需氧革蘭陽性桿菌及檢驗(yàn)

1、需氧革蘭陽性桿菌及檢驗(yàn),華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬協(xié)和醫(yī)院熊 艷,革蘭陽性桿菌菌屬間的鑒別,第一節(jié) 棒狀桿菌屬,棒狀桿菌屬的共同特征,革蘭陽性多形態(tài)桿菌無莢膜、無鞭毛、無芽胞細(xì)菌呈不規(guī)則柵欄狀排列需氧或兼性厭氧觸酶試驗(yàn)陽性細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和血清學(xué)分析，證實(shí)與分枝桿菌屬、奴卡氏菌屬有共同的成分。,一．白喉棒狀桿菌,（一）生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性菌落特征生化反應(yīng)抗原構(gòu)造抵抗力,2024/3/15,

2、,形態(tài)與染色,細(xì)長(zhǎng)彎曲、一端或兩端膨大的革蘭陽性桿菌。無莢膜、無芽胞、無鞭毛、無菌毛。細(xì)菌排列呈散在L、V、Y字形及不規(guī)則柵欄狀。,用美藍(lán)、Neisser法、Albert法等染色時(shí)，在細(xì)菌的一端或兩端有濃染的顆粒，此顆粒與菌體著色不同，稱為異染顆粒，為本菌重要形態(tài)學(xué)特征，對(duì)鑒別細(xì)菌有重要意義。,2024/3/15,,培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧，生長(zhǎng)溫度為15–40℃，最適生長(zhǎng)溫度為35–37℃，pH7.2–7.8。,營(yíng)養(yǎng)要求高，在普通培養(yǎng)

3、基上雖能生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)不良，形態(tài)不典型，大多需要特殊氨基酸。在加有血液、血清或雞蛋的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)迅速，形態(tài)典型，異染顆粒明顯。,菌落特征,血平板：灰白、狹窄β溶血環(huán)。雞蛋斜面和血清斜面：生長(zhǎng)迅速，灰白色有光澤菌落。亞碲酸鉀血平板：為選擇培養(yǎng)基，菌落呈黑色。菌落分為重型、輕型或中間型。,2024/3/15,生化反應(yīng),觸酶（+），氧化酶（-）能分解葡萄糖、麥芽糖、果糖等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不分解乳糖、多數(shù)不分解蔗糖。靛基質(zhì)試驗(yàn)－、明膠液化

4、－、尿素分解－,抗原構(gòu)造,菌體O抗原：與分枝桿菌、奴卡菌有共同抗原。K抗原：型特異性抗原，不耐熱。,抵抗力,對(duì)濕熱和一般消毒劑敏感。對(duì)冷和干燥有一定抵抗力。,（二）致病性,致病物質(zhì)：白喉外毒素由攜帶β-棒狀桿菌噬菌體的白喉?xiàng)U菌產(chǎn)生。作用機(jī)制：抑制細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的合成。經(jīng)呼吸道飛沫傳播，引起白喉。假膜脫落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要原因。中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因。,（三）免疫性,抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的

5、中和作用。成人絕大多數(shù)具有免疫性，主要由于隱性感染所獲得的免疫力。錫克試驗(yàn)用于檢測(cè)機(jī)體有無白喉抗毒素抗體存在。,（四）微生物學(xué)檢驗(yàn),標(biāo)本采集 檢驗(yàn)程序 檢驗(yàn)方法生化反應(yīng)毒力試驗(yàn),標(biāo)本采集,用無菌長(zhǎng)棉拭子，從疑為假膜的邊緣采集分泌物。 未見假膜的疑似患者或帶菌者可采集鼻咽部或扁桃體粘膜上的分泌物。,檢驗(yàn)程序,咽拭標(biāo)本,亞碲酸鉀 血平板,觀察菌落特征,直接涂片 革蘭染色異染顆粒染色,血平板,,,,,,,呂氏血清斜

