胞外鈣為零時(shí)，2 μM 麻黃堿不再使[Ca2+]i升高，說明麻黃堿可使細(xì)胞外鈣離子通過通道流入而使[Ca2+]i升高。,細(xì)胞外液鈣濃度變化對2 μM 麻黃堿在單離大鼠心肌細(xì)胞引起[Ca2+]i變化的影響,注：**， P<0.01，與給藥前相比，經(jīng)t-檢驗(yàn)呈顯著性差異。,機(jī)制研究,鈣離子濃度,,麻黃堿、β細(xì)辛醚和去甲烏藥堿對高電壓依賴性鈣離子通道的影響 全細(xì)胞電壓鉗法測定心肌細(xì)胞高電壓依賴性鈣離

9、子電流。設(shè)定保持電位-40mV，指令電壓為-50 ～ +50mV，步階電壓10mV，刺激頻率為2Hz，刺激間隔為6s，記錄ICa。為消除細(xì)胞間誤差，電流值以電流密度（pA/pF）表示。2μM麻黃堿顯著提高了心肌細(xì)胞約30%ICa峰電流密度，由給藥前的1.65±0.08 pA/pF升高至2.15±0.27 pA/pF，與[Ca2+]i變化呈相同趨勢，說明麻黃堿對于鈣離子流動(dòng)的影響在于可使細(xì)胞膜電壓依賴性的鈣通道開放，鈣

10、離子大量流入細(xì)胞內(nèi)，從而使[Ca2+]i升高。而2μMβ-細(xì)辛醚和2μM去甲烏藥堿并未提高心肌細(xì)胞ICa峰電流密度，相反有下降趨勢，也與其對[Ca2+]i的影響呈同向，但尚未有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。,,設(shè)定保持電位-40mV，指令電壓為-50 ~+50mV，步階電壓10mV，刺激頻率為2Hz，刺激間隔為6s，記錄ICa。與給藥前相比，麻黃堿給藥后的高電壓依賴性鈣通道電流密度顯著性提高。*，P<0.05，與給藥前相比，配對t-檢驗(yàn)有顯著性差異

11、。,機(jī)制研究,鈣離子通道,,麻黃堿、β細(xì)辛醚和去甲烏藥堿各單體給藥前后鈣離子峰電流密度變化比較2μM麻黃堿顯著性提高了峰電流密度，而2μM 細(xì)辛醚或2μM去甲烏藥堿沒有提高鈣通道峰電流密度，反呈下降趨勢，但尚未呈顯著性差異。與給藥前相比，*P<0.05。,機(jī)制研究,鈣離子峰電流密度,β細(xì)辛醚給藥前后鈉離子電流變化給藥前鈉電流基礎(chǔ)值約為29.9±3.4 pA/pF，而1×10-5 M細(xì)辛醚使電流降低至1

12、8.4±2.3 pA/pF （n = 4）。根據(jù)Student’s t-test統(tǒng)計(jì)P ＜ 0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。,機(jī)制研究,鈉離子電流,機(jī)制與靶點(diǎn),,本研究中應(yīng)用關(guān)聯(lián)規(guī)則、聚類分析、頻數(shù)統(tǒng)計(jì)等數(shù)據(jù)挖掘手段總結(jié)緩慢性心律失常中醫(yī)心腎陽虛為其發(fā)病之本，血脈瘀阻為發(fā)病之標(biāo)的證治規(guī)律。,創(chuàng)新點(diǎn),,將中藥復(fù)方制劑與心臟起搏治療在提高心率與生活質(zhì)量改善方面做了頭對頭的比較研究，為中藥在臨床治療緩慢性心律失常的應(yīng)用提供了循證依據(jù)。,創(chuàng)新

13、點(diǎn),,在治療機(jī)制研究中發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方制劑對大鼠心肌細(xì)胞離子泵、縫隙連接蛋白、離子通道的影響，證實(shí)了中藥復(fù)方可以從多途徑、多環(huán)節(jié)、多靶點(diǎn)來治療緩慢性心律失常。研究中采用了目前最前沿的分子生物學(xué)研究方法—膜片鉗技術(shù)。,創(chuàng)新點(diǎn),每例患者起搏治療總費(fèi)用平均在5萬元左右，使用壽命約6-8年左右，平均費(fèi)用達(dá)6500元/年,,,,推廣應(yīng)用,應(yīng)用價(jià)值,接受藥物治療的患者治療費(fèi)用平均約1500元/年，按此計(jì)算，應(yīng)用中藥復(fù)方治療每延緩起搏治療1年，可減少年醫(yī)

14、療費(fèi)用5000元左右。,,,,目前在我省三所醫(yī)院統(tǒng)計(jì)年均治療病人3000例，平均降低醫(yī)療支出1500萬元。,,,,推廣應(yīng)用,應(yīng)用價(jià)值,預(yù)計(jì)推廣應(yīng)用后全省每年可減少醫(yī)療支出2億元。,,,,推廣應(yīng)用,應(yīng)用貢獻(xiàn),,,緩慢性心律失常但未達(dá)到起搏器治療標(biāo)，中藥治療可延緩部分患者起搏治療的時(shí)間。,,,達(dá)到起搏器治療標(biāo)準(zhǔn)，沒有經(jīng)濟(jì)能力或者主觀不愿意接受起搏器治療的患者。,,,不具備起搏器安裝技術(shù)的偏遠(yuǎn)地區(qū)的患者。,,,部分植入起搏器后的患者聯(lián)合中藥復(fù)