從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘選多肽藥物

1、北京大學(xué)政學(xué)者論文集（2002年）從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘選藥物454從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘選多肽藥物從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘選多肽藥物ionofPeptidedrugsfromPhagedisplayedRomPeptideLibrary生命科學(xué)學(xué)院99級(jí)沈抒殫摘要摘要以凝血酶為靶分子，利用噬菌體展示和親和淘選技術(shù)，從隨機(jī)十五肽庫(kù)中篩選到結(jié)合凝血酶的3個(gè)特異結(jié)合肽克隆，并對(duì)其中結(jié)合活性最強(qiáng)的短肽進(jìn)行了序列測(cè)定。ELISA鑒定結(jié)果表

2、明，3個(gè)克隆對(duì)于凝血酶都有一定的結(jié)合能力，且都與凝血酶的天然抑制劑水蛭素產(chǎn)生競(jìng)爭(zhēng)。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞：噬菌體展示，隨機(jī)肽庫(kù)，淘選，凝血酶AbstractAbstractThrombinastargetmoleculewiththenewbiotechniqueofphagedisplaybiopanning3specialbindingpeptidecloneswereedoutfromaphagedisplayedrom15peptidel

3、ibrary.Thesequenceoftheclonewhichhadthehighestaffinitywiththrombinhasbeendetermined.DataofELISAshowedthatallthethreeclonescouldbecombinedtothrombintosomeextent.allofthemcouldcompetewithhirudinwhichisthenaturalinhibitofth

4、rombin.Keywds:phagedisplayrompeptidelibrarybiopanningthrombin一、前言噬菌體展示隨機(jī)多肽庫(kù)噬菌體展示隨機(jī)多肽庫(kù)技術(shù)是以噬菌體展示技術(shù)（phagedisplay）為基礎(chǔ)北京大學(xué)政學(xué)者論文集（2002年）從噬菌體展示隨機(jī)肽庫(kù)中淘選藥物456異結(jié)合的多肽。在理論上可以通過對(duì)凝血酶結(jié)合多肽的序列性質(zhì)分析來研究凝血酶受體的可能性質(zhì)；在應(yīng)用上通過對(duì)凝血酶結(jié)合肽的研究可以期望進(jìn)一步找出有效

5、的抗血栓藥，具有一定的實(shí)際意義。二、實(shí)驗(yàn)材料（一）菌株大腸桿菌(Escherichiacoli)TG1，輔助噬菌體M13KO7均為本實(shí)驗(yàn)室保存。（二）主要試劑噬菌體展示十五肽庫(kù)為本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建（庫(kù)容量1.36108），凝血酶購(gòu)自Pharmacia公司，粗制牛凝血酶為天津血液所產(chǎn)品，凝血酶底物ChromzymTH購(gòu)自BoehringerMannheim公司，HRP－M13抗體購(gòu)自華美公司，96孔酶標(biāo)板為Nunc公司產(chǎn)品ELISA試劑均為華美

6、公司產(chǎn)品。主要溶液的配制：PBS：1PBS：133mmollNaCl3mmolLKCl8mmolLNa2HPO41.5mmolLKH2PO410PBS：80.0gNaCl2.0gKCl11.5gNa2HPO47H2O20.0gKH2PO4溶于1升H2O中，調(diào)至pH7.5，高壓滅菌。PBSTween20(PBST)：1升1PBS中加入1ml吐溫（Tween）－20。PBSM:100mlPBS中加入2g脫脂奶粉，離心取上清。50mmolL甘