蛋白多肽藥物

1、第二節(jié) 多肽、蛋白類藥物,,一、概述 1、多肽類生化藥物是以多肽激素和多肽細胞生長因子為主的一大類內(nèi)源性活性成分。,多肽類藥物,二、多肽類藥物的制備,活性多肽是生化藥物中非?；钴S的一個領(lǐng)域，生物體內(nèi)已知的活性多肽主要是從內(nèi)分泌腺、組織器官、分泌細胞和體液中產(chǎn)生或獲得的。 （一）胸腺激素（Thymus hormones） 胸腺是一個激素分泌器官，對免疫功能有多方面的影響。胸腺依賴性的淋巴細胞群—T細胞直接參與

2、有關(guān)免疫反應(yīng)。 胸腺對T細胞發(fā)育的控制，主要通過由胸腺所產(chǎn)生的一系列胸腺激素，促使T細胞的前身細胞—前T細胞分化、增殖、成熟為T細胞的各種功能亞群，由此控制調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)的質(zhì)與量?，F(xiàn)已知某些免疫缺陷病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤以及老年性退化性病變等皆與胸腺功能的減退及血中胸腺激素水平的降低有關(guān)。,1、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) 胸腺素組分5是由在80℃熱穩(wěn)定的40~50種多肽組成的混合物，分子量在1000～15000之間，等電

3、點在3.5～9.5之間。2、生產(chǎn)工藝,3、工藝過程提取 勻漿、離心加熱去雜蛋白 提取液80℃加熱15min，沉淀 -10℃丙酮， 超濾 取分子量在15000以下的超濾液。脫鹽、干燥 超濾液經(jīng)Sephadex G-25脫鹽后，冷凍干燥得胸腺素。4、檢驗方法：活力測定：E-玫瑰花結(jié)升高百分數(shù)不得低于10％；分子量15000以下。5、作用與用途：為免疫調(diào)節(jié)劑。,（二）促皮質(zhì)素（Adrenocorticotropic

4、 hormone，ACTH）1．結(jié)構(gòu)和性質(zhì): 垂體包括腺垂體和神經(jīng)垂體，可分泌多種激素。 促皮質(zhì)素是從垂體前葉提取出來的一種多肽激素。 維持腎上腺皮質(zhì)的正常功能，促進皮質(zhì)激素的合成和分泌。臨床用于膠原?。L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡），也可用于過敏癥（嚴重哮喘、藥物過敏、蕁麻疹等）。改善老年人及智力遲鈍兒童的學(xué)習(xí)和記憶能力。還可作為診斷試劑。,易溶于水，等電點為6.6。在干燥和酸性溶液中較穩(wěn)定，雖經(jīng)100℃加熱，但活力

5、不減；在堿性溶液中容易失活。能溶解于70%的丙酮或70％的乙醇中。 ACTH為39個氨基酸組成的直鏈多肽，種屬差異僅僅表現(xiàn)在第25～33位上。ACTH的24肽即1～24位的片段（ACTH 1～24）具有全部活性。這是因為ACTH的第24位氨基酸之后的部分，不參與同受體的作用，它僅維持整個多肽結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。 ACTH可被胃蛋白酶部分水解，但仍有活力，ACTH在溶液中存在著高度的 α－螺旋。,2、生產(chǎn)工藝,732、717除鹽,羧甲基

6、纖維素鈉，攪拌、過濾,717處理色素、熱原、負離子 梯度洗脫,3、工藝過程：提取 分離 精制CMC（羧甲基纖維素 弱酸） 717處理色素、熱原、負離子 梯度洗脫。 732、717除鹽（動態(tài)吸附） 4、檢驗方法 ACTH粗品每1mg相當于1U以上，用小白鼠胸腺萎縮法測定；ACTH精品每1mg45U以上，用去垂體大白鼠的腎上腺維生素C降低法測定。,（三）降鈣素（Calcitonin， CT）

