溢油對微藻脂肪酸穩(wěn)定同位素組成的影響.pdf

1、為評價溢油對海洋浮游植物的影響，本文以特定化合物同位素分析技術(shù)(CSIA)為基礎(chǔ)，以溶解分散于水體的燃料油組分(WAF)為毒性物質(zhì)，單細胞海洋微藻作為實驗受體，選取了易于GC分離的微藻脂肪酸分子為最終研究對象。通過分析不同含量油WAF脅迫下的微藻脂肪酸穩(wěn)定碳同位素組成(δ13CFAs)變化情況，來判斷亞致死情況下藻細胞受影響程度，同時提取合適的“脂肪酸-同位素”生物標志物。
　　本研究主要內(nèi)容包括：⑴為判斷新鮮微藻樣品原位甲酯化法

2、是否適用于微藻δ13CFAs的分析，根據(jù)是否干燥、是否萃取、使用鹽酸還是硫酸作為催化劑，共設(shè)計八種方法：干燥微藻鹽酸-甲醇原位甲酯化；干燥微藻硫酸-甲醇原位甲酯化；干燥樣品、超聲萃取粗脂、鹽酸-甲醇轉(zhuǎn)酯化；干燥樣品、超聲萃取粗脂、硫酸-甲醇轉(zhuǎn)酯化；微藻脂鹽酸-甲醇原位甲酯化；微藻脂硫酸-甲醇原位甲酯化；新鮮微藻、超聲萃取粗脂、鹽酸-甲醇轉(zhuǎn)酯化；新鮮微藻、超聲萃取粗脂、硫酸-甲醇轉(zhuǎn)酯”。⑵為評價不同含量油WAF對微藻δ13CFAs的影響，

3、設(shè)計不同油WAF含量下、不同種類微藻的培養(yǎng)。總結(jié)δ13CFAs隨著WAF含量的變化趨勢，結(jié)果表明:微藻中均存在一些脂肪酸（大多為不飽和脂肪酸），呈現(xiàn)出“WAF含量-δ13CFA”的“劑量-效應”關(guān)系，δ13CFA隨著油WAF含量的規(guī)律性變化基本上符合Calabrese(2002)提出的“雙相劑量效應關(guān)系”，即低濃度刺激、高濃度抑制。不同微藻的“脂肪酸-同位素”標志物不同，δ13C16∶1和δ13C18∶4適用于標志湛江等鞭金藻，δ13C

4、16∶1適用于標志小新月菱形藻，δ13C20∶5、δ13C16∶4適用于標志青島大扁藻。⑶為評價油WAF對微藻δ13CFAs的長期影響，設(shè)計在不同油WAF含量下、不同種類微藻（湛江等鞭金藻、小新月菱形藻、青島大扁藻和纖細角毛藻）培養(yǎng)，不同時間點跟蹤取樣并分析。結(jié)果表明:與對照組相比，存在“油WAF使微藻的δ13CFAs出現(xiàn)短期上升、長期下降”的普遍規(guī)律，并且δ13CFA。變化較含量變化更為靈敏。在低含量油WAF脅迫下，提出細胞受損程度評