6、面,,直接涂片 革蘭染色異染顆粒染色,,,,,,,,,涂片染色鏡檢 生化反應(yīng) 毒力試驗(yàn),檢驗(yàn)方法,標(biāo)本直接涂片 革蘭染色：觀察形態(tài)、染色性 異染顆粒染色：觀察異染顆粒 初步報(bào)告：檢出形似白喉棒狀桿菌分離培養(yǎng) 呂氏斜面：生長(zhǎng)迅速，涂片鏡檢異染顆粒明顯 亞碲酸鉀血平板：黑色菌落,生化反應(yīng),根據(jù)糖發(fā)酵是否產(chǎn)酸可鑒別棒狀桿菌中的不同種。 白喉棒狀桿菌發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸，不分

7、解蔗糖；尿素酶（–）、硝酸鹽還原試驗(yàn)（+）等可用于與其他棒狀桿菌的鑒別。,毒力試驗(yàn),意義：是鑒定白喉?xiàng)U菌為致病菌株的重要依據(jù)方法 艾立克平板毒力試驗(yàn) 對(duì)流電泳法 協(xié)同凝集試驗(yàn) 動(dòng)物實(shí)驗(yàn),二．其他棒狀桿菌,第二節(jié) 需氧芽胞桿菌屬,芽胞桿菌屬共同特點(diǎn),絕大多數(shù)菌種在有氧條件下形成不大于菌體橫徑的芽胞除炭疽芽胞桿菌外均有動(dòng)力和溶血能力非抗酸性營(yíng)養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好

8、,一．炭疽芽胞桿菌,（一）生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性菌落特征生化反應(yīng)抗原構(gòu)造抵抗力,2024/3/15,,形態(tài)與染色,為致病菌中最大的革蘭陽性桿菌，兩端齊平或凹陷，呈竹節(jié)狀，單個(gè)或呈短鏈狀排列。 無鞭毛，形成芽胞，有毒菌株可形成莢膜。,人工培養(yǎng)或在外界環(huán)境中易產(chǎn)生芽胞，在活體或完整未經(jīng)解剖的尸體內(nèi)不形成芽胞，所以炭疽病尸體嚴(yán)禁解剖。,2024/3/15,培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧。營(yíng)養(yǎng)要求不高，普

9、通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)良好。,2024/3/15,菌落特征,普通瓊脂平板：菌落扁平、粗糙，不透明灰白色，無光澤，邊緣不整齊，在低倍鏡下可見到菌落邊緣呈卷發(fā)狀。 血液瓊脂平板：培養(yǎng)12～15h，菌落周圍無溶血環(huán)，18～24h后可有輕微溶血，而其他需氧芽胞桿菌大多數(shù)溶血明顯而快速。液體培養(yǎng)基中呈絮狀生長(zhǎng)明膠培養(yǎng)基中呈倒置的杉樹有毒株在NaHCO3培養(yǎng)基中形成莢膜，菌落呈粘液狀，有拉絲。,有毒株在NaHCO3血瓊脂平板上置5%CO2環(huán)境中培養(yǎng)

10、18～24h，可產(chǎn)生莢膜，菌落由粗糙型變?yōu)檎骋盒?，而呈現(xiàn)半圓形，突起，有光澤的菌落。以接種針挑取時(shí)呈拉絲狀，此為鑒別菌落要點(diǎn)，而無毒株則形成粗糙型菌落。,生化反應(yīng),分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。不分解乳糖。觸酶（+），VP（–），吲哚（–），尿素（–） 。,抗原結(jié)構(gòu),炭疽毒素：由保護(hù)性抗原、致死因子、水腫因子組成的蛋白質(zhì)復(fù)合物，后兩者單獨(dú)不能發(fā)揮生物活性作用，都必須與保護(hù)性抗原組合才能引起實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的水腫致死。具有抗吞噬作用和免疫