7、1、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) 降鈣素是一種調(diào)節(jié)血鈣濃度的多肽激素，由甲狀腺內(nèi)的濾泡旁細胞（C細胞）分泌。 抑制破骨細胞活力，阻止鈣從骨中釋放，降低血鈣。 臨床用于：骨質(zhì)疏松癥、甲狀旁腺機能亢進、成人高血鈣癥、畸形性骨炎 是由32個氨基酸殘基組成的單鏈多肽，N端半胱氨酸與7位半胱暗算形成二硫鍵，C端為脯氨酸，降鈣素肽鏈的脯氨酸端與生物活性有密切的關(guān)系，去掉脯氨酸則失活。,降鈣素分子量約3500，

8、 溶于水和堿性溶液，不溶于丙酮、乙醇、氯仿、乙醚、苯、異丙醇及四氯化碳等，難溶于有機酸。水溶液中2~7℃ 可保存7天。 降鈣素在人及哺乳動物體內(nèi)，主要存在于甲狀腺、甲狀旁腺、胸腺和腎上腺等組織中，魚類則在鮭、鰻、鱒等的終鰓體里含量較多。各種不同動物來源的降鈣素，氨基酸排列順序有些差異。 制造降鈣素的原料主要有豬甲狀腺和鮭、鰻的心臟或心包膜。,離心，取上清，洗滌沉淀,粉末，可進一步純化,2、生產(chǎn)工藝,

9、（四）表皮生長因子 （Epidermal growth factor，EGF）,1、發(fā)現(xiàn)與醫(yī)學(xué)成果 1974年從人尿中提純出人的表皮生長因子（hEGF）,其結(jié)構(gòu)由53個氨基酸組成，分子量6201道爾頓，分子內(nèi)有6個半胱氨酸組成的二硫鍵，形成3個分子內(nèi)環(huán)型結(jié)構(gòu)，組成生物活性所必須的受體結(jié)合區(qū)域。EGF無糖基部位，非常穩(wěn)定，耐熱耐酸，廣泛存在于體液和多種腺體中，主要由頜下腺、十二指腸合成，在人體的絕大

10、多數(shù)體液中均已發(fā)現(xiàn)，在乳汁、尿液、精液中的含量特異性地增高，但在血清中的濃度較低。眾多的實驗研究表明，EGF可刺激多種細胞的增殖，主要是表皮細胞、內(nèi)皮細胞。用于角膜損傷、燒燙傷及手術(shù)等創(chuàng)面的修復(fù)和愈合取得了很好的療效，Montalcini 和Cohen教授因為發(fā)現(xiàn)表皮生長因子并分析其結(jié)構(gòu)和作用機理，1986年諾貝爾生理學(xué)及醫(yī)學(xué)獲獎。,2、生理作用： 表皮生長因子通過與細胞表面的受體表皮生長因子受體(EGFR)結(jié)合而起作用。與表

11、皮生長因子受體的高親和力結(jié)合，激發(fā)受體內(nèi)在的酪氨酸激酶的活性，從而啟動了信號傳導(dǎo)級聯(lián)而導(dǎo)致多種生物化學(xué)變化，細胞內(nèi)鈣水平上升, 增加糖酵解與蛋白質(zhì)合成, 增加某些基因(包括表皮生長因子受體)的表達, 最終導(dǎo)致DNA合成和細胞增殖。,3、美容領(lǐng)域的作用嫩膚作用滋潤皮膚消除皺紋修復(fù)創(chuàng)傷預(yù)防色斑,4、對人體的作用對骨骼系統(tǒng)的作用　 促進生成大量的成骨細胞、抑制破骨細胞。治療骨質(zhì)酥松、股 骨頭壞死、關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕病和因鈣缺乏

