電化學(xué)發(fā)光法測定食品中四環(huán)素總量【文獻(xiàn)綜述】

1、文獻(xiàn)綜述文獻(xiàn)綜述應(yīng)用化學(xué)應(yīng)用化學(xué)電化學(xué)發(fā)光法測定食品中四環(huán)素總量摘要：摘要：本文總結(jié)比較了用微生物法、色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測定食品中四環(huán)素含量的優(yōu)缺點(diǎn)，并對運(yùn)用電化學(xué)發(fā)光法測定食品中四環(huán)素總量的方法進(jìn)行了評述。關(guān)鍵字關(guān)鍵字：四環(huán)素微生物法色譜法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）電化學(xué)發(fā)光法（ECL）一、四環(huán)素的分析概況一、四環(huán)素的分析概況四環(huán)素類(tetracyclinesTCs)抗生素分子式為C22H26N2O7，分子量43

2、0.45，它們具有十二氫化并四苯基結(jié)構(gòu)，是一種廣譜抗菌藥物。由于具備抗菌譜廣以及價格低廉等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于畜禽、水生動物和蜜蜂養(yǎng)殖中，也被用于預(yù)防和治療多種感染性疾病、促生長、提高飼料轉(zhuǎn)化率等。其結(jié)構(gòu)為：R3R2OHOHR1OHNOHCONH2OOCH3H3CR1=R2=HR3=CH3:tetracyclineR1=OR2=CH3R3=H:oxytracyclineR1=HR2=CH3R3=H:chltetracyclineR1=O

3、HR2=R3=H:doxycycline.圖1四環(huán)素類抗生素的結(jié)構(gòu)式常用的TCs主要有：四環(huán)素(tetracyclineTC)、金霉素(chltetracyclineCTC)、土霉素(oxytetracyclineOTC)、強(qiáng)力霉素(doxycyclineDC)等。人們長期食用含有這類藥物的動物產(chǎn)品及其制品，會嚴(yán)重危及人類的身體健康。因此許多國家和組織對TCs殘留實(shí)施的最大殘留值限定(maximumresiduelimitsMRLs)，

4、如：歐盟規(guī)定在肝臟中殘留的MRLs為0.3mgkg，牛奶或者肌肉中的MRLs為0.1mgkg，蜂蜜中的MRLs為0.01mgkg[1]，電化學(xué)發(fā)光法測定食品中四環(huán)素總量2100μgkg、200μgkg、300μgkg分別為100、98和98%，TC為97、98和104%，CTC為101、98和105%。UeonR等[11]建立了一種食用魚和小蝦中四環(huán)素和土霉素的HPLC檢測方法。以甲醇草酸為流動相，兩者比值為1:9，用28%的氨水調(diào)節(jié)p

5、H值為7.0，檢測波長為360nm，檢測限為0.02μgg。色譜法靈敏度高，并且準(zhǔn)確性好，但樣品前處理過程非常復(fù)雜、分析測試的價格昂貴、分析速度慢，不適合于現(xiàn)場、快速的檢測分析。1.3酶聯(lián)免疫吸附法酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)是目前我國測定動物食品中TCs的國標(biāo)法[12]。其方法是將試樣中殘留的四環(huán)素類藥物經(jīng)提取和結(jié)合在酶標(biāo)版上的抗原共同競爭抗四環(huán)素類藥物抗體上有限的結(jié)合位點(diǎn)，在通過與酶標(biāo)羊抗免抗體反應(yīng)，酶標(biāo)

6、記物將底物轉(zhuǎn)化為有色產(chǎn)物，有色產(chǎn)物的吸光值與試樣中金霉素、土霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素濃度成反比。DeWh等[13]采用酶聯(lián)免疫吸附法分析測定了豬肉和雞肉中四環(huán)素類藥物的殘留，可檢測到四環(huán)素類藥的最低水平是歐洲的MRL值或更低。應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測動物性產(chǎn)品中金霉素、土霉素、四環(huán)素、多西環(huán)素等四環(huán)素類藥物的報道很多，這些報道中的檢測限均低于20μgkg，回收率在45%～120%。酶聯(lián)免疫吸附法具有儀器簡單、操作方便，靈敏度高，專屬性強(qiáng)，適用于

7、大批量樣品分析等優(yōu)點(diǎn)，目前已廣泛應(yīng)用于動物性食品中四環(huán)素類藥物殘留的檢測，其存在的缺點(diǎn)是檢測結(jié)果具有一定的假陽性，且只能測定四環(huán)素類藥物總殘留量，不能進(jìn)行單獨(dú)分析。以上方法不可避免都有一定局限性。微生物法雖然原理及操作簡單，但是測定所花時間太長、靈敏度低、特異性差，且農(nóng)牧產(chǎn)品中殘留的其他藥物極易干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。薄層色譜法具有簡便、快速、不需要復(fù)雜儀器等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于四環(huán)素混合物的快速定性檢測，但該方法分辨率、靈敏度較低，且易于產(chǎn)生干擾

8、。HPLC法是目前報道和應(yīng)用最多的四環(huán)素類藥物殘留的檢測方法，一般可以進(jìn)行準(zhǔn)確的定量測定，具有高效、快速、靈敏度高、檢出率高等優(yōu)點(diǎn)，特別是在對同類藥物殘留的檢測中精密度好，回收率高，可廣泛應(yīng)用于動物性產(chǎn)品中抗生素殘留量的監(jiān)測和監(jiān)控，但該方法不能準(zhǔn)確定性，尤其是違禁藥物的定性檢測。ELISA操作方便、儀器簡單，但靈敏度較低，且抗干擾能力差。綜上所述，建立一種快速，經(jīng)濟(jì)，準(zhǔn)確的檢測四環(huán)素類藥物的殘留方法是非常重要的。目前，TCs的電化學(xué)發(fā)光