11、原性，故患炭疽后有免疫力。莢膜抗原：與細(xì)菌毒力有關(guān)，失去莢膜后毒力也就消失。該抗原具有高度特異性，在臨床診斷中有鑒別診斷價(jià)值。,2024/3/15,,菌體抗原：耐熱、耐腐敗，無毒性，有種特異性。芽胞抗原：芽胞的外膜含有抗原決定簇，與皮質(zhì)層一起組成炭疽芽胞桿菌芽胞的特異性抗原，此抗原具有免疫原性和血清學(xué)診斷價(jià)值。,Ascoli熱沉淀反應(yīng)：感染動(dòng)物尸體組織浸出液煮沸半小時(shí)后，耐熱的菌體抗原不被破壞，能與特異性抗體發(fā)生環(huán)狀沉

12、淀反應(yīng)，稱Ascoli熱沉淀反應(yīng)，對(duì)炭疽病具有一定的診斷價(jià)值。,抵抗力,本菌繁殖體抵抗力與其它細(xì)菌相同，芽胞抵抗力很強(qiáng)。在干燥的土壤或者皮毛中可存活20余年。 芽胞對(duì)碘和氧化劑敏感。 耐藥性：本菌對(duì)磺胺類、青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星敏感。,（二）致病性與免疫性,致病物質(zhì)：炭疽毒素、莢膜所致疾病　經(jīng)多途徑感染，引起炭疽病。　臨床類型：肺炭疽、腸炭疽、皮膚炭疽、敗血癥?！偃诵蠊不紓魅静。劳雎矢?。免疫性：病后可獲得持

13、久性免疫力，再次感染者甚少。,（三）微生物學(xué)檢驗(yàn),標(biāo)本采集檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)方法,標(biāo)本采集,標(biāo)本采集　病人血液、痰、糞便、滲出液、腦脊液等?！∷劳霾⌒髽?biāo)本：死于敗血癥的動(dòng)物，嚴(yán)禁宰殺、解剖，可在消毒皮膚后割取耳朵、舌尖、采集少量血液。　污染物品：皮革、獸毛、土壤等。標(biāo)本處理：無雜菌污染標(biāo)本直接接種，有雜菌污染標(biāo)本先加熱殺死繁殖體和雜菌再接種。,已處理標(biāo)本,直接涂片,增菌培養(yǎng),分離培養(yǎng),Ascoli試驗(yàn),革蘭染色莢膜染色,初步報(bào)

14、告,血平板戊烷脒瓊脂平板,可疑菌落,菌落涂片染色鏡檢,鑒定試驗(yàn),肉湯培養(yǎng),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),動(dòng)物死亡,分離培養(yǎng),●噬菌體裂解●串珠試驗(yàn)●青霉素抑制試驗(yàn),,,,,,,,,,,,,,,,,,,,檢驗(yàn)方法,涂片染色鏡檢　革蘭染色：涂片后升汞固定，革蘭染色發(fā)現(xiàn)革蘭陽性粗大桿菌、有莢膜，呈竹節(jié)樣排列可初步報(bào)告。分離培養(yǎng)：一般接種血平板，37℃培養(yǎng)24h后觀察菌落特點(diǎn)。污染的標(biāo)本先加熱處理再接種。動(dòng)物試驗(yàn)：注射部位膠樣水腫，肝脾腫大，出血等。

15、在芽胞桿菌屬中，除蠟樣芽胞桿菌毒素對(duì)動(dòng)物有致病作用外，炭疽芽胞桿菌是唯一具有致病力者。,鑒定試驗(yàn),青霉素抑制試驗(yàn) 炭疽芽胞桿菌在含5 IU/ml的青霉素培養(yǎng)基上能生長(zhǎng)，而在含10、100 IU/ml的青霉素培養(yǎng)基上受到抑制不生長(zhǎng)。,鑒定試驗(yàn),串珠試驗(yàn) 與類炭疽芽胞桿菌鑒別 炭疽芽胞桿菌受低濃度青霉素作用后，在形態(tài)上發(fā)生明顯的變化。如將本菌幼稚培養(yǎng)物接種于含0.05～0.5U/ml青霉素的培養(yǎng)基上，