12、導(dǎo)致的疾病。 對消化系統(tǒng)的作用　　 加強胃腸功能，促進消化酶的分解，增進食欲，治療慢性胃炎。 對血液系統(tǒng)的作用　　 加強骨髓造血功能，促進干細胞生成，進而生成大量紅細胞和白細胞。加強左心室厚度，增強心肌彈性力，高效治療心臟病。有效清除血液中低密度蛋白，防止在血管壁沉積，治療血栓。,對呼吸系統(tǒng)的作用 　加強肺部細胞功能，修正氣血屏障，消除肺部毒素，治療肺氣腫、肺供養(yǎng)不足和呼吸系統(tǒng)疾病。 對內(nèi)分泌系統(tǒng)的作用

13、 　促進人體荷爾蒙生長，加強各種酶、荷爾蒙的分泌，增強腎功能，加強水的代謝，幫助體內(nèi)排毒。 對生殖系統(tǒng)的作用　 刺激性激素分泌，強壯性器官肌肉組織，加強性器官神經(jīng)耐力，打開微循環(huán)，加快性器官充血。,對免疫系統(tǒng)的作用 刺激胸腺再生，加快淋巴T細胞、B細胞、吞噬細胞的生成，提高免疫功能，吞噬病毒病菌和癌細胞，治療癌癥和腫瘤。 對神經(jīng)系統(tǒng)的作用 　加快恢復(fù)神經(jīng)系統(tǒng)功能，促進腦神經(jīng)細胞、樹突生成，逆

14、轉(zhuǎn)腦萎縮，加快深度睡眠，治療老年性癡呆、神經(jīng)衰弱、記憶力減退、神經(jīng)性頭痛等。,5、表皮生長因子的生產(chǎn)工藝(1),表皮生長因子的生產(chǎn)工藝(2),高效價的抗重組人表皮生長因子 (EGF)的制備： 單克隆抗體以重組人表皮生長因子作為抗原 ,免疫Balb/c小鼠 ,以未免疫的Balb/c小鼠脾細胞為飼養(yǎng)細胞 ,運用細胞雜交瘤技術(shù)制備 ,間接ELISA法篩選產(chǎn)生針對人表皮生長因子的單克隆抗體細胞株 ;以體內(nèi)誘生法產(chǎn)生腹

15、水 ,并采用ProteinA Sepharose柱對其純化,表皮生長因子的生產(chǎn)工藝(3),蛋白類藥物的制備,一、概述,二、主要蛋白質(zhì)類藥物的制備,純化根據(jù)目的蛋白與雜質(zhì)之間的差異進行純化。1.根據(jù)蛋白質(zhì)的pI的不同進行純化，其方法有： 1）pI沉淀法 2）pI沉淀法與鹽析法相結(jié)合 3）等電聚焦法2.蛋白質(zhì)分子形狀和大小的不同進行純化，其方法有 1）凝膠過

16、濾 2）超濾法 3） 離心法 4）透析法3.蛋白質(zhì)的溶解度不同進行純化，其方法有： 1)鹽溶與鹽析法 2）結(jié)晶法 3）有機溶劑沉淀法4.蛋白質(zhì)電離性質(zhì)不同進行分離：離子交換法5.蛋白質(zhì)功能專一性不同進行純化：親和層析法、假親和層析法6.蛋白質(zhì)在溶劑系統(tǒng)中分配不同進行純化：萃取法7.蛋白質(zhì)的選擇性吸附的性

17、質(zhì)進行純化：吸附法8.蛋白質(zhì)的其他特殊性質(zhì)進行純化,（一）白蛋白（Albumin）1、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) 白蛋白又稱清蛋白，是血漿中含量最多的蛋白質(zhì)，約占總蛋白的55％。 主要功能是維持血漿膠體滲透壓。用于失血性休克、嚴重?zé)齻?、低蛋白血癥。 白蛋白為單鏈，由575個氨基酸殘基組成，分子量為65000，pI4.7，沉降系數(shù)4.6，電泳遷移率5.92?？扇苡谒桶腼柡偷牧蛩徜@溶液中，一般當硫酸銨的飽和度為60％

