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文檔簡介
1、實驗一 細胞形態(tài)、細胞器的顯微結(jié)構(gòu)的觀察,,一、實驗目的,1.了解普通光學顯微鏡的工作原理,掌握光學顯微鏡的使用方法。2.熟悉光學顯微鏡下細胞的基本形態(tài)與結(jié)構(gòu)。,二、實驗原理,經(jīng)物鏡形成倒立實像,經(jīng)目鏡進一步放大成像。,顯微鏡物象是否清楚不僅決定于放大倍數(shù),還與顯微鏡的分辨力(resolution)有關,分辨力是指顯微鏡(或人的眼睛距目標25cm處)能分辨物體最小間隔的能力,分辨力的大小決定于光的波長和鏡口率以及介質(zhì)的折射率,用公
2、式表示為:R=0.61λ /N.A. N.A.=nsinα/2 式中:n=介質(zhì)折射率;α=鏡口角(標本對物鏡鏡口的張角),N.A.=鏡口率(numeric aperture)。鏡口角總是要小于180?,所以sina/2的最大值必然小于1。,制作光學鏡頭所用的玻璃折射率為1.65~1.78,所用介質(zhì)的折射率越接近玻璃的越好。對于干燥物鏡來說,介質(zhì)為空氣,鏡口率一般為0.05~0.95;油鏡頭用香柏油為介質(zhì),鏡口率可接近1.5。
3、普通光線的波長為400~700nm,因此顯微鏡分辨力數(shù)值不會小于0.2μm,人眼的分辨力是0.2mm,所以一般顯微鏡設計的最大放大倍數(shù)通常為1000X。,三、實驗用品,各種組織切片,可直接進行解剖及觀察并具有正像立體感的體視顯微鏡;能觀察活細胞的相差顯微鏡、暗場顯微鏡;對于雙折射物質(zhì)進行結(jié)構(gòu)研究的偏光顯微鏡;組織培養(yǎng)中長工作距離的倒置顯微鏡;圖像具有浮雕感的微分干涉顯微鏡;具有高分辨率可進行顯微斷層掃描的激光共聚焦顯微鏡。,四
4、、方法與步驟,(一)光學顯微鏡的構(gòu)造1.機械系統(tǒng) 用于固定材料和觀察方便。2.光學系統(tǒng) 由物鏡和目鏡組成,是顯微鏡的主體,為了消除球差和色差,目鏡和物鏡都由復雜的透鏡組構(gòu)成;3.照明系統(tǒng) 包括光源和聚光器,(二)顯微鏡的使用,1.聚光器的調(diào)節(jié)2.光闌的調(diào)節(jié)3.工作距離4.油鏡的使用,(三)觀察標本,(四)電鏡照片 ——細胞(Cell),植物細胞
5、(plant cell) 動物細胞 (animal cell),細胞核(nucleus),,線粒體(Mitochondrion),,外膜,,內(nèi)膜,,膜間隙,,基質(zhì),高爾基體(Golgi complex),電鏡 模型,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(endoplasmic reticulum, ER),電鏡照片,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,電鏡
6、 模型,核糖體(ribosome),溶酶體(lysosome),溶酶體時酸性細胞器, 含有一系列消化降解酶(degradative enzymes);分為初級溶酶體和次級溶酶體。,過氧化物酶體(peroxisome or microbody),是一種簡單的膜包圍的小泡, 具多種功能,含有50多種酶降解大分子,最終產(chǎn)生H2O2。 在植物種參與
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