16、37℃6h，菌體腫大呈圓珠狀，稱串珠反應(yīng)。 此反應(yīng)可能與青霉素抑制細(xì)菌胞壁的合成作用有關(guān)，為炭疽桿菌所特有，可用于與其他類炭疽芽胞桿菌的鑒別。,鑒定試驗(yàn),青霉素和串珠聯(lián)合試驗(yàn) 噬菌體裂解試驗(yàn) 與類炭疽芽胞桿菌鑒別 NaHCO3毒力試驗(yàn) 有毒力的炭疽桿菌形成莢膜，菌落呈粘液型，無毒力的炭疽桿菌不形成莢膜，菌落呈粗糙型。,2024/3/15,鑒定試驗(yàn),植物凝集素試驗(yàn) 根據(jù)炭疽芽胞桿菌菌體多

17、糖是植物凝集素受體的原理。Ascoli熱沉淀試驗(yàn) 用已知的抗炭疽桿菌抗體測(cè)定標(biāo)本中未知的抗原。炭疽桿菌沉淀原具有耐高熱特征，在尸體組織和皮毛中數(shù)年仍能檢出，故可作追溯性診斷。,炭疽芽胞桿菌與其它需氧芽胞桿菌的鑒別,二．蠟樣芽胞桿菌,（一）生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性菌落特征生化反應(yīng)抵抗力,形態(tài)與染色,革蘭陽性大桿菌，兩端較鈍、鏈桿狀，長(zhǎng)短不一，有鞭毛，無莢膜，可形成芽胞。,2024/3/15,培養(yǎng)特性,需氧或兼

18、性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高。,普通瓊脂平板：可形成圓形、隆起、灰白色、不透明、R型蠟滴樣大菌落。 血瓊脂平板：菌落呈淺灰色，似毛玻璃狀，菌落周圍有α或β溶血。,乳光反應(yīng)或卵黃反應(yīng)： 在卵黃瓊脂平板上生長(zhǎng)迅速，培養(yǎng)3h后，雖看不到菌落，但該菌可分解卵磷脂而形成白色的混濁環(huán)，即為乳光反應(yīng)或卵黃反應(yīng)。,生化反應(yīng),分解葡萄糖、麥芽糖、蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖。 VP（+），液化明膠。,抵抗力,耐熱，抵抗力強(qiáng), 能耐受1

19、00℃30min。,（二）致病性,條件致病菌，主要引起食物中毒。 臨床上分為兩種類型： 腹瀉型：由不耐熱的腸毒素引起。 嘔吐型：由耐熱的腸毒素引起。,（三）微生物學(xué)檢驗(yàn),1．標(biāo)本采集 除進(jìn)行本菌的分離培養(yǎng)外，必須作活菌計(jì)數(shù)。因暴露于空氣中的食物，在一定程度上都受本菌污染，故不能因分離出蠟樣芽胞桿菌則認(rèn)為是引起食物中毒的病原菌。 2．檢驗(yàn)程序,3．檢驗(yàn)方法,直接鏡檢： 活菌計(jì)

20、數(shù) ： 一般認(rèn)為蠟樣芽胞桿菌的活菌數(shù)大于105 /mL時(shí)，即有發(fā)生食物中毒的可能。 分離培養(yǎng) ：鑒定,第三節(jié) 產(chǎn)單核李斯特菌,一．生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu)抵抗力,2024/3/15,（一）形態(tài)與染色,革蘭陽性小桿菌，直或稍彎，常呈V字形成對(duì)排列，有時(shí)呈絲狀，偶爾可見雙球狀。 多數(shù)菌體一端較大，似棒狀，易誤認(rèn)為是污染的類白喉棒狀桿菌； 又因菌體短小

21、，三、五成鏈，并有β溶血性，易與鏈球菌混淆，用觸酶試驗(yàn)加以區(qū)別。,在22～25℃環(huán)境中形成4根鞭毛，故在25℃肉湯培養(yǎng)液中運(yùn)動(dòng)活潑；而在37℃時(shí)僅形成1根鞭毛，動(dòng)力緩慢。,2024/3/15,（二）培養(yǎng)特性,需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高。4～45℃均能生長(zhǎng)，最適溫度30～37℃。因在4℃能生長(zhǎng)，故可進(jìn)行冷增菌。 初時(shí)菌落極小似露珠狀、光滑透明，通過側(cè)光微顯藍(lán)綠色，37℃培養(yǎng)數(shù)日，菌落增大變成灰暗，血平板上的菌落有狹窄的β溶