18、以上時析出沉淀。,對酸較穩(wěn)定。在白蛋白溶液中加入氯化鈉或脂肪酸的鹽，能提高白蛋白的熱穩(wěn)定性，可利用這種性質(zhì)，使白蛋白與其他蛋白質(zhì)分離。人血漿中分離的白蛋白有兩種制品： 一種是從健康人血漿中分離制得的，稱人血清白蛋白； 另一種是從健康產(chǎn)婦胎盤血中分離制得的，稱胎盤血白蛋白。 制劑為淡黃色略粘稠的澄明液體或白色疏松狀（凍干）固體。,2、生產(chǎn)工藝,（1）工藝路線： 利凡諾和白蛋白在堿性條件下，可形成結(jié)合力很強的黃

19、色粘稠絡(luò)合物，難溶于水和堿液（2）工藝過程：提取、分離、精制利凡諾沉淀 弱酸性，氯化鈉 超濾器濃縮 熱處理，滅活病毒 除菌（過濾）。,（二）人丙種球蛋白（γ-lmmunoglobulin） 1、結(jié)構(gòu)和性質(zhì) 免疫球蛋白是一類主要存在于血漿中、具有抗體活性的糖蛋白。對血清進行電泳后發(fā)現(xiàn)，抗體成分存在于β和Y球蛋白部分，故通稱為免疫球蛋白（Ig）。免疫球蛋白約占血漿蛋白總量的20%

20、。除存在于血漿中外，也少量地存在于其它組織液、外分泌液和淋巴細胞的表面。 具有被動免疫作用，可用于預(yù)防流行性疾病如：病毒性肝炎、脊髓灰質(zhì)炎、風(fēng)疹、水痘＆丙種球蛋白缺乏癥。,2、生產(chǎn)工藝工藝路線：,（三）、 胰島素,1921年----從動物胰腺中提取出胰島素，開創(chuàng)了人類胰島素治的歷史。1926年----重結(jié)晶胰島素1930s----傳統(tǒng)中、長效動物胰島素1970s----單峰胰島素和單組分胰島素70年代末---

21、-半合成胰島素1982年----采用基因重組技術(shù)生產(chǎn)的人胰島素正式上市90年代至今----重組人胰島素類似物成功研發(fā)上市，包括超短效和長效人胰島素類似物。臨床：胰島素依賴性糖尿病及糖尿病合并感染,目前臨床使用的胰島素來源,動物胰臟來源----經(jīng)動物胰臟提取或適當提純的豬、牛胰島素半合成胰島素----以豬胰島素為原料，酶修飾后得到人胰島素重組DNA技術(shù)生產(chǎn)胰島素----重組DNA技術(shù)生產(chǎn)人胰島素、速效胰島素、長效胰島素,

22、1.結(jié)構(gòu)與性質(zhì)結(jié)構(gòu)：51個氨基酸，有A（21）、B（30）兩條鏈，兩鏈之間由兩個二硫鍵連接，在A鏈本身還有一個二硫鍵。胰島素的前體是胰島素原由連接肽（C肽）將A、B鏈相連，不同動物的C肽氨基酸組成也不同，C肽兩端的4個堿性氨基酸被水解去除后，即形成一分子胰島素和一分子無活性的C肽。,,性質(zhì)胰島素為白色或類白色粉末結(jié)晶。由于精制方法不同，在顯微鏡下觀察，可分兩種形態(tài)， 一種為不規(guī)則細微顆粒,稱“無定形”

23、另一種為扁斜形六面體牛胰島素分子量為5733，豬胰島素分子量為5761，人胰島素分子量為5781。胰島素的等電點為5.30-5.35。,胰島素在pH值為4.5-6.5范圍內(nèi)，幾乎不溶水，在室溫下溶解度為10μg/mL；易溶于稀酸或稀堿溶液；在80%以下乙醇或丙酮中溶解；在90%以上乙醇或80%以上丙酮中難溶；在乙醚中不溶。胰島素具有蛋白質(zhì)的各種特殊反應(yīng)：高濃度的鹽（如飽和氯化鈉、半飽和硫酸銨溶液）可使其沉淀析出，也能被蛋白質(zhì)沉淀

