最全的tlc經(jīng)驗 薄層層析 顯色劑

1、最全的最全的TLC經(jīng)驗經(jīng)驗薄層色譜（TLC）是一種非常有用的跟蹤反應(yīng)的手段，還可以用于柱色譜分離中合適溶劑的選擇。薄層色譜常用的固定相有氧化鋁或硅膠，它們是極性很大（標(biāo)準(zhǔn)）或者是非極性的（反相）。流動相則是一種極性待選的溶劑。在5.301中以及大多數(shù)實驗室實驗中，都將使用標(biāo)準(zhǔn)硅膠板。將溶液中的反應(yīng)混合物點在薄板上，然后利用毛細作用使溶劑（或混合溶劑）沿板向上移動進行展開。根據(jù)混合物中組分的極性，不同化合物將會在薄板上移動不同的距離。極性

2、強的化合物會“粘”在極性的硅膠上，在薄板上移動的距離比較短。而非極性的物質(zhì)將會在流動的溶劑相中保留較長的時間從而在板上移動較大的距離?；衔镆苿拥木嚯x大小用Rf值來表達。這是一個位于0～1之間的數(shù)值，它的定義為：化合物距離基線（最先點樣時已經(jīng)確定）的距離除以溶劑的前鋒距離基線的距離。薄層色譜（薄層色譜（TLC）實驗步驟：）實驗步驟：1)切割薄板。切割薄板。通常，買來的硅膠板都是方形的玻璃板，必需用鉆石頭玻璃刀按照模板的形狀進行切割。在切

3、割玻璃之前，用尺子和鉛筆在薄板的硅膠面上輕輕地標(biāo)出基線的位置（注意不要損壞硅膠面）。借助鋒利的玻璃切割刀和一把引導(dǎo)尺，你便可方便地進行玻璃切割。當(dāng)整塊玻璃被切割后，你就可以進一步將其分成若干獨立的小塊了。（開始的時候，也許你會感到有一些難度，但經(jīng)過一些訓(xùn)練以后，你便會熟練地掌握該項技術(shù)。）2)選取合適的溶劑體系。選取合適的溶劑體系?；衔镌诒“迳弦苿泳嚯x的多少取決于所選取的溶劑不同。在戊烷和己烷等非極性溶劑中，大多數(shù)極性物質(zhì)不會移動，但

4、是非極性化合物會在薄板上移動一定距離。相反，極性溶劑通常會將非極性的化合物推到溶劑的前段而將極性化合物推離基線。一個好的溶劑體系應(yīng)該使混合物中所有的化合物都離開基線，但并不使所有化合物都到達溶劑前端，Rf值最好在0.15~0.85之間。雖然這個條件不一定都能滿足，但這應(yīng)該作為薄層色譜分析的目標(biāo)（在柱色譜中，合適的溶劑應(yīng)該滿足Rf在0.2~0.3之間）。那么，應(yīng)該選取哪些溶劑呢？一些標(biāo)準(zhǔn)溶劑和他們的相對極性（從LLP中摘錄）列于如下：強極

5、性溶劑：甲醇〉乙醇〉異丙醇中等極性溶劑：乙氰〉乙酸乙酯〉氯仿〉二氯甲烷〉乙醚〉甲苯非極性溶劑：環(huán)己烷，石油醚，己烷，戊烷常用混合溶劑：乙酸乙酯己烷：常用濃度0~30%。但有時較難在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上完全除去溶劑。乙醚戊烷體系：濃度為0~40%的比較常用。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上非常容易除去。乙醇己烷或戊烷：對強極性化合物5~30%比較合適。二氯甲烷己烷或戊烷：5~30%，當(dāng)其他混合溶劑失敗時可以考慮使用。3)將1~2mL選定的溶劑體系倒入展開池中，在展

6、開池中放置一大塊濾紙。選定的溶劑體系倒入展開池中，在展開池中放置一大塊濾紙。4)將化合物在標(biāo)記過的基線處進行點樣。將化合物在標(biāo)記過的基線處進行點樣。我們用的點樣器是買來的，此外，點樣器也可從加熱過的Pasteur吸管上拔下（你可以參照UROP）。在跟蹤反應(yīng)進行時，一定要點上起始反應(yīng)物、反應(yīng)混合物以及兩者的混合物。5)展開：展開：讓溶劑向上展開約90%的薄板長度。6)從展開池中取出薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達的前沿位置。從展開池中取出