22、血環(huán)。,（三）生化反應(yīng),1～2d內(nèi)發(fā)酵葡萄糖、果糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，在3～10d內(nèi)可發(fā)酵乳糖、蔗糖、阿拉伯糖。觸酶陽性，VP（+），MR（+）。,2024/3/15,（四）抗原結(jié)構(gòu),分為4個(gè)血清型，1型主要感染嚙齒動(dòng)物，各型對(duì)人類均可致病，但以1a和lb最為多見。 本菌與葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌及大腸埃希菌等具有共同抗原。,（五）抵抗力,在土壤、糞便、飼料中能長(zhǎng)期存活。耐鹽、耐堿、不耐酸。對(duì)熱敏感，對(duì)—般消毒劑敏感，

23、70％的乙醇5min即可殺死本菌。,二．致病性,本菌常伴隨EB病毒引起傳染性單核細(xì)胞增多癥。,三．微生物學(xué)檢驗(yàn),（一）標(biāo)本采集（二）檢驗(yàn)程序,2024/3/15,（三）檢驗(yàn)方法,1．分離培養(yǎng) 2．鑒定要點(diǎn) 形態(tài)染色：革蘭陽性小桿菌。β溶血：本菌的β溶血環(huán)很窄，往往把菌落刮去，方可見菌落下面的β溶血環(huán)。動(dòng)力試驗(yàn)：25℃動(dòng)力陽性。4℃能生長(zhǎng),第四節(jié) 紅斑丹毒絲菌,一．生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng),20

24、24/3/15,（一）形態(tài)與染色,革蘭陽性桿菌，單個(gè)或形成短鏈狀，粗糙型菌落形成長(zhǎng)絲狀。無鞭毛，無莢膜，無芽胞。,（二）培養(yǎng)特性,厭氧或微需氧菌。初次分離需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)，傳代后在有氧條件下也能生長(zhǎng)。,2024/3/15,（三）生化反應(yīng),氧化酶（–），觸酶（–），發(fā)酵葡萄糖、乳糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。,二．致病性,紅斑丹毒牡菌為紅斑丹毒絲菌病的病原體。 主要發(fā)生在魚類、家畜、家禽和兔類，人類也感染發(fā)病。 人接觸動(dòng)物或其產(chǎn)品經(jīng)皮膚損

25、傷而引起類丹毒。以局部感染為主，繼而發(fā)展成淋巴管炎，可轉(zhuǎn)變成關(guān)節(jié)炎。也可引起急性敗血癥或心內(nèi)膜炎。,2024/3/15,,三．微生物學(xué)檢驗(yàn),（一）標(biāo)本采集（二）檢驗(yàn)程序,（三）檢驗(yàn)方法 1．直接鏡檢 2．分離培養(yǎng) 3．生化反應(yīng) 4．動(dòng)物試驗(yàn),第五節(jié) 陰道加特納菌,一．生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抵抗力,（一）形態(tài)與染色

26、,本菌革蘭染色視菌株和菌齡不同而異。本菌具有多形性，兩端鈍圓，無鞭毛，無莢膜，無芽胞。,2024/3/15,（二）培養(yǎng)特性,兼性厭氧菌，營(yíng)養(yǎng)要求較高，在一般營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上不生長(zhǎng)。,在含5%人血瓊脂平板上置5%CO2，35～37℃培養(yǎng)24h后，形成針尖大小菌落；經(jīng)48h后形成β溶血、圓形、光滑不透明的菌落。,2024/3/15,（三）生化反應(yīng),氧化酶（–），觸酶（–），尿素酶（–）。發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、蔗糖等，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。,（四）抵抗力,