24、劑和三氯醋酸等沉淀，并有茚三酮、雙縮脲等蛋白質(zhì)的顯色反應(yīng)。,2.生產(chǎn)工藝,提?。簝鲆葔K用刨胰機刨碎后加入2.3-2.6倍的86%-88%乙醇(W/V)和5%的草酸,在10-15℃攪拌提取3小時。離心，濾渣再用一倍量68-70%乙醇和0.4%草酸提取2小時，離心，合并乙醇提取液，沉淀用于回收。 堿化、酸化：提取液在不斷攪拌下加入濃氨水調(diào)pH值到8.0-8.4(液溫10-15℃)立即進行矸濾，除去堿性蛋白質(zhì)，濾液應(yīng)澄清，并及時用硫酸酸

25、化至pH值3.6-3.8。降溫至5℃靜置4小時以上，使酸性蛋白充分沉淀。 減壓濃縮：吸上層清液至減壓濃縮鍋內(nèi)；下層用帆布過濾，沉淀物棄去，濾液并入上清液。清液在30℃以下減壓蒸去乙醇，濃縮至濃縮液比重為1.04-1.06（約為原來體積的1/9-1/10）為止。,4）去脂、鹽析：濃縮液轉(zhuǎn)入去脂鍋，5分鐘內(nèi)加熱至50℃，立即用冰鹽水降溫至5℃，靜置3-4小時，分離出下層清液（脂層可回收胰島素）。調(diào)pH值到2.3-2.5。于20-25℃

26、在攪拌下加入27%(W/V)固體氯化鈉，保溫靜置數(shù)小時，析出之物即為胰島素粗品。  5）精制 ①除酸性蛋白：鹽析物按干重計算，加入7倍量蒸餾水溶解，再加入3倍量的丙酮，用4mol氨水調(diào)pH值為4.2-4.3，然后補國丙酮，使溶液中水和丙酮的比例7：3。充分攪拌后，低溫放置過液，使溶液冷至5℃以下，次日在低溫下離心分離，或用過濾法將沉淀分離。,去脂、鹽析：濃縮液轉(zhuǎn)入去脂鍋，5分鐘內(nèi)加熱至50℃，立即用冰鹽水降溫至5℃，靜置

27、3-4小時，分離出下層清液（脂層可回收胰島素）。調(diào)pH值到2.3-2.5。于20-25℃在攪拌下加入27%(W/V)固體氯化鈉，保溫靜置數(shù)小時，析出之物即為胰島素粗品。 精制 ①除酸性蛋白：鹽析物按干重計算，加入7倍量蒸餾水溶解，再加入3倍量的丙酮，用4mol氨水調(diào)pH值為4.2-4.3，然后加丙酮，使溶液中水和丙酮的比例7：3。充分攪拌后，低溫放置過液，使溶液冷至5℃以下，次日在低溫下離心分離，或用過濾法將沉淀分離。

28、,②鋅沉淀：在濾液中加入氨水調(diào)pH值至6.2-6.4,加入的醋酸鋅溶液，再用氨水調(diào)pH值6.0，低溫放置，次日過濾，分離沉淀。③結(jié)晶：將沉淀用冷丙酮洗滌，得干品，其充分溶解,冷到5℃以下, 使整個溶液體系保持丙酮含量為16%,慢速攪拌3-5小時使結(jié)晶析出.在顯微鏡下觀察,外形為似下正方形或扁斜形六面體結(jié)晶.再轉(zhuǎn)入5℃左右低溫室放置3-4天,使結(jié)晶完全。結(jié)晶離心收集，并小心刷去上層灰黃色無定形沉淀，用蒸餾水或醋酸銨緩沖洗滌，再用丙酮、