7、薄板并且馬上用鉛筆標(biāo)注出溶劑到達的前沿位置。根據(jù)這個算Rf數(shù)值。7)讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。讓薄板上的溶劑揮發(fā)掉。8)用非破壞性技術(shù)觀察薄板。用非破壞性技術(shù)觀察薄板。最好的非破壞性方法就是用紫外燈進行觀察。將薄板放在紫外燈下，用鉛筆標(biāo)出所有有紫外活性的點。盡管在5.301中不用這種方法，但我們將采用另一常用的無損方法用碘染色法。（你可以參看UROP）。9)用破壞性方式觀測薄板。用破壞性方式觀測薄板。當(dāng)化合物沒有紫外活性的時候，只能采用這種

8、方法。在5.3013，5一二硝基苯酰氯檢出物：醇類。溶液：I2％本品甲苯溶液；Ⅱ0.5％氫氧化鈉溶液；ⅢO.002％羅丹明溶液。方法：先噴(I)，在空氣中干燥過夜，用蒸氣薰2min，將紙或薄層通過試液(Ⅱ)30s，噴水洗，趁濕通過(Ⅲ)15s，空氣干燥，紫外燈下觀察。硝酸鈰銨檢出物：醇類。溶液：I1％硝酸鈰銨的0.2mol／L硝酸溶液；ⅡNN二甲基對苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m125m115m1)混合液中，用前將(I

9、)與(Ⅱ)等量混合。噴板后于105oC加熱5min。③香草醛／硫酸檢出物：高級醇、酚、甾類及精油。溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。方法：噴后于120oC加熱至呈色最深。④二苯基苦基偕肼’檢出物：醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。方法：噴后于110oC加熱5～lOmin。結(jié)果：紫色背景呈黃色斑點。(3)醛酮類品紅／亞硫酸檢出物：醛基化合物。溶液：I0.01%品紅溶液，通入二氧化硫直至無色；Ⅱ0.05mo

10、l／L氯化汞溶液；ⅢO.05mol／L硫酸溶液。方法：將I、Ⅱ、Ⅲ以1：1：10混合，用水稀釋至l00ml。鄰聯(lián)茴香胺檢出物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。2，4二硝基苯肼檢出物：醛基、酮基及酮糖。溶液：I0.4％本品的2mol／L鹽酸溶液；Ⅱ本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加濃鹽酸lml。方法：噴溶液I或Ⅱ后，立即噴鐵氰化鉀的2mol／L鹽酸溶液。結(jié)果：飽和酮立即呈藍色；飽和醛反應(yīng)慢，呈橄欖綠色；不飽和羰基化合物不顯色。繞丹寧

11、檢出物：類胡蘿卜素醛類。溶液：I1%～5%繞丹寧乙醇溶液；Ⅱ25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。方法：先噴溶液I，再噴溶液Ⅱ，干燥。(4)有機酸類1溴甲酚綠檢出物：有機酸類。溶液：溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1molL氫氧化鈉溶液5ml。方法：浸板。結(jié)果：藍色背景產(chǎn)生黃色斑點。2高錳酸鉀／硫酸檢出物：脂肪酸衍生物。溶液：見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。3過氧化氫檢出物：芳香酸。溶液：0.3%過氧化氫溶液。方法：噴后置紫外光(365

12、nm)下觀察。結(jié)果：呈強藍色熒光。42，56二氯苯酚靛酚鈉檢出物：有機酸與酮酸。溶液：0.1%本品的乙醇溶液。方法：噴后微溫。結(jié)果：藍色背景呈紅色。(5)酚類1Emerson試劑(4氨基安替比林／鐵氰化鉀(Ⅲ))檢出物：酚類、芳香胺類及揮發(fā)油。溶液：I4氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；Ⅱ鐵氰化鉀(Ⅲ)4g溶于水50ml，2用乙醇稀釋至100ml。方法：先噴溶液I，3在熱空氣中干燥5min，4再噴溶液Ⅱ，5再于熱空氣中干燥5min，6

13、然后將板置含有氨蒸氣(25％氨溶液)的密閉容器中。結(jié)果：斑點呈橙淡紅色。揮發(fā)油在亮黃色背景下呈紅色斑點。7Boute反應(yīng)檢出物：酚類、氯、溴、烷基代酚。方法：將薄層置有NO2蒸氣(含濃硝酸)的容器中3～10min，8再用NH2蒸氣(濃氨液)處理。9氯醌(四氯代對苯醌)檢出物：酚類。溶液：1％本品的甲苯溶液。10DDQ(二氯二氰基苯醌)試劑檢出物：酚類。溶液：2％本品的甲苯溶液。11TCNE(四氰基乙烯)試劑檢出物：酚類、芳香碳氫化物、雜