27、所有菌株對(duì)氨芐青霉素、羧芐青霉素、苯唑青霉素、青霉素、萬古霉素和甲硝唑敏感；對(duì)萘啶酸、新霉素、粘菌素和磺胺嘧啶耐藥。,二．致病性,陰道加特納菌和厭氧菌在陰道內(nèi)過度生長(zhǎng)，造成陰道正常菌群微生態(tài)平衡失調(diào)，而引起非特異細(xì)菌性陰道?。˙V）。 可導(dǎo)致婦產(chǎn)科多種嚴(yán)重并發(fā)癥。如子宮全切術(shù)后感染、絨毛膜炎等。 本菌還能引起新生兒敗血癥和軟組織感染。,2024/3/15,并非GV陽性者都是BV，因?yàn)?0～40%的正常婦女陰道也可檢出此菌。

28、 BV診斷標(biāo)準(zhǔn)： 陰道分泌物增多，稀薄均質(zhì)灰白色，有惡臭味。 分泌物pH＞4.5～4.7。 分泌物胺試驗(yàn)陽性。 鏡檢有線索細(xì)胞。,三．微生物學(xué)檢驗(yàn),（一）標(biāo)本采集（二）檢驗(yàn)程序,2024/3/15,（三）檢驗(yàn)方法,1．陰道分泌物直接檢查 直接濕片鏡檢：線索細(xì)胞 涂片染色鏡檢： pH測(cè)定：陰道pH＞4.7，提示細(xì)菌性陰道炎。 胺試驗(yàn)：,2．分離培養(yǎng),分枝桿菌屬及檢驗(yàn),分枝桿菌屬主要特點(diǎn),是一類直

29、或微彎曲、有分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)的桿菌。細(xì)胞壁脂質(zhì)含量高，主要為分枝菌酸。具有抗酸性，革蘭染色不易著色，常用抗酸染色。專性需氧，營(yíng)養(yǎng)要求特殊，大多數(shù)生長(zhǎng)緩慢。不產(chǎn)內(nèi)、外毒素和侵襲性酶等致病物質(zhì)，其致病性與菌體成分有密切關(guān)系，所致疾病呈慢性。,分枝桿菌屬種類,第一節(jié) 結(jié)核分枝桿菌,一．生物學(xué)特性,形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抵抗力變異性,形態(tài)與染色,細(xì)長(zhǎng)略彎，分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)。無芽孢，無鞭毛，部分菌株有莢膜。革蘭染色陽性，不

30、易著色。抗酸染色陽性，多數(shù)菌體含有一至數(shù)個(gè)異染顆粒。,結(jié)核分枝桿菌（抗酸染色）,培養(yǎng)特性,生長(zhǎng)條件： 細(xì)胞內(nèi)寄生菌，專性需氧，8%～12%CO2可刺激其生長(zhǎng)。最適pH6.5～6.8。 營(yíng)養(yǎng)要求較高，必須在含有血清、卵黃、甘油、馬鈴薯以及無機(jī)鹽類的特殊培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)。 生長(zhǎng)現(xiàn)象： ※生長(zhǎng)緩慢，在一般的培養(yǎng)基中每分裂一代的速度為18～24h。 ※改良羅氏培養(yǎng)基菌落特征：干燥、淡黃色、 質(zhì)地較硬的R型菌

31、落 ※液體培養(yǎng)基：形成菌膜，有毒株呈索狀生長(zhǎng)。,結(jié)核分枝桿菌菌落,生化反應(yīng),生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵糖類。觸酶陽性。與非結(jié)核分枝桿菌鑒別： 耐熱觸酶試驗(yàn)－；（非結(jié)核分枝桿菌＋）與牛分枝桿菌鑒別 煙酸試驗(yàn)＋；（牛分枝桿菌－）,抵抗力,抵抗力特點(diǎn)：“三耐四敏” ※耐干燥、耐酸堿、耐孔雀綠（1:13000） ※對(duì)濕熱、70％乙醇、紫外線、常用抗結(jié)核藥物（但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性）敏感。