29、乙醇脫水，離心后，在五氧化二磷真空干燥箱中干燥，即得結(jié)晶胰島素，效價應(yīng)在25U /mg以上。,3.質(zhì)量檢驗原料質(zhì)量采摘胰臟注意保持腺體完整，離體后馬上深凍，避免蛋白酶水解胰島素濃縮影響大采用薄膜濃縮純度要求,4.酶促半合成人胰島素 豬與人兩種胰島素的差別僅是B30位上，豬的C端為丙氨酸，人的則是蘇氨酸。經(jīng)胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰氨作用，將豬胰島素轉(zhuǎn)化為人胰島素B30蘇氨酸（丁?；┒∷幔ㄟ^硅膠柱層析，然后用三氟乙酸處

30、理，斷裂保護基團，再用離子交換層析純化，可得到高純度人胰島素。,5.重組DNA技術(shù)制造人胰島素 人工合成人胰島素基因克隆到大腸桿菌中，產(chǎn)生人胰島素已經(jīng)工業(yè)化，1982年，美、英等國批準產(chǎn)品投入市場，并載入藥典。,（四）明膠,1、明膠是動物的皮、骨、白色結(jié)締組織中含有的膠原蛋白，經(jīng)提純和初級水解后加工而制得的一種產(chǎn)品。2、理化性質(zhì)： 明膠為淡黃至黃色，半透明微帶光澤的粉?；虮∑?，無特殊臭味，無揮發(fā)性。一般明膠含水在16

31、%以下，在干燥環(huán)境明膠比較穩(wěn)定，在潮濕環(huán)境下易吸潮被細菌分解而變質(zhì)。明膠在灼燒時，變軟脹大直至炭化，放出一種特殊的角燃燒羽毛或氨的臭味?！≡诶渌忻髂z難 溶解，但能吸水而變軟，而在熱水中極易溶解。明膠難溶于汽油、乙醇、氯仿等普通有機溶劑。但可溶于醋酸、水楊酸和苯二甲酸等有機酸，還可溶于尿素、硫脲及溴化鉀、碘化鉀等水溶液中?！　∶髂z是一種高分子化合物， 其分子量約為17500－450000。。,從分子量和性質(zhì)來

32、總結(jié)它們有以下特點：    （1）膠原具有生物活性，不溶于熱水和冷水，不能被蛋白酶利用；    （2）明膠相對是膠原分子量較高的水解物，只溶于熱水不溶于冷水，膠原蛋白是相對分子量較低的水解產(chǎn)物，而且分子量分布比明膠更寬，可溶于冷水；    （3）明膠和膠原蛋白均無生物活性，但均可被蛋白酶利用。    從結(jié)構(gòu)上來

33、分析，膠原是具共價鍵連接三股α-肽鏈的蛋白質(zhì)，明膠是共價鍵基本被打斷，只剩次級鍵的蛋白質(zhì)，而膠原蛋白是基本上不被共價鍵和次級鍵束縛，比較自由的α-肽鏈或明膠分子的片斷。    從性能上講，膠原能形成膜，膜具有較好的柔韌性、彈性和強度。,生物醫(yī)學(xué)材料及臨床應(yīng)用：各種膠片(彩色、黑白)；手術(shù)縫合線（膠原可吸收縫合線、膠原-聚乙烯醇可吸收縫合線，膠原-殼聚糖可吸收縫合線、膠原-殼聚糖-聚丙烯可吸收縫合線）；人工

34、皮膚；人工血管；人工食管；明膠心臟瓣膜支架；   藥品和藥用輔料：藥用膠原止血纖維；明膠海綿；氧化聚明膠代血漿、琥酰明膠代血漿、海星明膠代血漿；膠原-聚乙烯醇水凝膠、明膠-殼聚糖水凝膠；藥用明膠膠囊、藥用軟膠囊，藥用明膠微囊；丸劑、片劑和軟膠囊的輔料。   在美容和化妝品方面的應(yīng)用：膠原蛋白至少具有保濕、修復(fù)、美白和潤澤頭發(fā)四大美容作用，與其他化合物配伍制成各類美容產(chǎn)品

35、。在化妝品方面應(yīng)用的主要產(chǎn)品有平衡霜、潤膚乳液、曬后修復(fù)霜、營養(yǎng)洗發(fā)香波、膠原維生素E乳膏、膠原蛋白水包油型乳膏等。,3、明膠的應(yīng)用,在食品中的應(yīng)用：膠原蛋白和明膠在食品中有營養(yǎng)和功能兩大作用，從營養(yǎng)學(xué)角度來講，機體對蛋白質(zhì)的利用是一個極其復(fù)雜的生物轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，是各種因素在一起作用的綜合結(jié)果。表示蛋白質(zhì)在機體內(nèi)被利用的程度用生物價(%)來量化，其具體含義是食物蛋白質(zhì)在體內(nèi)被吸收的氮的數(shù)量（g）與吸收后在體內(nèi)真正被利用的氮的數(shù)量（g）之比值

36、，牛奶蛋白質(zhì)、雞蛋蛋白質(zhì)、大豆粉蛋白質(zhì)、面粉中的蛋白質(zhì)、明膠的蛋白質(zhì)的生物價分別為90%、87%、72%、52%和20%，明膠雖然只有20%，但隨著明膠的進一步水解成為膠原蛋白或水解明膠后，其生物價則大大提高。從功能學(xué)的角度出發(fā)，明膠具有極其優(yōu)良的物理性質(zhì)，是一種重要的食品添加劑，它通常作為食品的乳化劑、粘合劑、穩(wěn)定劑、凝膠劑、澄清劑、增稠劑、發(fā)泡劑和改良劑，也可以模擬食品，如仿生海參、人造魚翅、人工發(fā)菜、可食食品包裝膜、腸衣等等。

37、   在其他工業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用：造紙業(yè)（各類復(fù)合紙）；制革工業(yè)，皮革的鞣制；化工工業(yè)，表面活性劑的生產(chǎn)。,4、主要原料：　 主要原料是豬、牛、羊等動物的皮，包括鮮皮和干皮。皮產(chǎn)主要來自兩方面。制革廠制革時割下的邊角皮，零碎破以及不適合制革的皮；第二是肉類加工廠、食品廠剝下的鮮豬皮。,5、明膠的制備堿法：　　 整理 預(yù)浸灰 切碎 浸灰 退灰

38、 中和 水洗 熬膠 過濾 濃縮 防腐 冷凍切膠 干燥 水洗 成品備注：　　1、膠液比重為1.002－1.007?！　?、含膠量為4.5－7%。,,,,,,,,,,,,,,,6 片劑和膠囊用明膠（Gelatin）四國藥典比較,問題膠囊---利用制革工業(yè)的廢革或皮革邊角料為原料所提取的工業(yè)明膠，業(yè)內(nèi)人士稱之為“藍釩膠”（含大量對人體有害的重金屬如鉻

39、和細菌等微生物 ）,金屬鉻會破壞人體骨骼以及造血干細胞，長期食用會導(dǎo)致骨質(zhì)疏松，嚴重的會患上癌癥。鉻對人體健康的這種危害是一個緩慢的過程，一般在2年以上才會顯現(xiàn)出來如何鑒別“毒”膠囊·質(zhì)脆：一般工業(yè)明膠做的膠囊質(zhì)量比較差，相對比較脆，因為工業(yè)產(chǎn)品雜質(zhì)多。·色艷：膠囊顏色越鮮艷的越要小心。食用明膠是透明的、白色的，很干凈。工業(yè)明膠會多加香精、染色劑來掩飾雜質(zhì)。·口松易擰：工業(yè)明膠做的膠囊質(zhì)量、材料、