32、結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞壁含有大量脂質(zhì)，酒精較易滲入細(xì)胞壁將其殺死，故對(duì)70%～75%的酒精敏感。但脂質(zhì)可防止菌體內(nèi)水分丟失，故對(duì)干燥的抵抗力特別強(qiáng)。,變異性,※典型形態(tài)－→多形性 ※ R型菌落－→S型菌落 ※有毒－→無毒（用于制備疫苗） ※抗結(jié)核藥敏感－→耐藥,二．致病性與免疫性,致病物質(zhì)所致疾病免疫性與變態(tài)反應(yīng),致病物質(zhì),脂質(zhì) 索狀因子：與該菌毒力有密切關(guān)系 磷脂： 分枝菌酸：與抗酸性有關(guān)

33、 蠟質(zhì)D：具有佐劑作用 硫酸腦苷脂：蛋白質(zhì)糖類結(jié)核桿菌不產(chǎn)生內(nèi)、外毒素，不產(chǎn)生侵襲性酶。,所致疾病,經(jīng)多途徑感染，引起結(jié)核病，以肺結(jié)核多見類型：原發(fā)感染和繼發(fā)感染,免疫性與變態(tài)反應(yīng),※抗結(jié)核免疫以細(xì)胞免疫為主 ※抗結(jié)核免疫屬帶菌免疫 ※抗結(jié)核免疫與Ⅳ型超敏反應(yīng)同時(shí)出現(xiàn),結(jié)核菌素試驗(yàn),原理：用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)，以檢測(cè)受試者對(duì)結(jié)核桿菌是否有細(xì)胞免疫及遲發(fā)型超敏反應(yīng)的試驗(yàn)。結(jié)果：根據(jù)注射部位是否出現(xiàn)紅腫判斷

34、結(jié)果 ＜5mm為陰性 ≥5mm為陽性 ≥15mm為強(qiáng)陽性應(yīng)用：選擇卡介苗接種對(duì)象；判斷卡介苗接種效果；輔助診斷嬰幼兒結(jié)核?。粶y(cè)定腫瘤患者細(xì)胞免疫狀態(tài)。,結(jié)核分枝桿菌－－檢驗(yàn)程序,結(jié)核分枝桿菌－－涂片檢查,直接涂片 薄涂片 厚涂片集菌涂片 沉淀集菌法 漂浮集菌法熒光顯微鏡檢查法： 金剛胺O染色→熒光顯微鏡下檢查

35、,抗酸染色－－報(bào)告方式,結(jié)核分枝桿菌－－分離培養(yǎng),標(biāo)本前處理： ※目的：殺死雜菌；液化標(biāo)本 ※方法： 4％NaOH法； 4％H2SO4法； 胰酶-新潔爾滅法等培養(yǎng)基選擇：羅氏培養(yǎng)基、米氏培養(yǎng)基、小川培養(yǎng)基等接種培養(yǎng),培養(yǎng)結(jié)果記錄與報(bào)告方法,非典型分枝桿菌,是指結(jié)核分枝桿菌與麻風(fēng)分枝桿菌以外的分枝桿菌。大多為環(huán)境中的腐

36、生菌。對(duì)酸堿比較敏感。對(duì)常用抗結(jié)核藥耐受。為條件致病菌，艾滋病患者易感染鳥復(fù)合分枝桿菌。,麻風(fēng)分枝桿菌－－生物學(xué)性狀,為抗酸桿菌。細(xì)胞內(nèi)寄生。有麻風(fēng)桿菌寄生的細(xì)胞呈泡沫狀，稱為麻風(fēng)細(xì)胞。體外人工培養(yǎng)尚未成功。犰狳是動(dòng)物感染模型。,犰狳,麻風(fēng)分枝桿菌－－臨床意義與微檢,經(jīng)呼吸道、接觸感染引起麻風(fēng)病 瘤型麻風(fēng)（開放型）：傳染性強(qiáng) 結(jié)核樣型（閉鎖性）：傳染性弱微檢：標(biāo)本涂片抗酸染色是診斷麻風(fēng)的主要依據(jù),麻風(fēng)桿菌,