40、工藝差，膠囊口是松的，容易擰開。http://tv.sohu.com/20120416/n340694017.shtml,第三節(jié) 核酸藥物,一、分類 依據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)和組成分類1. 核酸堿基及其衍生物 別嘌呤醇、巰嘌呤、磺硫嘌呤、氟尿嘧啶等2. 核苷及其衍生物 腺苷類：腺苷、腺苷甲硫氨酸、阿糖腺苷等 尿苷類：尿苷、呋喃氟尿嘧啶、氮雜尿苷等 胞苷類：阿糖胞苷、環(huán)胞苷、氮雜胞苷等 肌苷類：肌苷、肌苷二

41、醛、異丙肌苷等 脫氧核苷類：氮雜脫氧核苷、脫氧硫鳥苷等,3.核苷酸及其衍生物 單核苷酸類：AMP、UMP、IMP、cAMP、CoA 等 核苷二磷酸類：尿二磷葡萄糖(UDPG)、胞二磷膽堿(CDPCholine) 核苷三磷酸類：ATP、CTP、UTP、GTP 等 核苷酸類混合物：5－核苷酸、2 －核苷酸、3－核苷酸等 4.多核苷酸 二核苷酸：CoⅠ、CoⅡ、黃素腺嘌呤二核苷酸（FAD） 多核苷酸類：R

42、NA、DNA、poly I:C、poly A:U、轉(zhuǎn)移因子（TF）,（2）依據(jù)結(jié)構(gòu)特點及臨床應(yīng)用情況分類,核酸疫苗: 是將編碼某種抗原蛋白的外源基因(DNA 或RNA ) 直接導(dǎo)入動物體細胞內(nèi), 并通過宿主細胞的表達系統(tǒng)合成抗原蛋白, 誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對該抗原蛋白的免疫應(yīng)答, 以達到預(yù)防和治療疾病的目的。反義藥物: 主要指反義寡核苷酸(ODNs), 即其核苷酸序列可與靶mRNA或靶DNA互補, 抑制或封閉基因的轉(zhuǎn)換和表

43、達,或誘RnaseH 識別或切割mRNA, 使其喪失功能.,反義藥物與傳統(tǒng)藥物的性質(zhì)和作用對象明顯不同，表現(xiàn)為: 　 新的化學(xué)物質(zhì)-核酸； 　　新的藥物受體-mRNA，DNA； 　 新的受體結(jié)合方式-Watson-Crick雜交； 　新的藥物受體結(jié)合后反應(yīng)-如RNase H介導(dǎo)的靶RNA的降解。 　反義藥物與傳統(tǒng)藥物相比具有以下優(yōu)點： 　特異性較強。一個15聚體的反義寡核苷酸含有30-45氫鍵，而低分子的傳統(tǒng)藥物（

44、200-600u）與靶點一般只形成1-4個鍵； 　信息量較大。遺傳信息從DNA-RNA-蛋白質(zhì)，用互補寡核苷酸阻斷某種蛋白的合成是很準確的； 　反義藥物以核酸為靶點，與蛋白質(zhì)作為靶點比較，更易合理設(shè)計新藥物。由于作用于遺傳信息傳遞的上游，所需藥量較低，副作用可能較少,RNA的生產(chǎn),1、工業(yè)用RNA的提取,2、具有生物活性RNA的制備,從核糖核蛋白中分離RNA,DNA生產(chǎn)方法,1.工業(yè)用DNA的提取,2.具有生物活性DNA 的制備,核

45、苷酸的制備,1、酶水解: DNA或RNA為原料制備5′－核苷酸常用的酶：橘青霉產(chǎn)生的5′－磷酸二酯酶,2、發(fā)酵法: （1）產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵生產(chǎn)肌苷酸（IMP）：腺嘌呤營養(yǎng)缺陷型嘌呤核苷酸生物合成途徑和代謝調(diào)控,（2）IMP積累的主要途徑（前提）保證IMP合成路線暢通：保證關(guān)鍵酶PRPP轉(zhuǎn)酰胺酶的活力---解除腺嘌呤及衍生物的組遏和反饋抑制阻斷IMP的去路：阻斷SAMP合成阻斷IMP的分解 篩選獲得缺乏SAM